Плазминоген-активаторная способность Ри у-субъединиц заметно изменялась в присутствии пуриновых нуклеотидов. Неожиданным явилось обнаружение у всех трех субъединиц нуклеазной активности - и по ДНК и по РНК. Причем эффекторный анализ и концентрационная зависимость дают полное основание считать, что субъединицы самостоятельны в этой активности, и нет каких-либо взаимопримесей.
Что касается а-субъединицы, обработка ее источниками активных форм кислорода не привела к проявлению протеолитической активности. Вместе с тем ее молекула имеет активный центр, наделенный активностью нуклеазной. Этот момент является предметом дальнейшего отдельного изучения.
Ранее в литературе уже высказывались суждения относительно более сложного механизма действия КОБ на клетку-мишень: не только путем взаимодействия со специфическим рецептором плазматической мембраны (хотя и характер этого взаимодействия остается недостаточно ясным), но и путем расщепления белка, связывающего инсулинподобный фактор роста (ЮББР) [39], а также воздействия на цитоплазматический, включая р 75КТК и ядерный КОБ-рецепторы [4043]. Последний аспект в свете обнаружения у субъединиц КОБ эндонуклеазной активности приобретает, на наш взгляд, особый смысл. Кроме того, изложенные факты создают предпосылки к проведению поисковых работ по созданию КОБ-миметиков и, наконец, раскрытию структурных основ проявления обнаруженных функциональных особенностей.
Список литературы
1. Калюнов, В.Н. Фактор роста нервной ткани. Наука и техника / В.Н. Калюнов. - Минск, 1984. - 216 с.
2. Сукманский, О.И. Биологически активные вещества слюнных желез / О.И. Сукманский // Здоровья. - Киев, 1991. - 112 с.
3. Eibi, J.K. Structural, biological, and pharmacological strategies for the inhibition of nerve growth factor / J.K. Eibi, B.C. Strasser, G.M. Ross // Neurochemistry international. - 2012. - Vol. 61. - P. 1266-1275.
4. Исаев, Н.К. Роль фактора роста нервов в пластических перестройках холинергических нейронов базальных ядер переднего мозга / Н.К. Исаев, Е.В. Стельмашук, Е.Е. Генрихс // Биохимия. - 2017. -Т. 82, вып. 3. - С. 429-440.
5. Hiramatsu, M. Plasminogen activator activity in the subunits of mouse submandibular gland nerve-growth factor and epidermal growth factor / M. Hiramatsu, K. Hatakeyama, M. Kumegawa, N. Minami // Arch. Oral Biol. - 1982.Vol. 27, No 6. - P. 517-518.
6. Ebendal, T. Function and evolution in the NGF family and its receptors / J. Neurosci. - Res. - 1992. - Vol. 32. - P. 461-470.
7. Bax, B. Structure of mouse 7S NGF: a complex of nerve growth factor with four binding proteins / B. Bax, T.L. Blundell, J. MurreyRust, N.Q. McDonald // Structure. - 1997. - Vol. 5, No 10. - P. 1275-1285.
8. Stach, R.W. The characterization of the asubunits of 7S nerve growth factor / R.W. Stach, P.F. Pignatti, M.E. Baker, M.E. Shooter // J. Neurochem. -1980. - Vol. 34, No 4. - P. 850-855.
9. Orenstein, N. S. Nerve growth factor: a protease that can activate plasminogen / N.S. Orenstein, H.F. Dvorak, M.H. Blanchard, M. Young // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1978. - Vol. 75, No 11. - P. 5497-5500.
10. Greene, L. A. Subunit interaction and enzymatic activity of mouse 7S nerve growth factor / L.A. Greene, E.M. Shooter, S. Varon // Biochemistry. - 1969. - Vol. 8, No 9. - P. 3735-3741. doi: 10.1021/bi00837a037.
11. Nikandrov, V.N. Functional properties of nerve growth factor molecule / V.N. Nikandrov [et al ] // 18 Intern. Congress of Biochem. Mol. Biol. Abstract Book. Birmingham, 2000. - P. 317 (No 1152).
12. Никандров, В.Н Новые функциональные свойства молекулы фактора роста нервов и ее субъединиц / В.Н. Никандров [и др. ] // Достижения медицинской науки Беларуси, вып. V. Рецензир. научно-практ. ежегодник. Минск, БелЦНМИ, 2000. - С. 104-105.
