Статья: Влияние условии выращивания на показатели крови осетров

Влияние условии выращивания на показатели крови осетров

Оксана Александровна Гуркинат, Оксана Николаевна Руднева2, Марина Евгеньевна Рубанова3, Юлия Владимировна Бульина4

Аннотация

В статье описываются результаты выращивания ленского осетра в садках и УЗВ. Приводятся данные по исследованию биохимии и гематологических показателей сыворотки крови. Оптимальные значения биохимических показателей сыворотки крови были получены от особей, содержащихся в установках замкнутого водоснабжения. Значения гематологических показателей сыворотки крови первой группы ленского осетра более высокие за счет интенсивного роста. У изученных особей число микроцитов в эритроцитах было незначительным (от 0 до 0,1 %), что свидетельствует об отсутствии генетических нарушений у осетров первой и второй групп. Кроме того, такие невысокие показатели наличия микроядер подтверждают отсутствие инвазий у рыбы как в установках замкнутого водоснабжения, так и в садках. ленский осетр сыворотка крови

Ключевые слова: ленский осетр, садки, установки замкнутого водоснабжения, показатели крови, форменные элементы, микроядра

INFLUENCE OF CULTIVATION CONDITIONS ON STURGEON BLOOD PARAMETERS Oksana A. Gurkinam, Oksana N. Rudneva2, Marina E. Rubanova3, Yulia V. Bulina4

Abstract. The article describes the results of growing Lena sturgeon in cages and UZV. Data on biochemistry and hematological parameters of blood serum are presented. Optimal serum biochemical values were obtained from individuals contained in closed water supply facilities. Hematological values of blood serum of the first group of Lena sturgeon are higher due to intensive growth. In the individuals we studied, the number of microcytes in red blood cells was insignificant (from 0 to 0.1%), which indicates the absence of genetic disorders in sturgeons of the first and second groups. In addition, such low indicators of the presence of microkernels confirm the absence of invasions in fish, both in closed water supply plants and in cages.

Keywords: Lena sturgeon, cages, closed water supply installations, blood parameters, shaped elements, micronuclei

Введение

Россия издавна обеспечивала осетриной и черной икрой как внутренний, так и внешний рынки, однако, в связи с ухудшением экологической обстановки, антропогенного влияния и браконьерства осетровые оказались на грани исчезновения, поэтому в настоящее время пристальное внимание уделяется выращиванию этих редких видов рыб в индустриальных условиях и выпуску молоди в естественную среду обитания [1].

Индустриальные технологии выращивания рыбы включают в себя выращивание в садках и установках замкнутого водоснабжения. УЗВ позволяют обеспечить оптимальные условия содержания гидробионтов, автоматизировать процесс кормления и эффективнее контролировать проведение профилактических мероприятий.

Садковое выращивание осетровых не требует электроэнергии для принудительного водообмена, снижая финансовые затраты. В садковых рыбоводных хозяйствах используются естественные кормовые ресурсы, что уменьшает расход кормов.

Данные технологии характеризуются высокой плотностью посадки гидробионтов, в связи с чем актуально отслеживание физиологического состояния объектов выращивания. Для его оценки используют такие показатели, как биохимический состав крови, гематология и микроядерные тесты [1].

Материалы и методы исследований

Объектом исследований являлись особи осетра ленской популяции, выращенные в УЗВ (первая группа) и садках (вторая группа). Средняя масса рыбы в начале эксперимента составляла в среднем 130 г. В ходе опыта были сформированы две группы по 50 особей в каждой. Выращивание проводили 180 дней.

По биохимическому составу крови можно получить достаточную информацию о состоянии организма, поскольку соотношение ее показателей меняется в результате воздействия неблагоприятных факторов и может служить одним из ранних свидетельств нарушения обмена веществ [4].

В конце эксперимента производили взятие сыворотки крови у пяти типичных особей из каждой группы для изучения биохимических, гематологических показателей и периферических клеток.

Выявляли содержание прямого и общего билирубина, общего белка, глюкозы, мочевины, щелочной фос- фотазы, макро- и микроэлементов (таблица 1).

Результаты исследований и их обсуждение. Выявлено, что показатель общего билирубина в сыворотке крови рыб, выращенных в УЗВ, был ниже на 1,4 мкмоль/л аналогичного показателя у рыб, выращенных в садках. Значение прямого билирубина также было ниже на 1,1 мкмоль/л. Содержание общего белка в плазме крови рыб первой группы было выше на 4,4 г/л, чем у рыб второй группы. По креатинину выявлена заметная разница на 9 ммоль/л между особями первой и второй групп в пользу первой. Различия между значениями глюкозы в группах не существенны (0,6 мкмоль/л). Значение щелочной фосфотазы в крови осетровых второй группы превышало данный показатель в первой группе на 23,0 Ед/л.

