Материал: Микробиологические лаборатории

Микробиологические лаборатории

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Оборудование в микробиологической лаборатории

Оборудование рабочего стола

Микробиологические лаборатории

Техника взятия и доставки материала в микробиологическую лабораторию.

Техника безопасности при работе в лабораториях

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ИСПОЛЬЗОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

ВВЕДЕНИЕ

При выполнении лабораторных работ по биологии и микробиологии работают с различным биологическим материалом и культурами микроорганизмов. Изучают строение живых организмов и их основную структурную единицу - клетку. Клетки имеют небольшие размеры, поэтому невооруженным глазом их рассмотреть невозможно. Для их изучения готовят определенным образом препараты, которые рассматривают под микроскопом.

Микробиология изучает мельчайшие, невидимые невооруженным глазом существа - микробы. Они находятся повсюду: в почве, воздухе, воде, на сырье, различных материалах, оборудовании, продуктах питания и т. д. Одни из них безопасны для человека, другие могут вызывать различные заболевания. Увидеть микроорганизмы, так же как и отдельные клетки, можно только под микроскопом, приготовив соответствующим образом препараты. Поэтому работы на уровне клеток и микроорганизмов проводят в особых лабораториях, которые должны отвечать определенным требованиям.

В лаборатории должны быть созданы условия, обеспечивающие стерильность работы, при которых будет исключена возможность попадания как посторонних микроорганизмов извне, так и микроорганизмов из лаборатории в окружающую среду. Поэтому в микробиологической лаборатории необходимо строго соблюдать определенные правила работы и поведения, которые предотвращают возникновение заражения. В лабораториях применяются различные аппараты, приборы и оборудование. Неосторожное обращение с ними может явиться причиной травм. Общее и местное токсическое действие химических соединений на организм человека, пожароопасность и взрывоопасность, опасность заражения людей патогенными микроорганизмами можно предупредить при соблюдении специальных правил. Всем сотрудникам лабораторий необходимо повседневно уделять серьезное внимание мероприятиям по технике безопасности, санитарно-противоэпидемическому режиму и личной гигиене, обеспечивающим безопасность труда.

Оборудование в микробиологической лаборатории

ü  Микроскоп - для изучения формы и структуры клеток микроорганизмов.

ü  Термостат - прибор с двойными стенками, между которыми находится воздух или вода. С помощью терморегулятора в термостате поддерживается постоянная температура. Контролируют температуру термометром, установленным в верхней стенке термостата. Мезофилы выращиваются в термостате при температурах от 25° С (для большинства почвенных микроорганизмов) до 37°С (для патогенных микроорганизмов, микроорганизмов кожных покровов, кишечника человека и животных). Термофилы выращиваются на жидких средах при температурах от 45° С до 60° С. Облигатные психрофилы выращиваются при температурах от 5° С до 10° С в специальных холодильных камерах. Факультативные психрофилы развиваются при температурах, благоприятных для мезофилов, и выращиваются в термостатах.

ü  Автоклав - прибор для стерилизации питательных сред и посуды, используемой в лаборатории. Это самый эффективный в бактериологической практике способ стерилизации. В автоклаве стерилизуемые материалы нагревают чистым насыщенным водяным паром при давлении выше атмосферного на 0,2 - 2 атм. Обычно стерилизация в автоклаве проводится при 1 атм. (сверх нормального атмосферного), что соответствует 120,6°С. И только стерилизацию почвы или сильно заспоренного материала проводят при повышенном до 2 атм. давлении, что соответствует 134°С. Питательные среды, содержащие углеводы, стерилизуют в автоклаве при пониженном давлении (0,5 атм.) при температуре от 110° до 112°С. Так как стерилизация в автоклаве производится при повышенном давлении, то работать с ним могут лишь специально обученные работники, имеющие допуск, т.е. лаборанты лаборатории. Студенты могут только ознакомиться с работой автоклава.