13. Никандров, В.Н. Регуляторные белки: молекулярные аспекты биологического действия и неожиданные функциональные свойства их молекул / В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова // X съезд Белорусского общества физиологов. Тез. докл. Минск, Бизнес-офсет, 2001. - С. 113-114.
14. Никандров В.Н. Эндонуклеазная актив
15. ность субъединиц фактора роста нервов / В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова, В.С. Лукашевич // Достижения медицинской науки Беларуси", вып. VI. Рецензир. научно-практ. ежегодник, Минск,
16. БелЦНМИ, 2001. - С. 87.
17. Никандров, В.Н. Энзиматические свойства фактора роста нервов и его субъеди-
18. ниц / В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова // Труды Всероссийской конфер. "Проблемы медицинск. энзимологии" "Соврем. технологии лаборат. диагностики нового столетия" "Международ. симпоз. "Пиридоксальфосфат-зависимые ферменты:
19. структура, молекулярная патология и медицина"" М., 2002. - С. 163-164.
20. Никандров, В.Н. О полифункциональности белков регуляторного типа / В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова // Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем: Международная конференция: Пятый съезд Белорусского общественного объединения фотобиологов и биофизиков. Материалы докл. Минск, 2002. - Т-85.
21. Никандров, В.Н. Регуляторные белки: функциональные свойства молекул и механизмы их биологического действия / В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова // Известия НАН Беларуси. Серия мед.-биол наук. - 2003. - № 3. - С. 75-89.
22. Никандров, В.Н. Биотехнология клеток нервной ткани: проблема белковых трофических факторов / В.Н. Никандров [и др. ] // Перспективы и проблемы развития биотехнологии в рамках единого экономического пространства стран содружества. Матер. Междунар. научно-практ. конф., Минск, 2005. - С. 153-154.
23. Никандров, В.Н. Перицеллюлярный протеолиз в жизнедеятельности нервных клеток: влияние плазминогена и стрептокиназы на культуры нервной ткани / В.Н. Никандров // Научные труды I съезда физиологов СНГ. Т. 2. - Медицина-Здоровье, М., 2005 - С. 48.
24. Никандров, В.Н. Проблемы биотехнологии клеток нервной ткани: исследования белковых факторов трофического характера / В.Н. Никандров [и др. ] // Materials, methods and technology. Scientific articles 2007. Sci. Invest. LTD-branch Bourgas. Bulgaria, 2007. - Р. 48-66.
25. Никандров, В.Н. Значение плазминогена как фактора трофического характера для культур клеток нервной ткани / В.Н. Никандров [и др. ] // Известия НАН Беларуси. Серия мед. наук. - 2008. - № 1. - С. 85-97.
26. Никандров, В.Н. Протеиназная активность субъединиц белка-нейротрофина - фактора роста нервов / В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова // IV Российский симпозиум "Белки и пептиды". Тезисы докл. Казань, 2009. - С. 254.
27. Способ определения протеолитической
28. активности уили Р-субъединицы фактора роста нервов: пат. № 11953 Респ. Беларусь / В .Н. Никандров, Н.С. Пыжова; заявитель ГНУ "Институт физиологии НАН Беларуси" - № а 20061234; заявл.
29. 07.12.2006; опубл. 30.06.2009 // Афщыйны бюл. / Нац. цэнтр. штэлектуал.уласнасщ. -
30. Никандров, В.Н. Методы исследования протеолиза. Глава 5 / В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова // Современные проблемы биохимии. Методы исследований. Минск: Выш. шк., 2013. - С. 132-157.
31. Пыжова, Н.С. О возможности участия активных форм кислорода в расщеплении нуклеиновых кислот нуклеазами / Н.С. Пыжова, В.Н. Никандров // Новости медико-биол. наук. 2009. - № 4. - С. 57-62.
32. Никандров, В.Н. Обнаружение супероксидисмутазной активности у стрептокиназы / В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова, В.И. Вотяков, Ю.Е. Клингер // Доклады АН БССР. - 1986. -Т. 30, № 11. - С. 1033-1036.
33. Никандров, В.Н. Генерирование активных форм кислорода протеиназами и трипсиногеном в водно-солевых растворах / В.Н. Никандров, Ю.М. Судник, Н.С. Пыжова // Доклады АН Беларуси. - 1992.
