У животных были проанализированы их габитус, морфологические, биохимические показатели крови и общий анализ мочи, результаты рентгенологического, ультразвукового исследования в 1-й и 10-й день эксперимента. На 10-й день после операции у животных проводили забор почек для патологоанатомического исследования.
Методы. В крови определяли: количество эритроцитов и лейкоцитов - счётчиком форменных элементов крови «Пикоскель ПС-4М», гемоглобин - гемоглобинометром «Мини ГЕМ-540», гематокрит - общепринятыми методами, скорость оседания эритроцитов (СОЭ) - по Панченкову, лейкоцитарную формулу - счётчиком лабораторным СЛ-1 (мазки окрашивали по Романовскому-Гимза). В сыворотке крови оценивали биохимические показатели: общий билирубин - методом Ендрашика-Грофа, сахар - глюкозооксидазным методом, аланинаминотрансферазу (АлАТ) и аспартатаминотрансферазу (АсАТ) - унифицированным методом Райтмана-Френкеля, калий - нефелометрическим методом без депротеинизации и натрий - колориметрическим, альфа-амилазу - унифицированным методом Каравея, мочевину - уреазным фенол-гипохлоритным методом, креатинин - методом Яффе с депротеинизацией, общий белок - биуретовым методом. При общем анализе мочи учитывали цвет, прозрачность, удельный вес (рефрактометр), рН (индикаторные бумажки); белок, эритроциты, лейкоциты, мочевой осадок с помощью центрифугирования и микроскопии. Для рентгенологического исследования использовали аппарат 12П5, контрастное вещество урографин 76%. Ультразвуковое исследование почек проводили на аппарате эхотомоскоп «РАСКАН» ЭТФ-Д-05П. Гистологическое исследование почки с фиксацией в 10% растворе нейтрального формалина. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином по Гроту, по Ван Гизону и Вейгерта.
Цифровой материал обрабатывали статистически с использованием программ Mikrosoft Offise - Mikrosoft Word и Mikrosoft Excel с вычислением среднего арифметического, средней ошибки и вычисления вероятности (Р) с использованием критерия Стьюдента.
Собственные исследования
1. Клинико-гематологический анализ кошек.
Обследование (термометрия, измерение частоты дыхания и пульса) животных контрольной и опытной групп проводили до развития экспериментальной почечной патологии и после неё. В 1-й день обследования изменений не наблюдалось. На 10-й день у животных опытной группы наблюдалось общее угнетение, снижением аппетита. При пальпации брюшной полости в области почек наблюдалось беспокойство животных, увеличение размеров почки с левой стороны.
Нами был проведен анализ клинического, биохимического исследования крови и анализ мочи животных контрольной и опытной групп на 1-й и 10-й дни эксперимента. В работе использовали нормативы по Кондрахину И.П. (2004).
Из данных таблицы 1 следует, что гематологические показатели у животных контрольной и опытной группы в 1-й день эксперимента находились на одинаковом уровне.
На 10-е сутки концентрация гемоглобина, гематокрита, эозинофилов, сегментоядерных нейтрофилов у кошек обеих групп не имела статистически достоверных различий. Содержание эритроцитов у животных контрольной и опытной групп было меньше нижнего нормативного показателя на 11% и 15 % соответственно. Содержание лейкоцитов ниже на 19% у животных опытной группы по сравнению с контрольной и меньше на 7% по сравнению с нормой. У животных опытной группы снизилось количество лимфоцитов на 11% по сравнению с контрольными и на 23% - по сравнению с нормой. Наблюдалось увеличение уровня моноцитов и СОЭ по сравнению с контролем на 29% и по сравнению с верхней границей нормы на 27%.
Таблица 1 - Клинический анализ крови кошек (n=16), (X±sx)
|
Показатель |
1-й день |
10-й день |
Норма |
|||
|
Контрольная группа |
Опытная группа |
Контрольная группа |
Опытная группа |
|||
|
Эритроциты, х10№І/л |
4,45+0,03 |
4,47+0,04 |
4,49+0,04 |
4,27+0,33* |
5,0-10,7 |
|
|
Гемоглобин, г/л |
101,70+0,38 |
99,63+7,06 |
115,4+0,04 |
103,88+12,3 |
100-140 |
|
|
Гематокрит, % |
41,50+0,33 |
41,80+0,78 |
39,57+0,52 |
40,6+0,08 |
35-45 |
|
|
Лейкоциты, х109/л |
7,97+0,31 |
7,75+0,26 |
10,05+0,11 |
8,26+0,04* |
10-15 |
|
|
Базофилы, % |
0 |
0 |
0 |
0 |
0-2 |
|
|
Эозинофилы, % |
4,14+0,51 |
3,02+0,04 |
4,21+0,22 |
3,97+0,02 |
2-6 |
|
|
Палочкояд. нейтроф, % |
3,82+0,24 |
4,08+0,19 |
3,70+0,18 |
4,41+0,18* |
3-9 |
|
|
Сегментояд. нейтроф, % |
55,65+0,95 |
55,31+0,99 |
50,82+0,30 |
52,87+1,24 |
40-45 |
|
|
Лимфоциты, % |
23,85+1,89 |
24,50+0,66 |
27,01+0,59 |
24,50+0,98* |
36-51 |
|
|
Моноциты,% |
4,57+0,16 |
5,34+0,18 |
4,21+0,15 |
5,99+0,14* |
1-5 |
|
|
СОЭ, мм/ч |
8,40+0,43 |
8,35+0,26 |
5,60+0,22 |
9,38+0,20* |
7-9 |
*P <0,05 -P <0,001 - различия между животными опытной и контрольной гр.
