11
Способность персистировать на мембранах клетки обусловлена сходством структуры и состава цитоплазматической мембраны микоплазм и мембран эукариотических клеток. Кроме того, в таком состоянии микоплазмы способны использовать компоненты эукариотических клеток (в частности, холестерин и фосфолипиды) для построения собственных структур. Нахождение микоплазм на мембранах клетки хозяина вызывает нарушение функций клеток и развитие воспаления.
Микоплазмы способны прикрепляться к различным эукариотическим клеткам. Взаимодействие с макрофагами приводит к нарушению их функций; персистенция микоплазм на мембранах лимфоидных клеток оказывает деструктивной действие на иммунную систему; находясь на эритроцитах, микоплазмы воздействуют на эритропоэз (рисунок 10).
Рисунок 10 – Микоплазмы на мембране эритроцита.
Обмен антигенными компонентами с клетками хозяина обеспечивает антигенную мимикрию и развитие аутоиммунных реакций.
Клиническая картина заболеваний
Микоплазмы вызывают развитие респираторного или урогенитального микоплазмоза. Респираторный микоплазмоз обусловлен M. pneumoniae и протекает в форме назофарингита, бронхита, пневмонии. Урогенитальные микоплазмы (M. hominis, M. genitalium, U. urealyticum) вызывают острые и хронические гнойно-
воспалительные заболевания мочеполового тракта.
Уреаплазмоз представляет собой воспалительный процесс мочеполовых органов, при котором обнаруживается U. urealyticum, но не выявляются другие возбудители. U. urealyticum может длительное время находиться в организме, не приводя к заболеванию (бессимптомное носительство). Заболевание возникает при увеличении концентрации микроорганизмов сверх определенной нормы.
Чаще всего заражение происходит при половом контакте. Симптомы заболевания возникают через 3-5 недель с момента заражения. Основными симптомами являются зуд, жжение при мочеиспускании, незначительные выделения из мочеиспускательного канала.
У женщин часто заболевание протекает бессимптомно.
12
Осложнения микоплазмоза, уреаплазмоза
При микоплазмозе и уреаплазмозе возможно развитие многочисленных осложнений:
-невынашивание беременности;
-уретрит;
-цистит;
-сальпингит;
-пиелонефрит;
-артрит.
Особенности иммунитета при микоплазмозах
На антигены микоплазм в организме образуются антитела классов IgM, IgG и IgA, однако развитие иммунного ответа, как правило, не сопровождается элиминацией возбудителя из организма и формированием резистентности к повторному заражению. Основная роль в антибактериальном иммунитете принадлежит секреторным иммуноглобулинам. Макрофаги и нейтрофилы способны фагоцитировать клетки микоплазм, которые при этом остаются жизнеспособными (незавершенный фагоцитоз).
Диагностика
В зависимости от пораженного органа материалом для исследования могут быть мазки из носоглотки, мокрота, соскобы со слизистой оболочки урогенитального тракта.
Для диагностики микоплазмозов и уреаплазмозов используют культуральный, серологический и молекулярно-биологический методы (таблица 2).
Таблица 2 – Методы лабораторной диагностики микоплазменной инфекции (Воробьев А.А. и др., 2006)
Метод |
Цель исследования |
Применяемый тест |
Культуральный |
Выделение возбудителя |
Посев материала на |
|
|
элективные питательные |
|
|
среды, выделение и |
|
|
идентификация чистой |
|
|
культуры возбудителя |
Серологический |
Обнаружение антигенов |
РАГА, РИФ, ИФА |
|
возбудителя |
|
|
Выявление антител |
РПГА, ИФА, РИА и др. |
Молекулярно- |
Выявление ДНК |
ПЦР, ДНК-зонды |
генетический |
возбудителя |
|
13
Культуральный (бактериологический) метод. Для культивирования микоплазм используют жидкие и плотные селективные питательные среды, обогащенные лошадиной сывороткой, экстрактом дрожжей, мочевиной, L- цистеином. Для подавления роста посторонней микрофлоры в среды добавляют пенициллин. Микоплазмы растут в аэробных условиях при 37ОС. Для культивирования используют среду IST. Культуральное исследование является “золотым стандартом” диагностики микоплазмоза. Точность диагностики составляет 100%. Обнаружение микоплазм и уреаплазм в исследуемом материале более 104 КОЕ/мл (г) свидетельствует о заболевании. Этот метод позволяет не только обнаружить присутствие микоплазм, но и определить их концентрацию, установить чувствительность возбудителя к антибиотикам и проконтролировать эффективность лечения.
