Гистология биоптата печени - объективный показатель верификации диагноза при патологии печени крупного рогатого скота
В.В. Дронов, Р.В. Роменский, Н.В. Роменская
Аннотация
В результате диспансеризации нами были выявлены коровы и телята с клинически выраженными признаками поражения печени при нормальных показателях температуры, пульса и дыхания. У здоровых и больных коров и телят были взяты биоптаты печени для морфологического исследования с целью верификации диагноза. На срезах печени больной коровы балочное строение паренхимы печени нарушено, просматриваются признаки жировой инфильтрации печени, ядра гепатоцитов с признаками пикноза и лизиса. На срезах печени больных телят видны признаки некроза, полная дискомплексация и утрата балочного строения паренхимы, клеточная инфильтрация, цитолиз и кариолиз ядер гепатоцитов. Считаем, что диагностика заболеваний печени, базируясь на комплексе общих и специальных исследований, должна включать прижизненное морфологическое исследование биоптата печени для оценки степени структурных повреждений органа.
Ключевые слова: коровы, телята, болезни печени, биоптат, гистологические исследования.
Abstract
LIVER BIOPSY SLIDE HISTOLOGY IS AN OBJECTIVE INDICATOR OF DIAGNOSIS VERIFICATION IN CATTLE LIVER PATHOLOGY
As a result of periodic health examination, we identified cows and calves with clinically apparent signs of liver damage with normal temperature, pulse and respiration. Liver biopsies were taken from healthy and sick cows and calves for morphological examination in order to verify the diagnosis. On sections of the liver of a sick cow, the beamed structure of the liver parenchyma is broken, signs of fatty infiltration of the liver, hepatocyte nuclei with signs of pycnosis and lysis are visible. On sections of the liver of sick calves, signs of necrosis, complete discomplexa- tion and loss of the beamed structure of the parenchyma, cell infiltration, cytolysis and karyolysis of hepatocyte nuclei are visible. Our understanding is that the diagnosis of liver diseases, based on a complex of general and special studies, should include an intravital morphological study of a liver biopsy to assess the degree of structural damage to the organ.
Keywords: cows, calves, liver diseases, biopsy, histodiagnosis.
Интенсификация сельскохозяйственного производства ориентирована на получение максимального количества продукции и минимизацию экономических издержек. Это сопровождается тем, что организм эксплуатируемого поголовья, прежде всего молочных коров, испытывает серьёзные нагрузки, обусловленные техногенными факторами среды, зачастую превышающими его физиологические возможности, что в конечном итоге приводит к срыву компенсаторно-адаптационных механизмов, уменьшению продуктивного периода и возникновению различных заболеваний, в том числе гепатобилиарной системы. В силу своей поли- этиологичности (микроэлементозы, микотоксикозы, фитотоксикозы и др.) заболевания печени достаточно широко распространены в хозяйствах промышленного типа (до 85% в структуре внутренней патологии) и наносят серьёзный экономический ущерб, складывающийся из снижения продуктивности скота, рождения слабого, зачастую нежизнеспособного приплода и ранней выбраковки животных [1, 2, 3].
Будучи центральным органом, регулирующим механизмы адаптации и компенсации нарушенных функций, печень быстро реагирует на любые изменения, возникающие в организме, в полном соответствии с универсальным принципом структурного обеспечения гомеостаза, действующим на всех уровнях организации от молекулярного до тканевого и органного. Одной из ведущих особенностей печени является колоссальный запас резервной ёмкости, который позволяет даже незначительной сохранившейся части органа выполнять свои метаболические и гомеостатические задачи. Но именно по этой же причине поражение этого органа может протекать длительное время бессимптомно, а клиническая манифестация функциональных расстройств печени характеризуется неспецифичностью признаков. Зачастую даже обнаружение патогномоничных признаков поражения гепатобилиарной системы не позволяет своевременно определить нозологическую принадлежность того или иного патологического процесса, а постановка диагноза в терминальной стадии приводит лишь к вынужденному убою.
Известно, что целесообразность стратегии терапевтического воздействия на больной организм во многом определяется достоверностью диагноза. Поэтому, несмотря на достаточно широкий арсенал средств клинической диагностики, использование только физикаль- ных исследований и ряда лабораторных рутинных тестов не всегда позволяет установить функциональную неполноценность печени и сформулировать вероятный прогноз исхода заболевания [4, 5].
До недавнего времени в условиях промышленных комплексов исследование печени в основном производили общими методами, включающими лишь осмотр, пальпацию и перкуссию, при необходимости прибегая к специальным.
