Материал: Обзор методов определения содержания витаминов А и Е в продуктах питания

В данной работе степень диеновой конъюгации ненасыщенных высших жирных кислот определяли по методике И.Д. Стальной (1977).

Принцип. Процесс пероксидного окисления полиненасыщенных жирных кислот сопровождается перегруппировкой двойных связей и возникновением системы сопряженных диеновых структур, имеющих максимум поглощения при 232-234 нм с плечом в области 260-280 нм, соответствующим сопряженным кетодиенам.

Реактивы:

)        гептанн

)        изопропанол

)        этиловый спирт

Ход исследования:

Для определения диеновых конъюгатов 300 мг мяса морской рыбы гомогенизировали с 3 мл смеси гептан: изопропан в соотношении 1:1 и центрифугировали 10 мин при 6000 об/мин. К супернатанту добавили 0,25 мл воды. К 0,5 мл гептановой фазы добавили 2,5 мл этилового спирта. Оптическую плотность измеряют при л=233 нм против контроля (гептан: изопропан 1:1) [29].

В ходе ПОЛ на стадии образования свободных радикалов в молекулах НЖК возникает система сопряженных двойных связей, что сопровождается появлением нового максимума в спектре поглощения при 233 нм.

Расчет ДК производили по формуле:

ДК=Д233/(Е*с)

где Д233 - оптическая плотность;

Е - коэффициент молярной экстинкции, 2,2*10⁵см^-1*М^-1;

С - концентрация липидов, мг / мл.

Диеновые конъюгаты выражали в мкмоль ДК/мг липидов.

3. Результаты и обсуждения

По выбранным методам определения витаминов А и Е и диеновых конъюгатов были проведены эксперименты, в результате которых представлены в рисунках.

Примечание* - Р < 0,05 по сравнению с мясом осьминога

Рисунок 3.1 - Содержание витамина А в морепродуктах

Руководствуясь данными рисунка 3.1, исследуемые образцы морепродуктов можно расположить в следующей последовательность, по увеличению содержания витамина А: осьминог, кальмар, мидия, креветка. Содержание витамина А в мясе кальмара в 2,3 раза больше чем в мясе осьминога, в мясе мидии витамина А содержится больше в 4,6 раз, а в мясе креветки в 6,9 раз больше.

Рисунок 3.2 - Содержание витамина А в морской рыбе

По результатам опытов на количественное содержание витамина А в мясе морской рыбы видно что в исследуемых образцах содержится практически одинаковое количество витамина А (рис. 3.2).

Примечание* - Р < 0,05 по сравнению с мясом осьминога

Рисунок 3.3 - Содержание витаминов Е в морепродуктах

Из исследуемых образцов морепродуктов меньше всего витамина Е содержится в мясе осьминога. В мясе мидии количественное содержание витамина отличается незначительно, в мясе креветки витамина больше в 1,5 раза, а мясо кальмара содержит витамина Е больше чем мясо осьминога в 2 раза (рис. 3.3).

Примечание* - Р < 0,05 по сравнению с мясом минтая

Рисунок 3.4 - Содержание витамина Е в морской рыбе

Наименьшее количество витамина Е из исследуемых образцов морской рыбы содержится в мясе минтая. Содержание витамина Е в мясе камбалы и путассу отличается незначительно, так витамина Е в мясе камбалы содержится в 2,25 раза больше чем в мясе минтая, а в мясе путассу витамина Е в 2,5 раза больше (рис. 3.4).

Примечание* - Р < 0,05 по сравнению с мясом осьминога

Рисунок 3.5 - Содержание диеновых конъюгатов в морепродуктах

На рисунке 3.5 представлены результаты опытов по количественному определению диеновых конъюгатов в морепродуктах. Меньше всего ДК содержится в мясе осьминога, а самое большое содержание в мясе мидии - в 9,6 раза больше чем в мясе осьминога. Мясо креветки содержит диеновых конъюгатов в 2,7 раза больше чем мясо осьминога, а в кальмаре ДК больше в 1,2 раза.

Примечание* - Р < 0,05 по сравнению с мясом путассу

Рисунок 3.5 - Содержание диеновых конъюгатов морской рыбе

По данным рисунка 3.5 видно что ДК в мясе минтая и путассу содержится примерно одинаковое количество, а в мясе камбалы ДК больше чем в путассу в 8,8 раза.

Наличие диеновых конъюгатов в продуктах свидетельствует о присутствии процессов перекисного окисления, вызываемых снижением антиоксидантной активности липидов и естественных антиоксидантов, таких как витамины А и Е.

Заключение

Показателями неферментативной антиоксидантной системы являются витамины А и Е, и диеновые конъюгаты.

Диеновые конъюгаты являются первичными продуктами перекисного окисления липидов, относятся к токсичным метаболитам которые оказывают повреждающее действие на липопротеиды, белки, ферменты и нуклеиновые кислоты. Диеновая конъюгация является показателем степени выраженности процессов перекисного окисления липидов. Поэтому, чем выше значение диеновых конъюгатов, тем интенсивнее процесс перекисного окисления липидов. Среди исследуемых образцов морепродуктов наиболее интенсивный процесс перекисного окисления липидов наблюдается в мясе мидии, а среди морской рыбы в мясе камбалы.

Полученные результаты позволяют сделать следующие выводы:

1. Содержание жирорастворимых витаминов в морской рыбе минтае и путассу статистически значимо не отличается и выше, чем в камбале. 2. Наименьшее содержание витаминов А и Е выявлено в мясе осьминога, наибольшее содержание витамина А находится в креветках, витамина Е - в кальмарах.