Ускоренный бактериологический метод для выявления генитальных микоплазм и уреаплазм основан на способности микоплазм расщеплять аргинин, а уреаплазм - мочевину с образованием щелочи. О росте культуры судят по изменению цвета индикатора, добавленного в питательную среду (рисунок 11).
Рисунок 11 – Проба на уреазу и аргинин.
Для выделения M. pneumoniae и определения чувствительности возбудителя к антибиотикам выпускаются специальные наборы (рисунок 12).
Рисунок 12 – Набор реагентов для выявления M. pneumoniae и определения чувствительности к антибиотикам (Пневмо-тест)
Серологические методы. Одним из методов диагностики является исследование мазков-отпечатков в РИФ (реакция непрямой иммунофлюоресценции). При этом микоплазмы и уреаплазмы окрашиваются в
14
ярко-зеленый цвет на поверхности клеток, а цитоплазма эукариотических клеток – в красно-бурый цвет (рисунок 13).
Рисунок 13 – Микоплазмы (ярко-зеленые) на поверхности клеток (красно-бурого цвета) при постановке реакции иммунофлюоресценции.
Однако люминесцентная диагностика не всегда дает удовлетворительные результаты, что связано с серологической гетерогенностью и антигенной изменчивостью возбудителя.
Иммуноферментный анализ (ИФА) направлен на выявление антител классов IgA, IgM и IgG к микоплазме и уреаплазме. При первичном инфицировании сначала образуются антитела классов М и А, а затем класса G. При повторном инфицировании быстро нарастают титры антител классов G и А; возможно отсутствие антител класса М.
Молекулярно-биологический метод. Для диагностики микоплазмозов наиболее широкое распространение в лабораторной практике получил метод ПЦР с праймерами на гены 23S и 16S рРНК микоплазм.
Лечение
Для лечения микоплазмозов используют антибиотики (макролиды, хинолоны). При назначении лечения микоплазменной инфекции выбор антибиотика производят с учетом клинической формы, тяжести заболевания, наличия осложнений, беременности. Антибиотики назначают с учетом чувствительности к ним возбудителя. Антибиотикотерапию назначают в случае выявления облигатно патогенного вида – M. genitalium. Для условно-патогенных микоплазм диагностически значимым является выявление возбудителя в концентрации 104 и более микробных клеток в 1 мл материала.
Вопросы для контроля усвоения материала
1.Таксономическое положение микоплазм.
2.Морфологические и тинкториальные особенности микоплазм.
3.Культуральные свойства микоплазм.
4.Факторы патогенности микоплазм и патогенез заболеваний.
15
5.Диагностика микоплазмозов.
6.Профилактика и лечение микоплазмозов.
Тренировочные тесты
1.Облигатным патогеном для человека является (один правильный ответ):
1.1.M. hominis 1.2 M. genitalium 1.3 U. urealyticum 1.4 U. parvum
1.5 E. coli
2.Микоплазмы – это (один правильный ответ):
2.1грибы
2.2актиномицеты
2.3бактерии
2.4простейшие
2.5вирусы
3.Особенности микоплазм (несколько правильных ответов): 3.1 имеют толстую ригидную клеточную стенку 3.2 не имеют клеточной стенки 3.3 имеют форму кокков 3.4 имеют форму палочек
3.5 не имеют постоянной формы
4.Особенность микоплазм (несколько правильных ответов): 4.1 отсутствие пептидогликана 4.2 облигатные аэробы
4.3 облигатный внутриклеточный паразитизм
4.4 паразитирование на клеточной мембране
4.5 наличие внешней мембраны
5.Для микоплазм характерно (несколько правильных ответов): 5.1 стеролозависимость 5.2 наличие ригидной клеточной стенки
5.3 дизъюнктивный способ репродукции
5.4 наличие липидной мембраны
5.5 облигатный внутриклеточный паразитизм
6.Антибиотики, действующие на микоплазмы (несколько правильных ответов): 6.1 бета-лактамные антибиотики 6.2 ингибиторы синтеза белка
6.3 ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот
6.4 ингибиторы синтеза цитоплазматической мембраны
6.5 ингибиторы синтеза пептидогликана