При анализе коэффициента де Ритиса установлено, что в первой группе рыб он составил 0,91, а во второй группе - 0,95.

Таблица 1

Примечание: *Р >0,95.

Анализируя результаты, приведенные в таблице 1, отмечено, что оптимальные значения биохимических показателей сыворотки крови были получены у особей, содержащихся в УЗВ.

В таблице 2 отражена гематология ленского осетра, выращенного в различных условиях.

Таблица 2

Гематологические показатели ленского осетра

Примечание: *Р >0,95, **Р >0,99, ***Р >0,999.

Отмечается взаимосвязь между концентрацией гемоглобина, числом эритроцитов и оснащенностью их гемоглобином. Во второй группе концентрация гемоглобина в крови ниже на 2,5 г-л^-1, содержание гемоглобина в эритроците также ниже 1,1 пг аналогичных показателей в первой группе, что свидетельствует о проявлении адаптивных механизмов крови к условиям содержания особей.

Анализ картины эритроцитов показывает, что у ленского осетра первой группы этот показатель был на 0,036 Т^л^-1 выше, чем во второй группе. Доля молодых эритроцитов составляет от 2,32%, в отличие от данного показателя во второй группе, где его значение 2,65%. Такой высокий уровень молодых эритроцитов указывает на интенсивное кроветворение.

У рыб количество форменных элементов, в том числе и лейкоцитов, в значительной степени зависит от видовой принадлежности. Содержание лейкоцитов выше нормы свидетельствует о воспалительном процессе в организме. По содержанию лейкоцитов лидирует вторая группа.

В крови рыб присутствуют сегментоядерные гранулоциты различной степени зрелости нейтрофилы и эози- нофилы. Их содержание было выше у особей, выращенных в УЗВ.

Агранулоциты рыб представлены лимфоцитами и моноцитами. Показатель содержания лимфоцитов во второй группе был выше на 1,1%, по сравнению с первой.

По значениям моноцитов наблюдалась противоположная картина.

Гемограммы форменных элементов показали, повышенный темп их роста в УЗВ, который сопровождался более высоким содержанием гемоглобина (86,8 г^л'¹) и эритроцитов (0,798 Т-л'¹).

Результаты исследования крови позволили установить, что значения гематологических показателей сыворотки крови первой группы ленского осетра более высокие за счет интенсивного роста.

Окрашенные нуклеиновые кислоты в ультрафиолетовом свете интенсивно светились ярко-зеленым, в результате ядра эритроцитов нормального строения выглядели как округлые плотно окрашенные зеленые тельца разного размера (рисунок 1) [3].

У обследованных осетров эритроциты были представлены молодыми формами (округлое ядро) и зрелыми клетками (ядро эллипсовидной формы). Были зафиксированы два эритроцита с аномальной формой ядра (подковообразные). Ни в одной из проб не были зафиксированы случаи апоптоза, но отмечены эритроциты с микроядрами в пробах крови осетров как первой, так и второй групп. Обычно микроядра возникают из фрагментов хромосом, которые лишены центромер и поэтому исключаются из клеточных ядер в момент деления клеток [1, 5]. Доказано, что между частотой возникновения клеток с микроядрами имеются устойчивые взаимосвязи с другими гематологическими показателями, характеризующими физиологическое состояние рыб, а также с токсикологическими и гидрохимическими показателями, характеризующими среду их обитания.

Рисунок 1. Микроядра в эритроцитах периферической крови первой и второй групп

Именно этот показатель является определяющим для оценки генетических нарушений при внешних воздействиях. Максимальное количество клеток с микроядрами обнаруженных в пробах составило 2 клетки на 2000 исследованных эритроцитов, что составляет 0,1% (таблица 3), в подопытных группах особи с таким показателем были единичными.

Таблица 3

Количество эритроцитов с микроядрами в крови рыб (на 2000 просмотренных)

В группе осетров из УЗВ также у двух особей нами не зафиксированы эритроциты с микроядрами. У двух особей было обнаружено по одному микроядру на 2 тысячи исследованных клеток, что составило 0,05%. И лишь у одного осетра число микроядер было 0,1%, то есть только у двух из 2 тысяч эритроцитов были микроядра.

У двух осетров, выращенных в садках эритроцитов с микроядрами, не обнаружили у трех на 2 тысячи клеток было выявлено только по одному микроядру, что составляет лишь 0,05%.

Анализ периферической крови осетров второй группы продемонстрировал, что микроядра встречаются единично: медиана выборки равна 1. У особей первой группы также количество клеток с микроядрами колеблется в пределах 0 - 1 (на 2000 клеток), медиана составляет 1 на две тысячи просмотренных эритроцитов.

Между количеством клеток с микроядрами в крови осетров, взятых из садков и из УЗВ, статистически достоверных отличий отмечено не было (F=0.2, p= 0.67) (таблица 4).

Таблица 4

Результаты однофакторного дисперсионного анализа