Таким образом, развитие экспериментальной почечной патологии повлияло на морфологию крови, особенно на количество лейкоцитов, палочкоядерных нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов. Существенно повысилась СОЭ, что возможно связано с воспалительным процессом в организме. Данные показатели имеют существенные различия по сравнению с дооперационным периодом, тем не менее, полученные нами данные явным образом не свидетельствуют о почечной патологии.
2. Результаты биохимического анализа крови кошек. В первый день эксперимента биохимические показатели крови кошек разных групп были в пределах нормы. Данные таблицы 2 показывают, что на 10-й день у кошек опытной группы уровень глюкозы был ниже на 26% по сравнению с контрольной, но оставался в пределах нормы. Содержание щелочной фосфатазы у них было достоверно выше, как в сравнении с контрольной группой, так и с показателями нормы (на 43% и 13% соответственно).
Таблица 2 - Биохимические показатели крови кошек (n=16), (X±sx)
|
Показатель |
1-й день |
10-й день |
Норма |
|||
|
Контрольная группа |
Опытная группа |
Контрольная группа |
Опытная группа |
|||
|
Билирубин общий, мкмоль |
6,68±0,16 |
7,00+0,54 |
5,60+0,19 |
5,40+0,26 |
2-8 |
|
|
Глюкоза, ммоль/л |
5,06+0,15 |
4,88+0,10 |
4,84+0,25 |
3,59+0,09* |
3,4-6,9 |
|
|
Щел. фосфатаза, ммоль/ч.л |
64,75+1,86 |
66,40+1,49 |
63,28+5,59 |
73,60+1,46 |
12-65 |
|
|
АсАТ, ммоль/ч.л. |
38,87+1,75 |
39,85+1,93 |
35,20+0,98 |
47,0+1,72* |
9-39 |
|
|
АлАТ, ммоль/ч.л. |
49,92+2,17 |
51,80+2,76 |
45,20+2,04 |
41,33+1,34 |
8-52 |
|
|
Калий сыворотки, ммоль/л |
4,82+0,06 |
4,91+0,31 |
4,70+0,06 |
4,85+0,05* |
3,8-5,3 |
|
|
Натрий сыв-ки, ммоль/л |
141,95+0,23 |
143,30+0,69 |
144,85+0,15 |
148,40+0,52* |
146-158 |
|
|
Амилаза, ммоль/ч.л. |
920,0+5,39 |
909,0+4,8 |
1024,0+13,2 |
1095,50+1,81 |
371-1192 |
|
|
Мочевина, ммоль/л |
8,52+0,20 |
9,16+0,16 |
8,12+0,09 |
11,42+0,18* |
5-11 |
|
|
Креатинин, ммоль/л |
0,15+0 |
0,15+0 |
0,14+0,01 |
0,16+0,02* |
0,04-0,15 |
|
|
Общий белок, г/л |
63,45+1,69 |
61,41+1,90 |
62,16+1,45 |
65,76+1,02 |
55-80 |
|
|
ЛДГ, ед/л |
236,60+2,97 |
240,20+3,63 |
240,0+0,14 |
243,60+2,59 |
32-225 |
*P <0,05 -P <0,001 - различия между животными опытной и контрольной гр.
Уровень АсАТ у животных опытной группы был на 38% выше контрольной и на 20% выше нормативных величин. Показатель натрия сыворотки был на 3% выше контрольной группы. Содержание мочевины и креатинина у кошек опытной группы было больше на 28% и 13% соответственно по сравнению с контрольной, но в пределах нормы. Уровень ЛДГ у животных обеих групп на 6% превышал верхнюю границу нормы. У животных опытной группы достоверно повысились уровни: ЩФ - на 10%, АсАТ - на 16%, натрия - на 4%, амилазы - на 17%, мочевины - на 20%, креатинина и общего белка - на 7% по сравнению с началом опыта.