Поскольку при любой патологии гепатобилиарной системы происходит нарушение одной или нескольких функций печени, для определения её функционального состояния в современной клинической практике применяется большое количество (более 1000) биохимических методов исследования и различных функциональных проб, в основу большинства которых положен метод нагрузок [6, 7, 8], и их количество постоянно увеличивается. То есть не существует какого-либо одного универсального анализа, но не следует также прибегать и ко множеству различных исследований. Необходимо иметь в виду, что чем больше проводится необоснованных диагностических мероприятий, тем больше шансов выявить незначимые отклонения биохимических показателей, что затрудняет процесс окончательной верификации диагноза. В таких условиях грамотный специалист сознательно будет ограничиваться небольшим количеством относительно простых, но обладающих высокой диагностической ценностью исследований [9]. печень дыхание диспансеризация биоптат
Так как печень обладает значительным запасом резервной ёмкости, минимальное и даже умеренное повреждение её клеток может значительно не влиять на её метаболические функции, но проявляться в виде анатомических, морфологических, а также различных гемо- и билединамических расстройств. Для более точной диагностики существует ряд специальных методов исследования.
Инструментальные методы позволяют провести прижизненное морфологическое исследование. В недалёком прошлом ветеринарным специалистам, столкнувшимся с проблемами болезней печени, были доступны разве что лапароскопия и биопсия. В настоящее время в практике клинической гепатологии всё чаще применяются методы сканирования гепа- тобилиарной системы, которые позволяют выявить опухоли, обструкцию кровеносных сосудов и жёлчных путей. Ввиду дороговизны исследований и трудностей с оборудованием компьютерная и магнитно-резонансная томографии недоступны большинству ветеринарных клиник и даже институтов, а наибольшее распространение получило ультразвуковое исследование (УЗИ).
Отметим, что при достаточном опыте специалиста и наличии соответствующего (по техническим характеристикам) оборудования УЗИ-диагностика позволяет визуализировать большинство нарушений ёмкостной (сосудистой и жёлчевыводящей) системы печени. Также для ультразвука доступны проявления мезенхимально-васпалительного синдрома, новообразования, абсцессы и кисты печени, при условии, что их размер достигает 0,5 и более см в диаметре.
В то же время не следует забывать, что ряд морфофункциональных особенностей печени крупного рогатого скота [9], в том числе тесная связь гепатоцитов с кровью (каждый тяж клеток, а не печёночная балка, имеет контакт с синусоидами, когда стенку сосуда образуют непосредственно гепатоциты), создают неоднородную эхогенность ткани, что в свою очередь существенно затрудняет диагностику большинства паренхиматозных процессов.
Особое место в диагностике заболеваний печени занимают малоинвазивные методы исследования, и пальма первенства среди них, безусловно, принадлежит пункционной биопсии. На данном этапе развития ветеринарной медицины накоплен достаточно обширный материал по проведению биопсии печени, как в практических, так и научных целях.
Исследованию пунктатов печени отводится ведущая роль в случаях установления ге- патомегалий неясного происхождения, когда пункционная биопсия является, по сути, единственным достоверным методом дифференциальной диагностики, выявляющим такие заболевания как жировая печень, холангит, цирроз, гемохроматоз, рак и т. д. [10, 11]. При этом, как показывают наши исследования [12, 13], пункционная биопсия печени может применяться даже на поголовье новорождённого молодняка с целью диагностики неонатальной гепато- патии крупного рогатого скота на раннем этапе постнатального онтогенеза.
Цель исследования - для верификации диагноза провести гистологическое исследование печени больных (с выявленными клиническими признаками) и здоровых коров и телят в сравнительном аспекте на предмет выявления морфологических изменений, характерных для заболеваний печени.
Материал и методы исследования. В процессе диспансеризации животных в одном из хозяйств Белгородского района Белгородской области нами выявлены коровы и телята с клиническими признаками поражения печени: изменение перкуторных границ, слабо выраженная желтушность слизистых, угнетение, температура тела нормальная, нарушена жвачка, движения рубца ослаблены, у телят фиксировали диспепсию и др. Проведена прижизненная биопсия печени с помощью иглы, модифицированной Р.В. Роменским с соавторами [11, 12], которая исключала риск травмирования рядом расположенных органов. Для гистологического исследования достаточно было столбика пунктата ткани высотой 1-4 см и массой 10-50 мг.
Полученный материал фиксировали в 10-12%-ном растворе формалина, заливали в парафин, готовили срезы на микротоме, которые по общепринятым методикам окрашивали гематоксилин-эозином и изучали с помощью установки «Видео-тест» [14]. Проводился сравнительный анализ изменений гистологической структуры печени здоровых и больных животных.