ü  Печь Пастера или сушильный шкаф для стерилизации стеклянной посуды, ваты, марли и т.д. В нем стерилизуют сухим жаром при 170°С 1,5 ч. Показателем достаточной стерилизации является легкое пожелтение бумаги, в которую завернуты стерилизуемые предметы.

ü  Бактерицидная лампа (БУВ - 15, БУВ- 30) для стерилизации воздуха в помещении лаборатории после работы с микроорганизмами.

ü  Холодильник для хранения музейных культур микроорганизмов и ряда питательных сред.

ü  Сейф для хранения патогенных культур микроорганизмов, ядовитых соединений.

ü  Боксовая комната или бокс для пересева музейных культур. Бокс - это небольшое замкнутое пространство, где нет движения воздуха и стерилизация воздуха осуществляется бактерицидной лампой. Бокс хорошо обеспечивает условия стерильности, необходимые для посева чистых культур, так как исследователь через специальное отверстие бокса (рукав) просовывает в него только руки и осуществляет все посевы, проводя манипуляции над зажженной в боксе спиртовкой.

ü  Анаэростаты - приборы для выращивания микроорганизмов без доступа кислорода воздуха. Воздух отсасывается из них с помощью насосов. Контролируют давление по манометру.

ü  Аппарат Коха для дробной стерилизации, водяная баня, pH-метр и бактериальные фильтры.

ü  Шкафы для посуды и сред.

ü  Лабораторные столы, покрытые пластиком для удобства дезинфекции.

Оборудование рабочего стола

ü  Микроскоп - для изучения морфологии микроорганизмов.

ü  Спиртовки для фиксации препаратов, фламбирования (обжигания) бактериологической петли, пинцета и др., обжигания краев пробирок и колб при работе с последними и поверхности ватно-марлевых пробок.

ü  Предметные стекла с луночками и без них, покровные стекла.

ü  Набор красителей: генцианвиолет, фуксин, метиленовая синь, раствор Люголя, спирт 96° и др., используемых для окрашивания клеток микроорганизмов, а также песочные часы.

ü  Фарфоровая ванночка со стеклянным мостиком - установка для окраски препаратов.

ü  Колба с дистиллированной водой и пипеткой для промывания окрашенных препаратов.

ü  Лист фильтровальной бумаги для просушивания препаратов после окраски.

ü  Кедровое масло для работы с иммерсионным объективом 90´.

ü  Восковой карандаш для надписей по стеклу.

ü  Салфетка матерчатая для протирания оптических деталей микроскопа (окуляр, конденсор, диафрагма, зеркало, объективы суховоздушные).

ü  Салфетка марлевая для удаления масла с иммерсионного объектива после работы.

ü  Пробирки с культурами и пустые штативы для пробирок.

ü  Чашки Петри - плоские чашки из тугоплавкого стекла, в которые наливаются питательные среды для выращивания микроорганизмов.

Микробиологические лаборатории

Организуются при больницах и санитарно-эпидемиологических станциях (СЭС). Существуют также специальные лаборатории, в которых работают с возбудителями особо опасных инфекций, вирусологические лаборатории и др. Микробиологические лаборатории занимаются бактериологической диагностикой инфекционных заболеваний, исследуя испражнения, мочу, кровь, мокроту больных с целью обнаружения патогенных микроорганизмов - возбудителей заболевания. Помимо этого, в микробиологических лабораториях проводят санитарно-бактериологические исследования воды, воздуха, смывов с окружающих предметов, рук, пищевых продуктов для обнаружения санитарно-показательных микроорганизмов, указывающих на загрязнение патогенными микробами. При необходимости в объектах внешней среды определяют наличие патогенных микробов.

В связи с тем, что в микробиологических лабораториях работают с заразным материалом, помещение их должно быть изолировано от других больничных помещений, пищеблоков, жилых комнат. В состав лаборатории входят:

) лабораторные комнаты для проведения микробиологических исследований;

) моечная;

) препараторская для подготовки лабораторной посуды, приготовления питательных сред и других вспомогательных работ;

) автоклавная;

) комната, где производят прием материала и выдачу результатов исследования. Лабораторных животных, необходимых для постановки биологических проб, содержат в специальном изолированном помещении - виварии. В лабораториях, где объем работ невелик, можно объединить моечную и препараторскую, исключить комнату для приема анализов и т. д.

