При изучении влияния вспомогательных веществ на биофармацевтические свойства капсулированной лекарственной формы Секстафаг® с помощью дисперсионного анализа и расчетного значения критерия Фишера установлено, что значимым фактором для обеспечения высокой литической активности секстафага в модельной капсулируемой композиции является фактор А (F расч > F табл). Множественное сравнение показало, что A4>A3>A2>A1. Определены ряды предпочтительности иммобилизирующего носителя бактериофага (с помощью рангового критерия Дункана): смесь метилцеллюлозы, лактозы и сорбита > смесь лактозы и сорбита > метилцеллюло- за > отсутствие иммобилизирующего носителя. Таким образом, иммобилизирующим носителем является смесь метилцеллюлозы, сорбита и лактозы. Значимым фактором для желудочной резистентности бактериофагов являются факторы A и В (F расч > F табл). Множественное сравнение показало, что A4>A3>A2>A1 и В4>В2>В3>В1. Определены ряды предпочтительности желудочно-резистентного формообразователя (с помощью рангового критерия Дункана): смесь пектина и натрия альгината > пектин > натрия альгинат > отсутствие желудочно-резистентного формообразователя. Таким образом, желудочную резистентность компонентов секстафага в капсулированной фармацевтической композиции обеспечивают наличие метилцеллюлозы, сорбита, лактозы, натрия альгината и пектина.
Критерием отбора капсулируемой композиций являлась стабильность литической активности (не менее 75 %) модельных композиций капсул Секстафаг®. В результате были выбраны 7 экспериментальных составов № 10, 11, 12, 14, 15 и 16 (табл. 2).
Второй этап исследований заключался в выборе композиции лекарственного препарата Секстафаг®, капсулы. Для этой цели использовали обобщенную функцию желательности Харрингтона. Критериями отбора служили показатели качества: гранулята (уплотненная насыпная плотность, Индекс Hausner, Индеке Carr's, скорость высыпания, угол естественного откоса) и капсул (однородность массы, распадаемость, литическая активность, желудочная резистентность).
По внешнему виду гранулированные полуфабрикаты представляли собой сыпучие порошки бело-серого или серовато-бежевого цвета. Влагосодержание варьировало от 0.75 % до 1.7 %. Изучение насыпной плотности показало, что полуфабрикаты составов № 12 и 16 относят к группе порошков со средним показателем, а составы № 10, 11, 14 и 15 группе легких порошков. Сыпучесть является важным показателем в технологии получения капсул, так как влияет на точность дозирования и однородность массы капсул. Исследования сыпучести показали, что составы № 12 и 16 имеют хорошую сыпучесть. Остальные составы показали удовлетворительное значение сыпучести. При этом, согласно Индексам Hausner и Carr's лучшая сыпучесть и сжимаемость наблюдалась у композиций № 11, 12 и 15 (табл. 3).
Капсулы Секстафаг® модельных образцов № 10, 12, 15 и 16 соответствовали требованию ОФС 1.4.2.0009.15 «Однородность массы дозированных лекарственных форм» по показателю однородность массы дозированных лекарственных форм. По показателю распадаемость соответствовали требованиям ОФС 1.4.2.0013.15 «Распадаемость таблеток и капсул» составы экспериментальных капсул № 10, 12, 14 и 16.
Технологические параметры гранулята и капсул Секстафаг® рандомизировали с использованием функции желательности Харрингтона. Интегральная оценка полученных результатов показала, что оптимальными параметрами обладает композиция № 16 (рис. 2).
