Таблица 2. Изменения активности ферментов антиоксидантной защиты печени крыс при ее ишемии-реперфузии (Ме(р0,25/р0,75))
|
Период |
Время, мин. |
К-КАТ ммоль/(л*мин*г белка) |
КАТ, ммоль/(л*мин*г белка) |
К-СОД, отн.ед./г белка |
СОД, отн.ед./г белка |
|
|
Ишемия |
5 |
2,71 |
2,52 |
12,5 |
10,7* |
|
|
(2,35/2,90) |
(2,30/2,78) |
(11,8/12,8) |
(10,2/11,1) |
|||
|
10 |
2,17* |
2,00 |
11,6 |
9,0** |
||
|
(2,02/2,42) |
(1,79/2,20) |
(11,4/12,0) |
(8,4/9,6) |
|||
|
15 |
1,88 |
2,39 |
12,0 |
9,7* |
||
|
(1,60/2,03) |
(2,00/2,48) |
(11,7/12,4) |
(9,2/10,0) |
|||
|
20 |
1,88 |
1,72* |
11,8 |
9,1* |
||
|
(1,59/2,02) |
(1,54/1,95) |
(11,5/12,3) |
(8,8/9,4) |
|||
|
Реперфузия |
5 |
2,31 |
1,41** |
11,7 |
12,4* |
|
|
(2,01/2,56) |
(1,23/1,59) |
(11,3/12,1) |
(11,7/12,8) |
|||
|
10 |
2,17 |
1,61* |
11,8 |
11,8 |
||
|
(2,00/2,41) |
(1,43/1,72) |
(11,5/12,1) |
(11,5/12,2) |
|||
|
15 |
1,83* |
0,80** |
12,0 |
12,2 |
||
|
(1,60/1,97) |
(0,73/1,05) |
(11,6/12,3) |
(11,8/12,5) |
|||
|
20 |
1,94 |
1,23* |
11,5 |
8,5** |
||
|
(1,64/2,10) |
(0,95/1,36) |
(11,3/11,9) |
(8,0/9,0) |
Примечание: * -- статистически значимые отличия (р < 0,05) от соответствующего показателя контрольной группы; " -- статистически значимые отличия (р < 0,05) между двумя показателями, определенными с 5-минутным интервалом ишемии-реперфузии.
Обозначения: КАТ, СОД -- активность ферментов крыс опытных групп; К-КАТ, К-СОД -- активность ферментов контрольных групп.
Исследование общей антиоксидантной активности гомогената печени контрольных животных показало сохранение ее в течение всего эксперимента на уровне 0,08--0,10 мг/л витамина С (принятого за стандарт) в пересчете на 1 грамм белка гомогената. В ишемически-ре- перфузионный период общая антиоксидантная активность снижается уже к 5-й минуте ишемии в 2 раза и сохраняется на уровне 0,04--0,05 мг/л витамина С в пересчете на 1 грамм белка гомогената в течение всего эксперимента. В момент реперфузии можно было бы ожидать существенных изменений, однако вероятно, что усиление в этот период свободнорадикальных процессов уравновешивалось снабжением антиоксидантами из крови.
Заключение
патологический экспериментальный печень
Полученные результаты подробно описывают изменения активности ферментов первых линий антиоксидантной защиты и общей антиоксидантной активности на системном и органном уровнях в течение 20 минут ишемического повреждения печени и в ранний реперфузионный период.
20-минутное пережатие ПДС с целью выключения печени из системного кровотока при оперативных вмешательствах или прекращение кровоснабжения данного органа вследствие других причин в течение 20--30 минут являются наиболее актуальными временными промежутками изучения фундаментальных и клинических аспектов ишемически-реперфузионного повреждения печени. В это время орган сохраняет жизнеспособность, и еще возможно его сохранение при восстановлении кровотока, а путем метаболического воздействия на наиболее чувствительные звенья патогенеза возможно предотвращение развития печеночной недостаточности в поздние сроки реперфузии.
Результаты настоящего исследования показали роль изменений активности каталазы и супероксиддисмутазы крови и печени в течение рассматриваемого патологического процесса. Так, показано развитие дисбаланса соотношения активности КАТ/СОД при развитии ишемически-реперфузионного синдрома со сдвигом данного соотношения в сторону преобладания каталазной активности на системном и супер- оксиддисмутазной на органном уровнях после восстановления кровотока. Кроме того, отмечается увеличение активности исследуемых ферментов эритроцитарной взвеси, особенно в ишемический период, и тенденции к прогрессирующему снижению активности этих же ферментов в ткани печени. Это указывает на возможность оценки функционального состояния системы окислительно-восстановительного гомеостаза животного при ишемически-реперфузионном повреждении печени, а вместе со сниженной общей антиоксидантной активностью показывает необходимость метаболической поддержки данного звена системы неспецифической резистентности.
Финансирование исследования
Работа выполнена при поддержке государственного задания Министерства здравоохранения Российской Федерации (от 28.01.2015 г. ч. 1, раздел 1) «Осуществление прикладных научных исследований, в том числе проведение доклинических исследований лекарственных средств и клинических исследований лекарственных препаратов».
Библиографический список
1.Donadon M., Molinari A.F., Corazzi F., Rocchi L., Zito P., Cimino M., Costa G., Raimondi F., Torzilli G. Pharmacological modulation of ischemic-reperfusion injury during Pringle maneuver in hepatic surgery. A prospective randomized pilot study // World Journal of Surgery. 2016. V. 40. № 9. P. 2202--2212.
2.Guan L.-Y, Fu P.-Y, Li P.-D, Liu H.-Y, Xin M.-G., Li W. Mechanisms of hepatic ischemia-reperfusion injury and protective effects of nitric oxide // World Journal of Gastrointestinal Surgery. 2014. V. 6. № 7. P. 122--128.
3.Ходосовский М.Н. Коррекция окислительных повреждений при синдроме ишемии-реперфузии печени // Журн. ГрГМУ. 2016. № 4. С. 20--25.
4.Басов А.А., Быков И.М. Изменение антиоксидантного потенциала крови экспериментальных животных при нутриционной коррекции окислительного стресса // Вопросы питания. 2013. № 6. С. 75--81.
5.Басов А.А., Быков И.М. Сравнительная характеристика антиоксидантного потенциала и энергетической ценности некоторых пищевых продуктов // Вопросы питания. 2013. № 3. С. 77--80.
6.Bykov M.I., Basov A.A. Change of parameters in prooxidant-antioxidant bile system in patients with the obstruction of bile-excreting ducts // Medical news of North Caucasus. 2015. V. 10 (2). P. 131--135.
7.Li J., Li R.J., Lv G.Y., Liu H.Q. The mechanisms and strategies to protect from hepatic ischemiareperfusion injury // European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 2015. V. 19. № 11. P. 2036--2047.
8.Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии. Справочник. СПб.: Интермедика, 2002. 600 с.
9.Костюк В.А., Потапович А.И., Ковалева Ж.И. Простой и чувствительный метод определения суперок- сиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцитина // Вопросы медицинской химии. 1990. № 2. С. 88--91.
10.Benzie I.F.F., Strain J.J. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of “antioxidant power”: the FRAP assay // Anal. Biochem. 1996. V. 239. № 1. P. 70--76.
11.Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Anal. Biochem. 1976. V. 72. P. 248--254.