Материал: Изменение состава периферической крови под воздействием физических нагрузок

Изображение аппарата SISMYX-500, и момента отбора пробы для анализа, представлены на рисунке 3.

Фиксация мазков крови. Данный этап предохраняет форменные элементы от содержащейся в красителях воды, под влиянием которой в не фиксированных мазках происходит гемолиз эритроцитов и изменяется морфология лейкоцитов.

Фиксатор также вызывает коагуляцию белков и тем самым закрепляет препарат на стекле. В качестве фиксирующей жидкости использовали раствор эозинметиленового синего по Май-Грюнвальду. Высушенные мазки опускались в широкогорлую банку с фиксатором на 3-5 минут. Далее пинцетом мазки были извлечены и высушены на воздухе.

Рисунок 3 - Гематологический анализатор SISMYX-500

Окраска мазков крови. Фиксированные сухие мазки поместили в контейнер, который опустили в кювету с рабочим раствором красителя и выдержали в нём экспозицию в 30 минут.

Затем, контейнер был перенесён в кювету с водопроводной водой, а затем в вертикальный штатив для сушки. В качестве красящего раствора был использован краситель по прописи Романовского-Гимзы. В состав красителя входят: азур-2 (смесь равных количеств азура-1 и метиленового синего) и эозин. Критериями правильности данной окраски являются розово-оранжевые гранулы эозинофилов, светло-розовый цвет эритроцитов, нейтрофильная зернистость фиолетового цвета.

Подсчёт лейкоцитарной формулы производят с помощью иммерсионной системы микроскопа с увеличением ×630. Для работы используется специальное иммерсионное масло, каплю которого наносят на препарат. Удобный обзор препарата настраивают с помощью микро- и макровинтов. Для регистрации клеток при подсчёте лейкоцитарной формулы использовался счётчик лабораторный СЛ-1.

Это простейший арифмометр снабжённый клавишами, обозначенными буквами для подсчёта соответствующих видов лейкоцитов, изображён на рисунке 4.

Рисунок 4 - Счётчик лабораторный СЛ-1

Подсчёт лейкоцитов производился в тонкой части мазка, где эритроциты располагаются одиночно. Препарат просматривают по зигзагообразной линии («линии Меандра») в количестве 3-5 полей зрения. Когда сосчитано 100 клеток, счётчик издаёт характерный сигнал, что означает окончание подсчёта лейкограммы данного препарата. Подсчитывались только целые, не разрушенные клетки.

.3 Статистическая обработка результатов исследования

Для оценки влияния физической нагрузки на состояние показателей периферической крови использовались результаты общего анализа крови до и после физической нагрузки.

В ходе исследования нами были вычислены среднее арифметическое, стандартное отклонение, стандартная ошибка, коэффициент вариации по продуктивности и устойчивости внимания, а также по показателям темпа выполнения.

Средняя арифметическая вычисляется по формуле:

, (4)

где Xi - значение признака, варианта;- число значений.

Стандартное отклонение:

, (5)

где x2 - сумма квадратов центральных отклонений, т. е. квадратов разностей между каждым значением и средней арифметической;

n - 1 - число степеней свободы, равное числу объектов в группе без одного.

Ошибка стандартного отклонения:

 (6)

где  - дисперсия <#"882912.files/image009.gif">, (7)

где σ - стандартное отклонение;

μ - средняя арифметическая.

В результате обработки полученного материала, был проведён статистический анализ, построены графики зависимости показателей концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, от воздействующего на них фактора физической нагрузки, а также таблицы результатов дисперсионного анализа, для каждого из исследуемых показателей.

Статистическая обработка результатов исследований выполнена с использованием прикладных программ MS Excel 2007 и Statistica for Windows 6.0. Оценка достоверности различий осуществлялась на основе критерия Фишера. Влияние физической нагрузки на показатели крови оценено методом однофакторного дисперсионного [23].

3. Результаты исследований и их обсуждение

.1 Влияние фактора физической нагрузки на показатели периферической крови человека

Влияние фактора физической нагрузки на показатели периферической крови оценивались по показателям концентрация гемоглобина, количество эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, полученным для обследованной группы до и после физической нагрузки. В таблице 4 представлены результаты статистической обработки полученных данных до выполнения физической нагрузки.

Таблица 4 - Состояние периферической крови до нагрузки

Установлено, что минимальное значение концентрации гемоглобина составляет 134 г/л, а максимальное 165 г/л, вариационный размах 31 г/л. Среднее значение концентрации гемоглобина в группе составило 151,2±2,1 г/л, при стандартном отклонении 6 г/л.