34. Т. 36, № 11-12. - С. 1039-1044.
35. Буравский, В.А. Усовершенствованный метод выделения высокомолекулярной формы фактора роста нервов / В.А. Буравский [и др. ] // Известия АН БССР. Сер. биол. наук. - 1984. - № 4. - С. 79-84.
36. Пыжова, Н.С. Участие активных форм кислорода в процессах протеолиза: ... дис. канд. биол. наук: 03.00.04 / Н.С. Пыжова.
37. Минск, 1990.
38. Nikandrov, V.N. The oxygen-dependent pathway of human plasminogen activation / V.N. Nikandrov, N.S. Pyzhova // 18th FEBS Meeting. Abstracts. - Ljubljana, 1987. - Р. 84.
39. Никандров, В.Н. Кислородзависимый путь активации плазминогена и новые физико-химические механизмы протеолиза/ В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова // Известия НАН Беларуси, сер. мед.-биол. наук.
40. 2001. - № 1. С. 54-60.
41. Lukashevich, V. S. Subunit organization of the complex form of nerve growth factor / V.
42. S. Lukashevich, V. N. Nikandrov // Protein Sci. The Proc. Soc. Thirteenth Sympos..1999. - Vol. 8, suppl. 1, 301-S. - P. 121.
43. Никандров, В.Н. Влияние адениловых нуклеотидов на активаторную функцию стрептокиназы / В.Н. Никандров, Н.С. Пыжова, В.И. Вотяков // Бюл. экспер. биол. мед.. - 1987. - Т. 103, № 7. - С. 4951.
44. Пыжова, Н.С. Влияние биогенных фосфатов на расщепление белков протеиназами и функцию активаторов плазминогена/ Н.С. Пыжова, В.Н. Никандров // Биоорг. химия. - 2008. - Т. 34, № 3. - С. 382391.
45. Hasche, A. Binding of ATP to nerve growth factor: characterization and relevance for bioactivity / A. Hasche [et al.] // Neurochem. Internat. - 2010.Vol. 56. - P. 276-284.
46. Ferenz, K. B. ATP-NGF-complex, but not NGF, is the neuroprotective ligand / K. B. Ferenz, K. Rose, S. Konig, J. Krieglstein // Neurochem. Internat. - 2011.Vol. 59. - P. 989-995.
47. Пыжова, Н.С. Активация трипсиногена быка в присутствии активных форм кислорода / Н.С. Пыжова, В.Н. Никандров // Доклады АН БССР. - 1991. - Т. 35, № 12.
48. С. 1130-1133.
49. Пыжова, Н.С. Активация химотрипсиногена и пепсиногена под действием активных форм кислорода / Н.С. Пыжова, В.Н. Никандров // Доклады НАН Беларуси. - 2001. - Т. 45, № 3. - С. 67-70.
50. Rajah, R. 7S nerve growth factor is an insulin-like growth factor-binding protein protease / R. Rajah [et al] // Endocrinology. - 1996. - Vol. 137. - P. 2676-2682.
51. Rakowicz-Szulczynska, E. M. Nerve growth factor receptors in chromatin of melanoma cells, proliferating melanocytes, and colorectal carcinoma cells in vitro /E. M. RakowiczSzulczynska, M. Herlyn, H. Koprowski // Cancer Res. - 1988. - Vol. 48, No24 Pt 1. - P.7200-7206.
52. Andres, R. Y. Nerve growth factor receptors: identification of distinct classes in plasma membranes and nuclei of embryonic dorsal root neurons / R. Y. Andres, I. Jeng, R.A.
53. Bradshaw // Proc. Nati. Acad. Sci. USA . - 1977. - Vol. 74, No. 7. - P. 2785-2789.
54. Yankner, B. A. The biology and mechanism of action of nerve growth factor / B.A. Yankner, E. M. Shooter // Ann. Rev. Biochem. - 1982. - Vol. 51. - P. 845-868.
55. Underwood, C. K. The p75 neurotrophin receptor / C. K. Underwood, E. J. Coulson // Int. J. Biochem.& Cell Biol. - 2008. - Vol.