Результаты собственных исследований. Срез печени здоровой коровы представлен на рис. 1. На нем видно стандартное балочное строение паренхимы печени, гепатоциты без визуальных изменений. На рис. 2 - срез печени больной коровы. Просматриваются явно выраженные признаки жировой инфильтрации печени. Оптически пустые пространства соответствуют местам расположения капель жира, растворённого при обработке патматериала в спиртовом фиксаторе. Ядра гепатоцитов частично подвержены пикнозу и лизису. Балочное строение паренхимы печени нарушено.
Рис. 1 - Срез печени здоровой коровы. Окраска гематоксилин-эозин, ув. х 400
Рис. 2 - Срез печени коровы. Окраска гематоксилин-эозин, ув. х 400
Срезы биоптатов печени здорового и больных телят представлены на рисунках 3, 4 и 5. На рис. 3 - печень здорового теленка имеет четко выраженное типичное балочное строение, гепатоциты стандартного вида, без включений. На рис. 4 - признаки обширного некроза: лимфоидная инфильтрация очага, цитолиз и кариолиз в гепатоцитах, явления кариопикноза. На рис. 5 просматривается выраженный обширный пёстрый некроз гепатоцитов, полная диском- плексация и утрата балочного строения паренхимы печени, клеточная инфильтрация.
Рис. 3 - Срез печени здорового телёнка. Окраска гематоксилин-эозин, ув. х 400
Рис. 4 - Срез печени больного телёнка. Окраска гематоксилин-эозин, ув. х 400
Рис. 5 - Срез печени больного телёнка. Окраска гематоксилин-эозин, ув. х 400
Таким образом, считаем, что диагностика заболеваний печени должна базироваться на комплексе общих и специальных (в том числе инструментальных) методов исследования. При этом лабораторная диагностика целесообразна для установления предварительного диагноза и мониторинга динамики патологического процесса, а для верификации полученных данных и оценки степени структурных повреждений органа необходимо прижизненное морфологическое исследование биоптата.
Библиография
1. Чаплынских А.Я., Никулин И.А. Поражение печени у бычков абердин-ангусской породы при интенсивном откорме // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. 2021. № 2. С. 76-78.
2. Яковлева Е.Г., Павлов М.Е., Дронов В.В. Циноглоссотоксикоз у бычков // Ветеринария. 2005. № 12. С. 46-47.
3. Жаров А.В., Жарова Ю.П. Патология обмена веществ у высокопродуктивных животных // Ветеринария. 2012. № 9. С. 46-49.
4. Губергриц Н.Б. Хронические гепатиты и циррозы печени. Современная классификация, диагностика и лечение. Донецк : ООО «Лебедь». 2002. 166 с.
5. Шерлок Ш., Дули Дж. Заболевания печени и желчных путей: практическое руководство. М. : Гэотар Медицина. 2002. 864 с.
6. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: в 2 т. Т. 1. Мн. : Беларусь. 2002. 495 с.
7. Уша Б.В. Ветеринарная гепатология. М. : Колос. 1979. 263 с.
8. Kapustin R.F., Romenskiy R.V. Clinical histology of liver of cattle newborn calves: applied aspect of study // Acta Biologica Szegediensis. 2007. Vol. 51. Suppl. 1. P. 17.
9. Структурные преобразования печени представителей семейства bovidae как критерий оценки функционального состояния организма / Р.В. Роменский, Н.В. Роменская, Р.Ф. Капустин, А.В. Щеглов, А.М. Васильева // Астраханский медицинский журнал. 2007. № 2. С. 212-213.
10. Биопсия печени / И.В. Маев, A.M. Чарный, Е.С. Вьючнова, Л.А. Шестакова, Н.А. Степанян, Н.Л. Тордия, И.Н. Химина. М. : ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ. 2002. 30 с.
11. Роменский Р.В., Роменская Н.В., Капустин Р.Ф. Устройство для пункционной биопсии // Изобретения. 2005. № 34 (Ш ч). С. 477.
12. Роменский Р.В., Роменская Н.В., Капустин Р.Ф. Способ биопсии тканей печени // Изобретения. 2007. № 31 (III ч). С. 663.
13. Роменский Р.В., Роменская Н.В. Методы ультразвукового сканирования и пункционной биопсии в диагностике структурных повреждений печени у новорожденных телят // Бюллетень научных работ Белгородской государственной сельскохозяйственной академии имени В.Я. Горина. 2003. № 1. С. 55-61.