Министерство высшего образования РФ
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ
ЯДЕРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ «МИФИ» (НИЯУ МИФИ)
ОБНИНСКИЙ ИНСТИТУТ АТОМНОЙ ЭНЕРГЕТИКИ
(ИАТЭ)
Кафедра биологии (ОБТ)
Отчет на тему:
«Оценка чувствительности ветвистоусых рачков Daphnia magna Straus к действию солей тяжелых металлов различных концентраций.»
Выполнил:
Студент
Оглавление
Введение. 2
Характеристика тест-объекта. 4
Цель и задачи исследования. 5
Методы. 6
Ход эксперимента. 6
Результаты исследования 7
Вывод. 11
Загрязнение водной среды, наряду с дефицитом пресной воды, является глобальной экологической проблемой. В водоемах увеличивается содержание веществ антропогенного происхождения, токсичность которых для большинства водных организмов проявляется уже в малых концентрациях. Наибольшую экологическую опасность представляют тяжелые металлы (ТМ). Установлено, что даже эссенциальные металлы, такие как медь, никель, цинк, кобальт при накоплении в водной среде являются потенциальной угрозой для живых систем. Известно, что они способны нарушать целостность физиологических и биохимических процессов, вызывать серьезные изменения в метаболических реакциях у гидробионтов.
Не менее значимой экологической проблемой для пресных водоемов является засоление, в частности, увеличение содержания хлоридов и сульфатов натрия, калия и кальция. Засоление может быть обусловлено иссушением водоемов, вымыванием солей из почв, сбросом сточных вод промышленных предприятий, содержащих минеральные соли. Соленость является серьезным экологическим стрессом для гидробионтов, который приводит к утрате биоразнообразия пресноводных экологических сообществ.
Основой пищевых цепей в пресных водоемах является фито- и зоопланктон. Фитопланктон продуцирует кислород, питательные вещества, преобразует солнечную энергию в форму, доступную для организмов более высоких трофических уровней.
Повышение содержания ТМ и увеличение солености в пресноводных экосистемах – это важные факторы, влияющие на жизнеспособность фито- и зоопланктона, определяющих продуктивность водоемов. В связи с этим актуальной задачей факториальной экологии является определение пределов толерантности водных организмов к воздействию ТМ в условиях хлоридного и сульфатного засоления водоемов.
Род Daphnia включает 50 видов и имеет повсеместное распространение. В пресных водоемах нашей области широко распространены 5 видов дафний.
Рачки вида Daphnia magna имеют более крупные размеры и их применение в токсикологических экспериментах предпочтительнее. Они обитают в стоячий водоемах и слабопроточных водах, особенно часто во временных пересыхающих водоемах, лужах. На территории нашей страны распространены повсеместно, кроме Заполярья и Дальнего Востока. Являются типичными мезосапробами, переносят осоление до 6%.
Короткий биологический цикл развития позволяет проследить рост и развитие дафний на всех жизненных стадиях. В течение жизни дафнии выделяют ряд стадий, сопровождающихся линьками: первые 3 следуют через 20-24-36 часов, четвертая – созревание яиц в яичнике и пятая – откладка яиц в выводковую камеру следуют с интервалами 1 -1,5 суток. Начиная с шестой стадии, каждая линька сопровождается откладыванием яиц. Растет дафния наиболее интенсивно в первые дни после рождения, после наступления половозрелости рост замедляется. Новорожденная молодь имеет размеры 0,7-0,9 мм в длину, к моменту половозрелости самки достигают 2,2 – 2,4 мм, а самцы – 2,0 – 2,1 мм. Максимальная длина тела самок может достигать 6,0 мм.
При благоприятных условиях и в лаборатории дафнии большую часть года размножаются без оплодотворения – партеногенетически, производят потомство, состоящее из самок. При недостатке пищи, перенаселении, изменении температурных условий и уменьшения светового дня в популяции дафний появляются самцы, и дафнии переходят к половому размножению, откладывая после оплодотворения «зимние яйца» (1-2) в эфиппиум, образованный из части створок раковины самок.
Период созревания рачков при оптимальной температуре 20-220С с хорошим питанием – 5 -8 дней. Длительность эмбрионального развития обычно 3-4 дня, а при повышении температуры до 25-46 часов. По истечении этого времени происходит вымет молоди. Партеногенетические поколения следуют одно за другим каждые 3-4 дня. Формирование яиц в кладке прекращается за 2-3 дня до смерти. В природе дафнии живут в среднем 20-25 дней, а в лаборатории при оптимальном режиме 3-4 месяца и более. При температурах свыше 250С продолжительность жизни дафний может сократиться до 25 дней.
Источником питания дафний в природных водоемах являются бактерии, одноклеточные водоросли, детрит, растворенные органические вещества. Интенсивность потребления корма зависит от его характера, концентрации в среде, температуры и возраста рачков. Процесс питания дафний непосредственно связан с движением грудных ножек, направляющих ток воды во внутрь раковины. Пищевые частицы, отфильтрованные на «сите», поступают в продольный желоб и передаются ко рту рачка.