Таблица 3 Фармацевтико-технологические характеристики массы (гранулята) для инкапсулирования
|
Испытания |
Фармацевтические композиции |
||||||
|
10 |
11 |
12 |
14 |
15 |
16 |
||
|
Насыпная плотность, (Х ± АХ) кг/м3 |
|||||||
|
Свободная |
426.5 ± 8.0 |
370.5 ± 5.5 |
550.2 ± 8.4 |
345.5 ± 5.8 |
354.0 ± 6.1 |
518.5 ± 9.2 |
|
|
легкий |
легкий |
легкий |
легкий |
легкий |
легкий |
||
|
Уплотненная |
566.2 ± 10.8 |
443.2 ± 9.6 |
657.5 ± 12.1 |
461.7 ± 17.3 |
430.1 ± 9.0 |
667.4 ± 19.6 |
|
|
легкий |
легкий |
средний |
легкий |
легкий |
средний |
||
|
Сыпучесть, (Х ± АХ) |
|||||||
|
Скорость высыпания, г/с |
6.2 ± 0.8 |
5.6 ± 0.9 |
7.3 ± 0.7 |
4.3 ± 0.5 |
6.1 ± 0.4 |
6.7 ± 0.5 |
|
|
удовлетв |
удовлетв |
хорошая |
удовлетв |
удовлетв |
хорошая |
||
|
Угол естественного откоса° |
36.6 ± 1.8 |
38.2 ± 1.6 |
35.6 ± 3.9 |
41.8 ± 3.6 |
38.2 ± 1.6 |
38.2 ± 1.5 |
|
|
удовлетв |
удовлетв |
хорошая |
удовлетв |
удовлетв |
удовлетв |
||
|
Индекс Hausner |
1.33 удовлетв |
1.19 средний |
1.19 средний |
1.34 удовлетв |
1.21 средний |
1.29 удовлетв |
|
|
Индеке Carr's |
24.73 удовлетв |
16.25 средний |
16.30 средний |
25.11 удовлетв |
17.67 средний |
22.34 удовлетв |
Рис. 2. Обобщенная функция желательности капсулированных композиций Секстафаг®
Таким образом, по результатам проведения дисперсионного анализа и интегральной оценки капсулированных образцов был выбран оптимальный состав фармацевтической композиции № 16, содержащий комбинированный поливалентный секстафаг, метилцеллюлозу, сорбит, лактозу, пектин, натрия альгинат, кальция карбонат, магния стеарат. Оригинальность разработаного состава и технология Секстафаг® (Пиобактериофаг поливалентный) капсулы подтверждена патентом РФ № 2660355 «Антибактериальная фармацевтическая композиция для перорального применения, содержащая бактериофаги». секстафаг биофармацевтический метилцеллюлоза
Таблица 4 Технологические характеристики капсул Секстафаг®
|
Показатели качества |
Нормы |
Результат |
|
|
Описание капсул |
Твердые желатиновые капсулы № 2 белого цвета, непрозрачные, цилиндрической формы с полусферическими концами, состоящие из двух частей (корпуса и крышечки). Поверхность капсул гладкая, без повреждений и видимых воздушных и механических включений. |
соответствует |
|
|
Описание содержимого капсул |
Сухой порошок беловато-серого цвета со специфическим запахом. |
соответствует |
|
|
Потеря в массе при высушивании |
Не более 4.0% |
2.1% соответствует |
|
|
Однородность массы дозированных лекарственных форм |
От 0.198 до 0.242 г Допустимые отклонения: не более ± 10 %. Допускается не более 2 капсул с отклонением более 10 %, при этом ни одна капсула не должна иметь отклонение более 20 %. |
0.225 +4.05 % -3.71 % соответствует |
|
|
Распадаемость |
Не более 30 мин. |
[17 ч 24] мин соответствует |
|
|
Специфическая активность |
Препарат должен специфически лизировать бактерии Staphylococcus, Streptococcus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae в разведении не менее 10-3 |
Staphylococcus-10'4, Streptococcus-10'4, Proteus-10-4, Ps. aeruginosa-10-4, E. ^-10-4, Kl. pneumoniae-10-4 соответствует |
Испытания капсул проводили по показателям: описание капсул, описание содержимого капсул, потеря в массе при высушивании, однородность массы дозированных лекарственных форм, распадаемость, специфическая активность (табл. 4). Все показатели качества соответствуют требованиям ОФС ГФ XIV издания. Препарат Секстафаг® (Пиобактериофаг поливалентный) капсулы, стабилен при хранении в течение 18 месяцев при температуре от 2 до 8°С.
