Материал: Микоплазмы

Внимание! Если размещение файла нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам

11

Способность персистировать на мембранах клетки обусловлена сходством структуры и состава цитоплазматической мембраны микоплазм и мембран эукариотических клеток. Кроме того, в таком состоянии микоплазмы способны использовать компоненты эукариотических клеток (в частности, холестерин и фосфолипиды) для построения собственных структур. Нахождение микоплазм на мембранах клетки хозяина вызывает нарушение функций клеток и развитие воспаления.

Микоплазмы способны прикрепляться к различным эукариотическим клеткам. Взаимодействие с макрофагами приводит к нарушению их функций; персистенция микоплазм на мембранах лимфоидных клеток оказывает деструктивной действие на иммунную систему; находясь на эритроцитах, микоплазмы воздействуют на эритропоэз (рисунок 10).

Рисунок 10 – Микоплазмы на мембране эритроцита.

Обмен антигенными компонентами с клетками хозяина обеспечивает антигенную мимикрию и развитие аутоиммунных реакций.

Клиническая картина заболеваний

Микоплазмы вызывают развитие респираторного или урогенитального микоплазмоза. Респираторный микоплазмоз обусловлен M. pneumoniae и протекает в форме назофарингита, бронхита, пневмонии. Урогенитальные микоплазмы (M. hominis, M. genitalium, U. urealyticum) вызывают острые и хронические гнойно-

воспалительные заболевания мочеполового тракта.

Уреаплазмоз представляет собой воспалительный процесс мочеполовых органов, при котором обнаруживается U. urealyticum, но не выявляются другие возбудители. U. urealyticum может длительное время находиться в организме, не приводя к заболеванию (бессимптомное носительство). Заболевание возникает при увеличении концентрации микроорганизмов сверх определенной нормы.

Чаще всего заражение происходит при половом контакте. Симптомы заболевания возникают через 3-5 недель с момента заражения. Основными симптомами являются зуд, жжение при мочеиспускании, незначительные выделения из мочеиспускательного канала.

У женщин часто заболевание протекает бессимптомно.

12

Осложнения микоплазмоза, уреаплазмоза

При микоплазмозе и уреаплазмозе возможно развитие многочисленных осложнений:

-невынашивание беременности;

-уретрит;

-цистит;

-сальпингит;

-пиелонефрит;

-артрит.

Особенности иммунитета при микоплазмозах

На антигены микоплазм в организме образуются антитела классов IgM, IgG и IgA, однако развитие иммунного ответа, как правило, не сопровождается элиминацией возбудителя из организма и формированием резистентности к повторному заражению. Основная роль в антибактериальном иммунитете принадлежит секреторным иммуноглобулинам. Макрофаги и нейтрофилы способны фагоцитировать клетки микоплазм, которые при этом остаются жизнеспособными (незавершенный фагоцитоз).

Диагностика

В зависимости от пораженного органа материалом для исследования могут быть мазки из носоглотки, мокрота, соскобы со слизистой оболочки урогенитального тракта.

Для диагностики микоплазмозов и уреаплазмозов используют культуральный, серологический и молекулярно-биологический методы (таблица 2).

Таблица 2 – Методы лабораторной диагностики микоплазменной инфекции (Воробьев А.А. и др., 2006)

Метод

Цель исследования

Применяемый тест

Культуральный

Выделение возбудителя

Посев материала на

 

 

элективные питательные

 

 

среды, выделение и

 

 

идентификация чистой

 

 

культуры возбудителя

Серологический

Обнаружение антигенов

РАГА, РИФ, ИФА

 

возбудителя

 

 

Выявление антител

РПГА, ИФА, РИА и др.

Молекулярно-

Выявление ДНК

ПЦР, ДНК-зонды

генетический

возбудителя

 

13

Культуральный (бактериологический) метод. Для культивирования микоплазм используют жидкие и плотные селективные питательные среды, обогащенные лошадиной сывороткой, экстрактом дрожжей, мочевиной, L- цистеином. Для подавления роста посторонней микрофлоры в среды добавляют пенициллин. Микоплазмы растут в аэробных условиях при 37ОС. Для культивирования используют среду IST. Культуральное исследование является “золотым стандартом” диагностики микоплазмоза. Точность диагностики составляет 100%. Обнаружение микоплазм и уреаплазм в исследуемом материале более 104 КОЕ/мл (г) свидетельствует о заболевании. Этот метод позволяет не только обнаружить присутствие микоплазм, но и определить их концентрацию, установить чувствительность возбудителя к антибиотикам и проконтролировать эффективность лечения.