Лабораторные комнаты должны быть просторными и светлыми, желательно с ориентацией окон на север или северо-запад, так как для работы необходим рассеянный свет. Стены окрашивают светлой масляной краской, пол покрывают линолеумом, лабораторные столы - пластиком или стеклом, что позволяет их легко дезинфицировать. В лабораторной комнате оборудуют застекленный бокс с предбоксником для проведения работ в стерильных условиях. В боксе помещают бактерицидную лампу, стол, табуретку. В лабораторных комнатах находится специальное оборудование: термостат (рисунок 23), холодильник, шкафы, центрифуга и др. Большое значение имеет правильная организация рабочего места. Рабочий стол устанавливают у окна таким образом, чтобы свет падал сбоку или прямо. На столе должны находиться только необходимые для работы предметы: спиртовка или газовая горелка, штативы, бактериологические петли, банка с дезинфицирующим раствором.

 <#"869026.files/image002.jpg"> <#"869026.files/image003.gif"> <http://microbiology.ucoz.org/_si/0/10162537.jpg>

микробиологический лаборатория материал оборудование

Техника взятия и доставки материала в микробиологическую лабораторию

Успех бактериологического исследования зависит от правильности взятия материала и своевременной доставки его в лабораторию. В зависимости от характера патологического процесса, места максимальной (избирательной) локализации возбудителя и пути его выделения в окружающую среду исследуют мокроту (при заболеваниях органов дыхания), испражнения (при желудочно-кишечных инфекциях), мочу (при поражении почек и мочевыводящих путей), гнойное отделяемое (из гнойных очагов), кровь (при кровяных инфекциях).Материал необходимо брать в стерильную посуду с соблюдением правил, обеспечивающих стерильность.

Испражнения собирают в стерильные картонные тарелки или судно, предварительно обработанное раствором хлорной извести и тщательно промытое горячей водой для уничтожения следов дезинфицирующего раствора. Испражнения берут стерильным шпателем и вносят в стерильную пробирку с пробкой, содержащую консервант (глицериновая смесь, фосфатно-буферная смесь и др.). Можно брать материал специальной стеклянной ректальной трубкой, которую вводят в прямую кишку на 8 - 15 см. Мочу берут стерильным катетером в стерильную пробирку или банку. Рвотные массы собирают в стерильную широкогорлую банку, которую закрывают вощаной бумагой, мокроту - в стерильную банку с пробкой или в стерильную чашку Петри.

Трупный материал для микробиологического исследования необходимо брать в первые часы после смерти, так как в дальнейшем микрофлора кишечника распространяется по всему организму. Кровь из сердца берут стерильным шприцем. Из селезенки, печени и других органов после предварительного прижигания их поверхности вырезают стерильными ножницами кусочек и помещают в стерильный сосуд. При взятии отрезка кишечника или желудка предварительно накладывают две лигатуры выше и ниже места взятия.

На каждый стеклянный сосуд с инфекционным материалом необходимо наклеить этикетку, где указывают фамилию, имя, отчество больного и дату взятия материала. Надписи делают простым карандашом. К материалу, отправляемому в лабораторию, должно прилагаться направление, в котором указываются:

) название материала;

) учреждение, направившее материал;

) фамилия, имя, отчество больного;

) его возраст;

) дата взятия материала;

) клинический диагноз;

) цель исследования;

) подпись направляющего врача. Взятый исследуемый материал должен быть доставлен в лабораторию в кратчайший срок.