56. P. 1664-1668.
57. References
58. Kalyunov V.N. Faktor rosta nervnoy tkani [Nerve growth factor]. Nauka i tekhnika. Minsk, 1984, 216 p. (In Russian)
59. Sukmanskiy O.I. Biologicheski aktivnyye veshchestva slyunnykh zhelez [Biologically active substances of the salivary glands]. Zdorov'ya. Kiyev, 1991, 112 p. (In Russian)
60. Eibi J.K., Strasser B.C., Ross G.M. Structural, biological, and pharmacological strategies for the inhibition of nerve growth factor. Neurochemistry international. 2012. Vol. 61, pp. 1266-1275.
61. Isayev N.K., Stel'mashuk E.V., Genrikhs YE.YE. Rol' faktora rosta nervov v plasticheskikh perestroykakh kholinergicheskikh neyronov bazal'nykh yader perednego mozga [The role of nerve growth factor in plastic rearrangements of cholinergic neurons in the basal forebrain nuclei] Biokhimiya [Biochemistry]. 2017. T. 82, vyp. 3, pp. 429-440. (In Russian)
62. Hiramatsu M., Hatakeyama K., Kumegawa M., Minami N. Plasminogen activator activity in the subunits of mouse submandibular gland nerve-growth factor and epidermal growth factor. Arch. Oral Biol. 1982. Vol. 27, no 6, pp. 517-518.
63. Ebendal T. Function and evolution in the NGF family and its receptors. Res. 1992. Vol. 32. pp. 461-470.
64. Bax B., Blundell T.L., Murrey-Rust J., McDonald N.Q. Structure of mouse 7S NGF: a complex of nerve growth factor with four binding proteins. Structure. 1997. Vol. 5, no 10,pp. 1275-1285.
65. Stach R.W., Pignatti P.F., Baker M.E., Shooter M.E. The characterization of the asubunits of 7S nerve growth factor. J. Neurochem.1980. Vol. 34, no 4, pp. 850-855.
66. Orenstein N.S., Dvorak H.F., Blanchard M.H., Young M. Nerve growth factor: a protease that can activate plasminogen. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1978. Vol. 75, no 11,pp. 5497-5500.
67. Greene L.A., Shooter E.M., Varon S. Subunit interaction and enzymatic activity of mouse 7S nerve growth factor Biochemistry. 1969. Vol. 8, no 9,pp. 3735-3741. doi: 10.1021/bi00837a037.
68. Nikandrov V.N. et al. Functional properties of nerve growth factor molecule. 18 Intern. Congress of Biochem. Mol. Biol. Abstract Book. Birmingham, 2000, no 1152, pp. 317.
69. Nikandrov V.N., Pyzhova N.S., Lukashevich V.S., Lukashevich I.B., Agurkov A.V., Davydovskii A.G., Shpak G.A. Novye funktsional'nye svoistva molekuly faktora rosta nervov i ee sub"edinits [New functional properties of the nerve growth factor molecule and its subunits]. Dostizheniia meditsinskoi nauki Belarusi [Accomplishments of Medical Science in Belarus]. Ed. Gurmanchuk I. E. et.al. Minsk, 2000, iss. V, pp. 104105. (In Russian)
70. Nikandrov V.N., Pyzhova N.S. Reguliatornye belki: molekuliarnye aspekty biologicheskogo deistviia i neozhidannye funktsional'nye svoistva ikh molekul [Regulatory proteins: molecular aspects of biological action and unexpected functional properties of their molecules], X s"ezd Belorusskogo obshchestva fiziologov [X Congress of the Belarusian Society of Physiologists]. Ed. Kaliunov V.N. et.al. Minsk, 2001, pp. 113114. (In Russian)
71. Nikandrov V.N., Pyzhova N.S., Lukashevich V.S. Endonukleaznaia aktivnost' sub"edinits faktora rosta nervov [Endonuclease activity of nerve growth factor subunits]. Dostizheniia meditsinskoi nauki Belarusi [Accomplishments of Medical Science in Belarus]. Ed. Gurmanchuk I.E. et. al. Minsk, 2001,vol. VI, 87p. (In Russian)