В то же время отмечалось достоверное снижение содержания билирубина на 23%, глюкозы на 27%, АлАТ на 11% на 10-й день по сравнению с 1-м днём, тем не менее, показатели оставались в пределах нормы.
Таким образом, по результатам биохимических исследований можно сделать вывод, что внутренняя патология, не затрагивает такие органы как печень, поджелудочная железа, т.к. специфичные показатели крови, свидетельствующие об их заболевании, такие как: билирубин, щелочная фосфатаза, амилаза находились в пределах нормы или близко к ним. Совокупность биохимических показателей крови почечного профиля свидетельствует о наличии в организме кошек почечной недостаточности. Для подтверждения данного предположения нами был выполнен анализ мочи.
3. Результаты анализа мочи кошек
Органолептические показатели мочи кошек в начале опыта: цвет мочи варьировал от соломенно-желтого до желтого; прозрачность - от прозрачной до мутноватой. У кошек в 1-й день относительная плотность, кислотность мочи и количество лейкоцитов были в пределах нормы. Количество эритроцитов и клеток плоского эпителия приближались к физиологическим показателям. Следует отметить, что содержание белка, эпителия почечного и полиморфного было несколько выше данных нормы. Отмечалось наличие солей уратов и оксалатов.
Из данных таблицы 3 следует, у животных контрольной и опытной групп на 10-й день относительная плотность и рН мочи были в пределах физиологических показателей, но у животных опытной группы эти показатели были несколько выше по сравнению с контрольной.
Уровень белка в моче у кошек опытной группы по сравнению с контрольной был выше на 23%. Несмотря на понижение содержания эритроцитов на 18%, показатель находился в пределах физиологической нормы. В опытной группе регистрировалось большее количество плоского и почечного эпителия - на 33% и 28% соответственно. В моче у животных при экспериментальной патологии появились зернистые цилиндры.
Таким образом, следует, что у животных опытной группы некоторые показатели мочи (белок, цилиндры, эпителий почечный, плоский, полиморфный) превышают нормативные показатели. Это свидетельствует о развитии патологии в мочевыделительной системе. Наличие эпителия почечного и зернистых цилиндров говорит о патологии в почках, при этом нет показателей поражения мочевыводящей системы (лоханки, мочеточников, уретры).
Таблица 3 - Общий анализ мочи (n=16), (X±sx)
|
Показатель |
1-й день |
10-й день |
Норма |
|||
|
Контрольная группа |
Опытная группа |
Контрольная группа |
Опытная группа |
|||
|
Относительная плотность, г/л |
1,02+0,05 |
1,02+0,05 |
1,02+0,10 |
1,03+0,09* |
1,020-1,040 |
|
|
Реакция (рН) |
6,21+0,13 |
6,25+0,10 |
6,31+0,13 |
6,57+0,08* |
6,0-6,5 |
|
|
Белок, х10і /л |
0,04+0,10 |
0,08+0,10 |
0,09+0,05 |
0,39+0,04* |
0 |
|
|
Эритроциты, клеток в поле зрения |
2,40+0,09 |
4,0+0,12 |
2,12+0,04 |
2,0+0,06 |
единичные |
|
|
Лейкоциты, клеток в поле зрения |
3,60+0,52 |
3,80+0,21 |
3,60+0,17 |
3,50+0,12 |
единичные |
|
|
Эпителий почечный, клеток в поле зрения |
1,20+0,15 |
1,50+0,30 |
1,30+0,06 |
4,50+0,03* |
следы |
|
|
Эпителий полиморфный, клеток в поле зрения |
2,80+0,04 |
3,0+0,12 |
2,60+0,24 |
2,66+0,10 |
следы |
|
|
Эпителий плоский, клеток в поле зрения |
2,50+0,10 |
3,66+0,04 |
4,0+0,06 |
5,33+0,08* |
0-3 |
|
|
Цилиндры зернистые, клеток в поле зрения |
- |
- |
- |
0,13+0,01 |
0 |
|
|
Соли |
++ |
++ |
++ |
++ |
0 |
*P <0,05 -P <0,001 - различия между животными опытной и контрольной гр.
4. Результаты ультразвукового исследования
Данные ультразвукового исследования левой и правой почек у животных контрольной и опытной группы в 1-й день эксперимента: орган визуализировался, расположение было типичное, форма бобовидная. Размеры почек контрольной и опытной групп различий не имели и составляли в среднем 38,0х21,0х29,0 мм, эхогенность структур почек была без изменений.