Если этот срок удлиняется, материал необходимо сохранять в холодильнике при 4°С или на льду. Материал, содержащий вирусы, должен и при транспортировке находиться в условиях низкой температуры (например, в термосе со льдом). Доставку инфицированного материала в лабораторию следует производить с соблюдением мер предосторожности: в закрытой посуде, в специальных металлических биксах, пеналах, чемоданах. Доставка особо опасного материала (от больных холерой, чумой, натуральной оспой и др.) осуществляется в соответствии со специальными инструкциями. Исследуемый материал помещают в плотно закрывающиеся сосуды, обвязывают пергаментом или другим водонепроницаемым материалом, после чего их обертывают салфетками, смоченными 5% раствором фенола или лизола (необходима полная гарантия от попадания дезинфицирующего раствора в банки с материалом!). После этого сосуды помещают в жестяные коробки с крышкой или металлические биксы. При пересылке на далекие расстояния их помещают в деревянные ящики, опечатывают сургучной печатью и делают надпись: «Опасно. Не открывать во время пересылки». Доставка производится специальным транспортом в сопровождении двух лиц (один из них врач).

Поступивший в лабораторию материал регистрируют в специальном журнале. Исследуемый материал в лаборатории можно хранить: неконсервированный - при температуре 4° С не более 1-2 суток, консервированный в 50 % глицерине, например кусочки органов и тканей,- в течение недель, а при необходимости длительного хранения - при замораживании до 15-20° С.

Режим работы микробиологической лаборатории зависит от степени опасности работы с тем или иным возбудителем. По степени патогенности и опасности работы все возбудители разделены на группы:- возбудители чумы;- возбудители высококонтагиозных эпидемических заболеваний: бруцеллеза, туляремии, сибирской язвы, сапа, натуральной оспы, различных риккетсиозов и др.;- возбудители эпидемических бактериальных инфекций: кишечных, туберкулеза, дифтерии, патогенные анаэробы, спирохеты (возвратный тиф), простейшие (малярия) и др.;- все патогенные кокки, гемоглобинофильные бактерии, сальмонеллы.

Работа с культурами I и II групп инфекций проводится в специальных лабораториях только с разрешения Министерства здравоохранения, III группы - в лабораториях СЭС, IV группы - во всех бактериологических лабораториях.

Техника безопасности при работе в лабораториях

ü  Каждый сотрудник лаборатории должен иметь закрепленное за ним рабочее место. Перед началом работы следует надеть специальную одежду, которая хранится в индивидуальных шкафчиках, раздельно с верхней одеждой. Тип защитного костюма и частота его смены определяются в зависимости от характера выполняемой работы.

ü  Нагревание легковоспламеняющихся жидкостей до 100° необходимо производить на водяных банях. Запрещается опускать колбу с легковоспламеняющейся жидкостью в горячую воду без предварительного постепенного подогрева. Нагревание легковоспламеняющихся жидкостей выше 100° производить на масляных банях, причем температура бань не должна превышать температуры самовоспламенения нагреваемой жидкости.

ü  При работе со спиртовкой или с легковоспламеняющимися жидкостями необходимо иметь под рукой одеяло, плотную ткань и т.д. для быстрого тушения огня в случае аварии.

ü  При работе со стеклянными приборами необходимо соблюдать следующие приемы:

ü  - защищать руки полотенцем при сборе стеклянных приборов или соединений отдельных частей их с помощью каучука; при разламывании стеклянных трубок придерживать левой трубку около надпила;

ü  - при закрывании колбы, пробирки или другого тонкостенного сосуда пробкой держать сосуд за верхнюю часть горлышка ближе к месту, куда должна быть вставлена пробка, защищая руку полотенцем;

ü  Чтобы избежать травмирования при резании стеклянных трубок, сборке и разборке приборов, изготовленных из стекла, необходимо соблюдать следующие меры безопасности:

а) стеклянные трубки небольшого диаметра ломать после надрезки их напильником, предварительно защитив руки полотенцем;

б) при вставлении стеклянных трубок в резиновые пробки или резиновые трубки (при сборке приборов) предварительно смочить снаружи стеклянную трубку и внутренние края резиновой трубки или отверстие в пробке водой, глицерином или вазелиновым маслом. Острые края стеклянных трубок должны быть оплавлены. Во всех случаях руки необходимо защищать полотенцем во избежание ранения от поломки стекла;