Заключение
На основании комплекса технологических, биофармацевтических и микробиологических исследований экспериментально обоснован желудочно-резистентный состав с комбинированным бактериофагом, позволяющий получить референтный, высокоэффективный, антибактериальный лекарственный препарат - капсулы Секстафаг®, соответствующие требованиям ГФ XIV издания.
Список литературы
1. Акимкин В.Г., Алимов А.В., Поляков В.С. // Бактериология. 2016. Т 1. № 1 С. 80-87.
2. Асланов Б.И. // Медицинский совет. 2015. № 13. С. 106-110.
3. Бехтерева М.К., Иванова В.В. // Consilium medicum. 2014. № 2. С. 24-29.
4. Sulakvelidze A. // Drug Discovery Today. 2005. Vol. 10 No. 6. Р 807-809.
5. Sulakvelidze A., Alavidze Z., Glenn Morris J. // Antimicrobal Agents and Chemotherapy. Vol. 45. No. 3. Р. 649-659.
6. Weber-Dabrowska В., Zimecki M., Kruzel M., Kochanowska I., Lusiak-Szelachowska M. // Advances in Medical Sciences. 2006. No. 51. Р. 242-244.
7. Красильников И.В., Лыско К.А., Отрашев- ская Е.В., Лобастова А.К. // Сибирский медицинский журнал, 2011. Т. 26. № 2. С. 33-37.
8. Казьянин А.В., Орлова Е.В., Ефимова М.Г., Функнер Е.В., Шитова О.И. // Фармация. 2010. № 3. С. 36-37.
9. Ковязина Н.А., Функнер Е.В., Николаева А.М., Орлова Е.В., Ефимова М.Г., Шитова О.И. // Вестник ВГУ, Серия: Химия. Биология. Фармация. 2015. № 1. С. 132-136.
10. Гуреева С.Н. // Научные ведомости. Серия Медицина. Фармация, 2014. Т 24 № 195. Выпуск 28, С.173-176.
11. Государственная фармакопея Российской Федерации. Министерство здравоохранения Российской Федерации. XIV изд. Т.2. Москва, 2018.
12. Фармацевтическая разработка: концепция и практические рекомендации. Научно-практическое руководство для фармацевтической отрасли / Под ред. Быковского С.Н. и др. М. Изд-во Перо, 2015. 472 с.: ил.
13. Ковязина Н.А., Решетников В.И., Функнер Е.В., Ефимова М.Г. // Фармация. 2008. № 7. С 36-39.
14. Агаянц И.М. Азы статистики в мире химии: Обработка экспериментальных данных. Санкт-Петербург: НОТ, 2015. 618 с.
15. Любищев А.А. Дисперсионный анализ в биологии. - М.: Издательство Московского университета, 1986. 200 с.
16. Любушин Н.П., Брикач Г.Е. // Экономический анализ: теория и практика, 2014. Т. 18. № 369. С. 2-10.
17. Сосюкин А.Е., Верведа А.Б. // Medline.ru. 2015. № 16. С. 872-884.
18. Воскобойникова И.В., Авакян С.Б., Сокольская Т.А., Тюляев И.И., Багирова В.Л., Кол- хир В.К., Сакович Г.С. Химико-фармацевтический журнал. 2005. Т 39 № 1. С. 22-28.
19. Тишков Т.М., Погребняк А.В., Погребняк Л.В. // Современные проблемы науки и образования. 2015. № 2-1. URL: http://science-education.ru/ru/article/ view?id=22742 (дата обращения: 10 февраля 2019).
20. Крисс А.Е., Диденко С.И. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1944. Т. XVIII № 4-5. С. 25-28.
21. Чернов Н.В. // Бактерийные и вирусные препараты: труды Уфимского НИИВС им. И.И. Мечникова. Уфа: Башкирское книжное издательство. 1968. № 9. С. 218-221.