72. Nikandrov V.N., Pyzhova, N.S Enzimaticheskie svoistva faktora rosta nervov i ego sub"edinits [Enzymatic properties of nerve growth factor and its subunits]. Problemy meditsinskoi enzimologii: trudy Vseros. konf. "Sovremennye tekhnologii laboratornoi diagnostic novogo stoletiia" i Mezhdunarod. simpoziuma "Piridoksal'zavisimye fermenty: struktura, molekuliarnaia patologiia i meditsina". Moscow, 2002, pp. 163-164. (In Russian)
73. Pyzhova N.S., Nikandrov, V.N. O polifunktsional'nosti belkov reguliatornogo tipa [On the polyfunctionality of regulatory proteins]. Molekuliarnye, membrannye i kletochnye osnovy funktsionirovaniia biosistem: Mezhdunar. nauch. konf [Molecular, membrane and cellular basis for the functioning of biosystems: Intern. scientific conf.]. Ed. Volotovskii I.D. et. al. Minsk, 2002. 85 p. (In Russian)
74. Nikandrov V.N., Pyzhova, N.S., Reguliatornye belki: funktsional'nye svoistva molekul i mekhanizmy ikh biologicheskogo deistviia [Regulatory proteins: functional properties of molecules and mechanisms of their biological action]. Vestsi Natsyianal'nai akademii navuk Belarusi. Seryia medykabiialagichnykh navuk [Proceedings of the National Academy of Sciences of Belarus. Medical-biological series, 2003, no. 3, pp. 75-89 (In Russian)
75. Nikandrov V.N., Gronskaia R.I., Zhuk O.N., Lukashevich I.B., Polukoshko E.F., Petrusenko G.P., Pyzhova N.S. Biotekhnologiia kletok nervnoi tkani: problema belkovykh troficheskikh faktorov [Biotechnology of nervous tissue cells: the problem of protein trophic factors]. Perspektivy i problemy razvitiia biotekhnologii v ramkakh edinogo ekonomicheskogo prostranstva stran sodruzhestva : mat. Mezhdunarodnoi nauch.prakt. konf., 25-28 maia 2005 g., MinskNaroch' Ed. A.N. Evtushenkova. Minsk, National Institute For Higher Education Publ, 2005,pp.160-161
76. Nikandrov V.N. Peritselliuliarnyi proteoliz v zhiznedeiatel'nosti nervnykh kletok: vliianie plazminogena i streptokinazy na kul'tury nervnoi tkani. [Pericellular proteolysis in the vital activity of nerve cells: the effect of plasminogen and streptokinase on nerve tissue cultures]. Nauchnye trudy I s"ezda fiziologov SNG, Sochi, Dagomys, 19-23 sentiabria 2005 g.Moskow, Medicine Publi., 2005, V. 1. 48 p.
77. Nikandrov V.N., Zhuk O.N., Gronskaia R.I., Polukoshko E.F., Pyzhova N.S., Petrusenko G.P., Romanovskaia A.A. Problemy biotekhnologii kletok nervnoi tkani: issledovaniia belkovykh faktorov troficheskogo kharaktera [Problems of Biotechnology of Nervous Tissue Cells: Studies of Protein Factors of a
78. Trophic Character]. Materials, Methods and Technologies. Bulgaria, 2007, pp. 48-66.
79. Nikandrov V.N., Zhuk O.N., Pyzhova N.S., Gronskaia, R.I., Polukoshko E.F., Romanovskaia A.A. Znachenie plazminogena kak faktora troficheskogo kharaktera dlia kul'tur kletok nervnoi tkani [The Significance of Plasminogen as a Trophic Factor for Nervous Tissue Cell Cultures]. Vestsi Natsyianal'nai akademii navuk Belarusi. Seryia medytsynskikh navuk [Proceedings of the National Academy of Sciences of Belarus, medical series], 2008, no. 1, pp. 85-97. (In Russian)
80. Nikandrov V.N., Pyzhova N.S. Proteinaznaia aktivnost' sub"edinits belka-neirotrofina - faktora rosta nervov [Proteinase activity of subunits of neurotrophin protein - nerve growth factor]. Belki i peptidy: IV Rossiiskii simpozium. Kazan', 2009, 254 p. (In Russian)
81. Nikandrov V.N., Pyzhova N.S. Sposob opredeleniia proteoliticheskoi aktivnosti yili fisub"edinitsy faktora rosta nervov [Method for determining the proteolytic activity of the yor P-subunit of nerve growth factor]. Pat. BY no. 11953 S1, a 20061234, 2009, 3 p. (In Russian)