Ускоренный бактериологический метод для выявления генитальных микоплазм и уреаплазм основан на способности микоплазм расщеплять аргинин, а уреаплазм - мочевину с образованием щелочи. О росте культуры судят по изменению цвета индикатора, добавленного в питательную среду (рисунок 11).

Рисунок 11 – Проба на уреазу и аргинин.

Для выделения M. pneumoniae и определения чувствительности возбудителя к антибиотикам выпускаются специальные наборы (рисунок 12).

Рисунок 12 – Набор реагентов для выявления M. pneumoniae и определения чувствительности к антибиотикам (Пневмо-тест)

Серологические методы. Одним из методов диагностики является исследование мазков-отпечатков в РИФ (реакция непрямой иммунофлюоресценции). При этом микоплазмы и уреаплазмы окрашиваются в

14

ярко-зеленый цвет на поверхности клеток, а цитоплазма эукариотических клеток – в красно-бурый цвет (рисунок 13).

Рисунок 13 – Микоплазмы (ярко-зеленые) на поверхности клеток (красно-бурого цвета) при постановке реакции иммунофлюоресценции.

Однако люминесцентная диагностика не всегда дает удовлетворительные результаты, что связано с серологической гетерогенностью и антигенной изменчивостью возбудителя.

Иммуноферментный анализ (ИФА) направлен на выявление антител классов IgA, IgM и IgG к микоплазме и уреаплазме. При первичном инфицировании сначала образуются антитела классов М и А, а затем класса G. При повторном инфицировании быстро нарастают титры антител классов G и А; возможно отсутствие антител класса М.

Молекулярно-биологический метод. Для диагностики микоплазмозов наиболее широкое распространение в лабораторной практике получил метод ПЦР с праймерами на гены 23S и 16S рРНК микоплазм.

Лечение

Для лечения микоплазмозов используют антибиотики (макролиды, хинолоны). При назначении лечения микоплазменной инфекции выбор антибиотика производят с учетом клинической формы, тяжести заболевания, наличия осложнений, беременности. Антибиотики назначают с учетом чувствительности к ним возбудителя. Антибиотикотерапию назначают в случае выявления облигатно патогенного вида – M. genitalium. Для условно-патогенных микоплазм диагностически значимым является выявление возбудителя в концентрации 104 и более микробных клеток в 1 мл материала.

Вопросы для контроля усвоения материала

1.Таксономическое положение микоплазм.

2.Морфологические и тинкториальные особенности микоплазм.

3.Культуральные свойства микоплазм.

4.Факторы патогенности микоплазм и патогенез заболеваний.

15

5.Диагностика микоплазмозов.

6.Профилактика и лечение микоплазмозов.

Тренировочные тесты

1.Облигатным патогеном для человека является (один правильный ответ):

1.1.M. hominis 1.2 M. genitalium 1.3 U. urealyticum 1.4 U. parvum

1.5 E. coli

2.Микоплазмы – это (один правильный ответ):

2.1грибы

2.2актиномицеты

2.3бактерии

2.4простейшие

2.5вирусы

3.Особенности микоплазм (несколько правильных ответов): 3.1 имеют толстую ригидную клеточную стенку 3.2 не имеют клеточной стенки 3.3 имеют форму кокков 3.4 имеют форму палочек

3.5 не имеют постоянной формы

4.Особенность микоплазм (несколько правильных ответов): 4.1 отсутствие пептидогликана 4.2 облигатные аэробы

4.3 облигатный внутриклеточный паразитизм

4.4 паразитирование на клеточной мембране

4.5 наличие внешней мембраны

5.Для микоплазм характерно (несколько правильных ответов): 5.1 стеролозависимость 5.2 наличие ригидной клеточной стенки

5.3 дизъюнктивный способ репродукции

5.4 наличие липидной мембраны

5.5 облигатный внутриклеточный паразитизм

6.Антибиотики, действующие на микоплазмы (несколько правильных ответов): 6.1 бета-лактамные антибиотики 6.2 ингибиторы синтеза белка

6.3 ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот

6.4 ингибиторы синтеза цитоплазматической мембраны

6.5 ингибиторы синтеза пептидогликана