Материал: Ответы к итоговой МБ №5 Кишечные инфекции (КубГМУ Live)

Эубиотики – это живые или высушенные бактерии и микроорганизмы, которые после попадания в кишечник, начинают «оживать», что способствует созданию и поддержанию нормальной микрофлоры.

Разделяются эти бактерии на 2 типа:

Лактобактерии

Бифидобактерии

БИФИДОБАКТЕРИИ

Основная роль этих микроорганизмов – переработка витаминов группы В, а также выработок органических кислот, при отсутствии которых организм не сможет полностью усвоить питательные элементы.

ЛАКТОБАКТЕРИИ

Данный тип бактерий оказывает влияние на иммунитет – поддерживает его, а такде отвечает за выработок молочной кислоты.

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ ЭУБИОТИКОВ

Данные эубиотики действуют следующим образом: попадя в кишечник, они начинают активно размножаться и заполняют собой все свободное место, вытесняя тем самым все вредные микроорганизмы. Более того, они создают вокруг себя кислую среду, в которой все вредные микроорганизмы просто не могут существовать, поэтому и погибают.

52. Методы культивирования анаэробов.

Выведение облигатно анаэробных микроорганизмов существенно отличается от изучения других типов бактерий, так как если в атмосфере содержание О2 будет превышать 0,1%, то они погибнут.

Поэтому при изучении этих микроорганизмов необходимо соблюдать определённые правила, иначе их нарушение может привезти к искажению результата или вовсе гибели анаэробов.

Первым, кто смог удачно произвести выделение анаэробов, стал Л.Пастер на исходе XIX века.

С того времени учёные применяли огромное количество способов и методов для выведения данных микроорганизмов, от многих пришлось отказаться в виду их

26

сложности или не практичности, но на замену им пришли более совершенные современные методы.

Анаэробные камеры – прозрачная, герметичная станция, может быть как перчаточной, так и безперчаточной. Камера оснащена специальными шлюзами, для лёгкого введения необходимых образцов и материалов, термостатом, контролирующим влажность, приборы для регуляции концентрации кислорода и его вывода из рабочей зоны. Кроме этого его удобство также обусловлено внушающей вместительностью до двухсот чашек Петри.

Микроанаэростат – бочкообразная, герметично закрываемая металлическая или пластмассовая ёмкость объёмом от 2 до 7 литров. Создание необходимых условий в агрегате происходит двумя способами:

1)Вакуумозамещение – создаётся вакуум и запускается анаэробный газ.

2)Химическое связывание кислорода – с использованием газогенерирующей системы, генерирующие H2 и СО2. H2 – поглощает лишний кислород при появлении воды в системе, СО2 – является стимулятором роста для изучаемых микроорганизмов.

Контроль за бескислородной средой в микроанаэростатах контролируется специальной полоской-индикатором, которая при удалении кислорода из рабочей среды – обесцвечивается.

Основным недостатком данного агрегата является то, что исследования проводятся в кислородосодержащей среде и только потом помещаются в микроанаэростат, из-за чего качество результатов уступает анаэробной камере. Вместимость его до двенадцати чашек Петри и в основном используется в небольших лабораториях.

Анаэробный пакет – это прозрачный пластиковый пакет с герметичным закрыванием и объёмом до двух чашек Петри. Создание анаэробных условий создаётся путём взаимодействия реакционной безводной системы с кислородом. Пакет, как и в случае с микроанаэростатом, оснащён полоской-индикатором. Анаэробные пакеты являются наиболее практичным способом, удобным в экстренных и полевых условиях, и при этом показывают удовлетворительные по качеству результаты, хоть и ниже, чем у вышеназванных агрегатов.

Приведённые методы являются основными в микробиологических исследованиях на сегодняшний день, но в истории диагностики анаэробов использовалось немало других, не менее интересных:

27

Метод Вейнберга. Изучаемый материал разводили в специальном изотоническом растворе. Далее помещали посевы в пробирки с охлаждённым до 450С сахарным агаром ( или же использовалась среда Вильсон –Блера).

Метод Вильяля –Вейона. Материал разводили в расплавленной среде Вильсона – Блера, заранее охлаждённую до 450С , заливали в капилляры пастеровских пипеток и запаивали их концы. Далее в течение трёх суток хранили в цилиндре из стекла с выложенной на дне ватой. После чего колонии вырастали и изолировались путём надломления капилляра выше нахождения колонии и извлекались с помощью петли.

Метод Аристовского или химический метод. Исследуемые микроорганизмы в чашках Петри помещали в специальные стеклянные ёмкости, у которых были притёрты края крышки (эксикатор). На дно ёмкостей помещали химический поглотитель кислорода (например, пирогаллол).

Метод Форнера или биологический метод. В чашке Петри создаётся специальная среда, состоящая из 5% агара и 1-2% глюкозы и разделяется желобом на две половинки, где с одной стороны исследуемый материал, а с другой – культура, активно поглощающих кислород, аэробов и проводили герметизацию. Аэробы активно поглощали кислород в герметичной среде, что давало возможность роста для анаэробов.

53. Среды Кита-Тароцци, Вильсон-Блэра, Цейсслера, Виллиса-Хоббс. Состав.