. Снижение уровня витамина Е в камбале сопровождается увеличением в ней содержания диеновых конъюгатов.

Таким образом, большую пищевую ценность по витаминному составу из исследуемых продуктов имеют креветки, кальмары, минтай и путассу.

Список использованных источников

1.     Ковалевская Н.И. Биологическая химия / Н. И Ковалевская. - М.: Академия, 2008. - 83 с.

2.      Дроздова Т.М. Физиология питания / Т.М. Дроздова. - М.: Дели плюс, 2012. - 97 с.

.        Горбачев В.В. Витамины микро- и макроэлементы. Справочник. / В.В. Горбачев, В.Н. Горбачева. - М.: Книжный дом, 2002. - 178 с.

.        Интернет-портал Российской Федерации - Режим доступа: http://www.fismag.ru/pub/konish-03-13.php. - Дата доступа: 28.0.2014.

.        Интернет-портал Российской Федерации - Режим доступа: http://www.inmoment.ru/beauty/health-body/seafood.html. - Дата доступа: 28.04.2014.

.        Интернет-портал Российской Федерации - Режим доступа: http://doktorshen.ru/pitanie10-moreprodykt.php. - Дата доступа: 30.04.2014.

.        Орел Н.М. Биохимия мембран / Н.М. Орел. - М.: БГУ, 2010. - 10 с.

.        Интернет-портал Российской Федерации - Режим доступа: http://edu.sernam.ru/book_b_chem1.php? id=106. - Дата доступа: 30.04.2014.

9.     Березовский В.М. Химия витаминов / В.М. Березовский. - М.: 1973. - 256 с.

10.    Березов Т.Т. Биологическая химия / Т.Т. Березов, Б.Ф. Коровкин. - М.: Медицина, 1990. - 140 с.

.        Строев, Е.А. Биологическая химия / Е.А Строев. - М.: Высшая школа, 1986. - 360 с.

12.   Интернет-портал Российской Федерации - Режим доступа: http://sebulfin.com/meditsinskie-sovetyi/rasskazyi-o-vitaminah-biologicheskaya-rol-vitamina-a. - Дата доступа: 30.04.2014.

.       Шатерников, В.А. Витамины / В.А. Шатерников. - М.: 1974. - 125 с.

14.    Костюк В.А., Потапович А.И. Биорадикалы и биоантиоксиданты. - М.: БГУ, 2004. - 179 с.

.        Машковский, М.Д. Лекарственные средства/ М.Д. Машковский. - М.: Новая Волна, 2005. - 480 с.

16.   Филиппович Ю.Б. Практикум по общей биохимии / Ю.Б. Филиппович. М.: Просвещение, 1975.

17.    Северина С.Е. Практикум по биохимии / под ред. С.Е. Северина, Г.А. Соловьевой. М.: изд-во МГУ, 1989.

18.   Викторов А.П., Препараты витамина А в фокусе безопасности / А.П. Викторов, А.Г. Войтенко, М.: - 2008. - №9. - С. 21-23.

.       Морозкина, Т.С. Витамины. Краткое руководство для врачей и студентов медицинских, фармацевтических и биологических специальностей / Т.С. Морозкина, А.Г. Мойсеенок - М., Асар, 2002. - 112 с.

20.    Блинкин, С.А. Иммунитет и здоровье / С.А. Блинкин. - М.: Знание. - 1977. - 420 с.

21.   Никитина Л.П. Клиническая витаминология / Л.П. Никитина, Н.В. Соловьева. - Чита, 2002. - 66 с.

22.   Кения М.В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе / М.В. Кения, А.И. Лукаш, Е.П. Гуськов. М.:1993. - 456-470 с.

23.    Меньщикова Е.Б. Прооксиданты и антиоксиданты/ Е.Б. Меньщикова, В.З. Ланкин Н.К. Зенков, И.А. Бондарь и др. / М.: «Слово». - 2006. - С. 556.

24.   Ермолаев М.В. Биологическая химия/ М.В. Ермолаев. - М.: Медицина, 1983. - 288 с.

25.   Березов Т.Т. Биологическая химия/ Т.Т. Берёзов, Б.Ф. Коровкин. - М.: Медицина, 1998. - С. 212.

26.    Курашвили Л.В. Современное представление о перекисном окислении липидов и антиоксидантной системе при патологических состояниях / Л.В. Курашвили, Г.А. Косой, И.Р. Захарова, Пенза: Инс-т усоверш. врачей МЗ РФ, 2003. 32 с.

.        Каган, В.Е. Модификация ферментной системы транспорта кальция в саркоплазматическом ретикулуме при перекисном окислении липидов / В.Е. Каган, Ю.В. Архипенко, Ф.З. Меерсон и др / М.:1983, 7: 1141-1148.

.        Чеснокова Н.П. Типовые патологические процессы // Саратов: Саратовский медицинский университет, 2004. 132-136 с.

.        Тарасов Н.И., Состояние перекисного оксиления липидов, антиоксидантной защиты крови у больных инфарктом миокарда, отягощенным недостаточностью кровообращения / Н.И. Тарасов, А.Т. Тепляков, Е.В. Малахович и др // Тер. архив. 2002. 12-15 с.

.        Стальная И.Д. Методы определения диеновой конъюгации ненасыщенных жирных кислот. И.Д. Стальная // Современные методы биохомии/ В.Н. Орехович. - М.:1977, 63-64 с.