References
1. Akimkin V.G., Alimov A.V., Poljakov V.S., Bakteriologija, 2016, Vol. 1, No. 1, pp. 80-87.
2. Aslanov B.I., Medicinskij sovet, 2015, No. 13, pp.106-110.
3. Behtereva M.K., Ivanova V.V., Consilium medicum, 2014, No. 2, pp. 24-29.
4. Sulakvelidze A., Drug Discovery Today, 2005, Vol. 10, No. 6, pp. 807-809.
5. Sulakvelidze A., Alavidze Z., Glenn Morris J., Antimicrobal Agents and Chemotherapy, Vol. 45, No. 3, pp. 649-659.
6. Weber-Dabrowska V., Zimecki M., Kruzel M., Kochanowska I., Lusiak-Szelachowska M., Advances in Medical Sciences, 2006, No. 51, pp. 242-244.
7. Krasil'nikov I.V., Lysko K.A., Otrashevskaja Е.V., Lobastova A.K., Sibirskij medicinskij zhurnal, 2011. Vol. 26, No. 2, pp. 33-37.
8. Kaz'janin A.V., Orlova E.V., Efimova M.G., Funkner E.V., Shitova O.I., Farmacija, 2010, No. 3, pp. 36-37.
9. Kovjazina N.A., Funkner E.V., Nikolaeva A.M., Orlova E.V., Efimova M.G., Shitova O.I., Vest- nik VGU, Serija: Himija. Biologija. Farmacija, 2015, No. 1, pp. 132-136.
10. Gureeva S.N., Nauchnye vedomosti. Serija Medicina. Farmacija, 2014, Vol. 24, No. 195, Vypusk 28,pp.173-176.
11. Gosudarstvennaja farmakopeja Rossijskoj Federacii. Ministerstvo zdravoohranenija Rossijskoj Federacii, XIV izd, Vol. 2, Moskva, 2018, 3262 p.
12. Farmacevticheskaja razrabotka: koncepcija i prakticheskie rekomendacii. Nauchno-prakticheskoe rukovodstvo dlja farmacevticheskoj otrasli / Pod red. Bykovskogo S.N. i dr. Moscow, Izd-vo Pero, 2015, 472 p.
13. Kovjazina N.A., Reshetnikov V.I., Funkner E.V., Efimova M.G., Farmacija, 2008, No. 7, pp. 36-39.
14. Agajanc I.M. Azy statistiki v mire himii: Obrabotka jeksperimental'nyh dannyh, Sankt- Peterburg: NOT, 2015, 618 p.
15. Ljubishhev A.A. Dispersionnyj analiz v biologii. - M.: Izdatel'stvo Moskovskogo universiteta, 1986, 200 p.
16. Ljubushin N.P., Brikach G.E., Jekonomicheskij analiz: teorija i praktika, 2014, Vol. 18, No. 369, pp. 2-10.
17. Sosjukin A.E., Verveda A.B., Medline.ru, 2015. No. 16. pp. 872-884.
18. Voskobojnikova I.V., Avakjan S.B., Sokol'skaja T.A., Tjuljaev I.I., Bagirova V.L., Kolhir V.K., Sakovich G.S., Himiko-farmacevticheskij zhurnal, 2005, Vol. 39, No. 1. pp. 22-28.
19. Tishkov T.M., Pogrebnjak A.V., Pogrebnjak L.V., Sovremennye problemy nauki i obrazovanija, 2015, No. 2-1. URL: http://science-education.ru/ru/ article/view?id=22742 (data obrashhenija: 10 fevralja 2019).
20. Kriss A.E., Didenko S.I., Bjulleten' jeksperimental'noj biologii i mediciny, 1944, Vol. XVIII No. 4-5, pp. 25-28.
21. Chernov N.V., Bakterijnye i virusnye preparaty: trudy Ufimskogo NIIVS im. I.I. Mechnikova. Ufa: Bashkirskoe knizhnoe izdatel'stvo, 1968, No. 9, pp. 218-221.