Среды Китта-Тароцци - жидкая питательная среда для культивирования анаэробных микроорганизмов, состоящая из мясопептонного бульона, обогащенного экстрактивными продуктами печени животных и содержащего кусочки вываренной печени в качестве поглотителя свободного кислорода.

Вильсон-Блэра -плотная селективная питательная среда для анаэробных бактерий, содержащая сернистокислый натрий и хлорное железо; анаэробные бактерии образуют колонии черного цвета в результате образования сернистого железа. ( как газовая гангрена)

Цейсслера -плотная питательная среда для культивирования и дифференциации анаэробов, содержащая мясопептонный агар, глюкозу и кровь. Кровяной агар Цейсслера - 15 % дефибринированной крови + 2 % глюкозы);. В основу определения вида анаэробов положена форма роста их на среде Цейсслера в анаэробных условиях.

Виллиса-Хоббс - Хоббса содержит кроме питательного агара, лактозу, индикатор, яичный желток и обезжиренное молоко. Дифференциация видов клостридий

28

осуществляется по изменению цвета индикатора в красный (ферментация лактозы) и наличию вокруг колоний зоны (ореола) опалесценции (лецитиназная активность). Колонии C. perfringens окрашены в цвет индикатора и имеют ореол опалесценции.

54. К каким таксономическим группам относятся патогенные анаэробы?

Строгие анаэробы можно разбить на 2 группы: спорообразующие и не образующие спор. К первым относится клостридии, а ко вторым – рода Bacterioides, Fusobacterium, Porphyromonas, Prevotella, Selemonas. (грамотрицательные) и грамположительные Bifidobacterium и Lactobacillus и др.

55. Что входит в понятие «неклостридиальная анаэробная микрофлора»?

Анаэробная неклостридиальная микрофлора – это анаэробные бактерии,

необразубщие спор.

В развитии гнилостной инфекции могут принимать участие условно-патогенные анаэробы: кишечная палочка, протей.

Вызывают Неклостридиальную анаэробную инфекцию (Гнилостную) патогенные формы неклостридиальной анаэробной микрофлоры , чаще всего анаэробными стрептококками. Наибольшее клиническое значение в развитии гнилостной инфекции имеют следующие группы анаэробных микроорганизмов.

1.Грамотрицательные палочки: Bacteroides (B.fragilis, B.melaninogenicus, ovatus, distasonis, vulgatus и др.), Fusobacterium.

2.Грамположительные палочки: Propionibacterium, Eubacterium, Bifidobacterium, Actinomyces.

3.Грамположительные кокки: Peptococcus, Peptostreptococсus.

4.Грамотрицательные кокки: Veilonella

56. Особенности эпидемиологии и патогенеза неклостридиальной инфекции.

Патогенез: анаэробы делают своё дело, но особое место занимает симбиоз анаэробов с аэробами. Микробные ассоциации при неклостридиальной (гнилостной) инфекции — это не простая совокупность, поскольку многие эти процессы возникают и развиваются только в том случае, если присутствует каждый из участников ассоциации.

29

Для анаэробных инфекций характерны местные симптомы. Наиболее часто встречающийся из них - неприятный гнилостный запах, который ошибочно приписывают кишечной палочке.

Вторым признаком анаэробной инфекции является гнилостное поражение тканей. Очаги поражения содержат мертвые ткани серого или серо-зеленого цвета, с черными или коричневыми участками некроза. Эти очаги редко имеют форму полостей, они выполняют межтканевые щели. Цвет экссудата серо-зеленый, нередко коричневый, с капельками жира.

Микроскопия мазков раневого отделяемого, окрашенных по Грамму, выявляет множество микроорганизмов на светлом фоне и отсутствие лейкоцитов. Характерным признаком анаэробной инфекции считают газообразование – результат метаболизма анаэробов, при котором выделяются водород, азот и метан. Газообразование наблюдают в 3-х вариантах. Наиболее часто встречается эмфизема мягких тканей, которая клинически проявляется крепитацией. Вторая форма скопления газа - рентгенологически обнаруживаемое образование уровня «газ – жидкость» в гнойнике. Кроме того, наблюдают рентгенологические признаки целлюлита (ячеистая структура клетчатки) и миозита (перистый рисунок мышц).

Эпидемиология: Развитию неклостридиальной анаэробной инфекции, вызванной анаэробными неспорообразующими микроорганизмами, способствует ряд факторов, снижающих обогащение тканей кислородом. К ним относятся: тканевая деструкция, нарушение кровоснабжения, ожоги.

Возникновению неклостридиальнойанаэробной инфекции могут способствовать: различные заболевания (гингивиты, аспирационные пневмонии, сахарный диабет, атеросклероз, лейкопения, рак различной локализации (кишечника, легких, матки), укусы животных), а также хирургические вмешательства и лечебные мероприятия (кортикостероидная, цитостатическая и иммунодепрессивная терапия). Неспорогенные анаэробы принимают участие в развитии широкого круга гнойно– воспалительных заболеваний различной локализации и различных форм течения – от поверхностных нагноений до тяжелых инфекций со смертельным исходом.

Частота обнаружения неспорогенных анаэробов при различных инфекционных заболеваниях достаточно высока.

30