Функции грудных ножек связаны с процессами дыхания. В жабрах (овальные выросты ножек) происходит газообмен. Дафния устойчива к изменению кислородного режима (от 2 мг О2/л), что связано со способностью синтезировать гемоглобин. В условиях пониженной концентрации растворенного кислорода дафнии приобретают красноватый цвет, а при благоприятных условиях – розовато-желтый цвет.
Целью работы является оценка влияний солей тяжелых металлов различных концентраций на двигательную активность и физиологические показатели ветвистоусых рачков вида Daphnia magna Straus.
Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:
Оценить влияние солей тяжелых металлов Pb2+ и Cd2+ с концентрациями 0,1; 1 и 10 ПДК на выживаемость ветвистоусых рачков вида Daphnia magna Straus.
Оценить влияние солей тяжелых металлов Pb2+ и Cd2+ с концентрациями 0,1; 1 и 10 ПДК на жизнеспособность ветвистоусых рачков вида Daphnia magna Straus.
Для проведения эксперимента использовались:
Живые организмы: ветвистоусые рачки вида Daphnia magna Straus.
Реактивы, посуда, приборы:
Растворы солей ТМ в концентрации 0,1; 1 и 10 ПДК
Бинокуляр
Микроскоп
Стаканы объемом 100 мл
Чаши Петри
Изучение влияния солей тяжелых металлов на организм производилось с помощью 2 критериев: а) выживаемость; б) двигательная активность. В процессе подготовки к эксперименту были приготовлены раствор солей тяжелых металлов в концентрациях 0,1; 1 и 10 ПДК, разлиты по стаканы по 100 мл раствора. В стаканы высаживались по 5 дафний. В оставшихся изучалось сочетание солей и контроль в 100 мл отстоянной воды.
Наблюдения за выживаемостью дафний проводились в течение одного часа, показатели фиксировались через каждые 10 минут.
Время гибели рачков отмечалось по наступлению иммобилизации: дафнии лежат на дне стакана, плавательные движения отсутствуют и не возобновляются при покачивании стакана. Данные выживаемости рачков записывались в таблицу.
В качестве дополнительных показателей у дафнии учитывалась двигательная активность.
Под микроскопом была рассмотрена взрослая особь, спустя 10 минут нахождения в концентрациях ПДК. Двигательная активность измерялась по общим закономерностям. Полученные результаты в растворах солей ТМ сравнивались с результатами дафний из контроля.
Эксперимент проводился в двух повторениях и все данные и результаты представлены в таблицах и графиках.
Повторность №1
Таблица №1. Выживаемость ветвистоусых рачков вида Daphnia magna Straus в растворах солей различных концентраций.
Растворы Время |
Pd2+ 0,1 |
Pd2+ 1 |
Pd2+ 10 |
Cd2+ 0,1 |
Cd2+ 1 |
Cd2+ 10 |
Контроль |
10 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
20 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
4/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
30 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
4/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
40 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
4/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
50 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
3/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
60 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
3/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
Таблица №2. Двигательная активность ветвистоусых рачков вида Daphnia magna Straus за 30 секунд в растворах солей различных концентраций.
Растворы Время |
Pd2+ 0,1 |
Pd2+ 1 |
Pd2+ 10 |
Cd2+ 0,1 |
Cd2+ 1 |
Cd2+ 10 |
Контроль |
10 минут |
26 |
45 |
45 |
30 |
44 |
49 |
65 |
20 минут |
40 |
51 |
50 |
49 |
42 |
56 |
68 |
30 минут |
58 |
56 |
44 |
38 |
49 |
46 |
63 |
40 минут |
39 |
39 |
35 |
31 |
33 |
39 |
65 |
50 минут |
34 |
34 |
33 |
30 |
30 |
35 |
64 |
60 минут |
30 |
29 |
28 |
26 |
26 |
31 |
64 |
График №1. Выживаемость ветвистоусых рачков вида Daphnia magna Straus в растворах солей различных концентраций.
График
№2. Двигательная активность ветвистоусых
рачков вида Daphnia magna Straus за 30 секунд в
растворах солей различных концентраций.
Повторность №2.
Таблица №3. Выживаемость ветвистоусых рачков вида Daphnia magna Straus в растворах солей различных концентраций.
Растворы Время |
Pd2+ 0,1 |
Pd2+ 1 |
Pd2+ 10 |
Cd2+ 0,1 |
Cd2+ 1 |
Cd2+ 10 |
Контроль |
10 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
20 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
30 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
40 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
50 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
60 минут |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
Таблица №2. Двигательная активность ветвистоусых рачков вида Daphnia magna Straus за 30 секунд в растворах солей различных концентраций.
Растворы Время |
Pd2+ 0,1 |
Pd2+ 1 |
Pd2+ 10 |
Cd2+ 0,1 |
Cd2+ 1 |
Cd2+ 10 |
Контроль |
10 минут |
55 |
55 |
56 |
40 |
31 |
33 |
65 |
20 минут |
48 |
43 |
58 |
34 |
29 |
33 |
67 |
30 минут |
42 |
38 |
37 |
45 |
40 |
24 |
62 |
40 минут |
49 |
38 |
27 |
26 |
21 |
34 |
66 |
50 минут |
35 |
40 |
25 |
26 |
29 |
28 |
64 |
60 минут |
28 |
30 |
17 |
41 |
40 |
26 |
65 |