Минимальное значение содержания эритроцитов составило 4,9×109, а максимальное 5,8×1012, вариационный размах 1,7×1012. Среднее значение исследуемого показателя составило 4,9±0,1×1012, при стандартном отклонении 0,4 ×1012.

Минимальное значение уровня содержания лейкоцитов составило 4,02×109, а максимальное 8,7×109, вариационный размах 4,1×109. Среднее значение содержания лейкоцитов 6,7±0,11×109, при стандартном отклонении 1,04.

Минимальное значение уровня содержания тромбоцитов составило 160 ×109, а максимальное 216×109, вариационный размах 66×109. Среднее значение исследуемого показателя составило 188,9±2,2×109, при стандартном отклонении 16,8 ×109.

При сопоставлении показателей периферической крови до физической нагрузки, видно, установлено, что все показатели общего анализа крови находятся в допустимых границах нормы здоровых людей.

В таблице 5 представлены результаты статистической обработки полученных данных после выполнения физической нагрузки.

Таблица 5 - Состояние периферической крови после нагрузки

Установлено, что после физической нагрузки минимальное значение концентрации гемоглобина составило 142 г/л, а максимальное 176 г/л, вариационный размах 34 г/л. Среднее значение концентрации гемоглобина 159,4±0,9 г/л, при стандартном отклонении 7,2 г/л.

Минимальное значение концентрации эритроцитов составило 4,7×1012, а максимальное 8,3×1012, вариационный размах 3,6×1012. Среднее значение составило 5,5±0,07×1012, при стандартном отклонении 0,5×1012.

Минимальное значение содержания лейкоцитов составило 4,8×109, а максимальное 9,6×109, вариационный размах 4,8×109. Среднее значение составило 7,4±0,13×109, при стандартном отклонении 1,01×109.

Минимальное значение содержания тромбоцитов составило 145 ×109, а максимальное 275×109, вариационный размах 30×109. Среднее значение показателя составило 207,9±3,5×109, при стандартном отклонении 26,7×109.

Оценено различие между коэффициентами вариации показателей до и после физической нагрузки: для гемоглобина разница составила 0,2 %, для эритроцитов 1,71%, для лейкоцитов -1,4%, для тромбоцитов 3,8%. В среднем вариация значений не превысила 5%.

Методом однофакторного дисперсионного анализа определено влияние физической нагрузки на вариацию показателей периферической крови. В таблице 6 отражены результаты однофакторного дисперсионного анализа для концентрации гемоглобина.

Таблица 6 - Результаты дисперсионного анализа для гемоглобина

Из таблицы 6 видно, что физическая нагрузка оказывает значимое влияние на концентрацию гемоглобина периферической крови. Критерий Фишера составил 20,69 (р<0,001), 24% варьирования дисперсии обусловлено влиянием изучаемого фактора.

В таблице 7 представлены результаты однофакторного дисперсионного анализа для эритроцитов.

Таблица 7 - Результаты дисперсионного анализа для эритроцитов

Из таблицы 7 видно, что физическая нагрузка оказывает значимое влияние на содержание эритроцитов в периферической крови. Критерий Фишера составил 28,65 (р<0,001), 30,8% варьирования дисперсии обусловлено влиянием изучаемого фактора.

В таблице 8 представлены результаты однофакторного дисперсионного анализа для лейкоцитов.

Таблица 8 - Результаты дисперсионного анализа для лейкоцитов

Из таблицы 8 видно, что физическая нагрузка оказывает значимое влияние на содержание лейкоцитов периферической крови. Критерий Фишера составил 5,13 (р<0,02), 7,4% варьирования дисперсии обусловлено влиянием изучаемого фактора.

В таблице 9 представлены результаты однофакторного дисперсионного анализа для тромбоцитов.

Таблица 9 - Результаты дисперсионного анализа для тромбоцитов

Из таблицы 9 видно, что физическая нагрузка оказывает значимое влияние на содержание тромбоцитов периферической крови. Критерий Фишера составил 9,5 (р<0,002), 14,9% варьирования дисперсии обусловлено влиянием изучаемого фактора.

Характер распределения оцениваемых показателей периферической крови до и после физической нагрузки представлен на рисунках 7-10.

Рисунок 5 - Графическая интерпретация достоверности увеличения концентрации гемоглобина под влиянием физической нагрузки

Из рисунка 5 видно, что значимого изменения в характере распределения концентрации гемоглобина после физической нагрузки не наблюдалось. Вариация значений концентрации гемоглобина после нагрузки увеличилась не более чем на 10%, вариационный размах изменился на 1%.