Статья: Влияние на сперматогенез крыс самцов нового производного аденозина с антидепрессивной активностью

ВЛИЯНИЕ НА СПЕРМАТОГЕНЕЗ КРЫС САМЦОВ НОВОГО ПРОИЗВОДНОГО АДЕНОЗИНА С АНТИДЕПРЕССИВНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

адепрофен крыса сперматогенез самец

Л.И. Бугаева, Е.А. Кузубова, М.В. Мальцев, А.А. Озеров,

Т.М. Авилова, Е.Б. Лаврова, А.А. Колмаков

ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный

медицинский университет» Министерства

здравоохранения Российской Федерации

В экспериментах на крысах при двухмесячном введении нового производного аденозина (вещества адепрофен) в дозах 10 мг/кг (терапевтическая доза, ТД) и 150 мг/кг (15 ТД) установлено отсутствие повреждающего влияния на активность сперматогенеза. Отмечено, что под действием адепрофена в дозе 10 мг/кг у самцов не изменяется индекс сперматогенеза, но при этом повышается количество сперматогоний и число канальцев с 12-й стадией мейоза в гонадах. Одновременно, в семенной жидкости у этих самцов не отмечено изменений в общем количестве сперматозоидов и содержании их патологических форм, тогда как содержание в них неподвижных форм отчетливо снижается. Под действием адепрофена в дозе 150 мг/кг у самцов индекс сперматогенеза не изменяется, повышаются мейотическая активность в канальцах семенников и количество сперматогоний в канальцах. При этом общее количество сперматозоидов в семенной жидкости несущественно снижается, с одновременной тенденцией сокращения в них неподвижных форм сперматозоидов. Полученные экспериментальные данные могут свидетельствовать о положительном влиянии адепрофена на процессы сперматогенеза и функцию семяродного эпителия гонад крыс самцов, что вероятно, может положительно отразиться на фертилизирующих свойствах сперматозоидов.

Ключевые слова: адепрофен, производное аденозина, сперматогенез, индекс сперматогенеза.

EFFECT ON SPERMATOGENESIS OF MALE RATS NEW ADENOSINE DERIVATIVE WITH ANTIDEPRESSANT ACTIVITY

L.I. Bugaeva, ЕЛ. Kuzubova, M.V. Mal'cev, A.A. Ozerov,

T.M. Avilova, Е.B. Lavrova, A.A. Kolmakov

FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of Public

Health Ministry of the Russian Federation

In experiments on rats with a 2-month administration of a new derivative of adenosine (substance adeprofen) in doses of 10 mg/kg (therapeutic dose, TD) and 150 mg/kg (15 TD), there is no damaging effect on spermatogenesis. It is noted that under the action of adeprofen at a dose of 10 mg/kg in males the index of spermatogenesis does not change, but the number of spermatogonia and the number of tubules from the 12th stage of meiosis in the gonads increase. At the same time, in the seminal fluid in these males, no changes were noted in the total number of spermatozoa and the content of their pathological forms, whereas the content of stationary forms in them is clearly reduced. Under the action of adeprofen at a dose of 150 mg/kg in males, the spermatogenesis index does not change, the meiotic activity in the testicle canaliculi and the number of spermatogonia in the canaliculi increase. At the same time, the total number of spermatozoa in the seminal fluid is insignificantly reduced, with the simultaneous tendency of reduction in them of fixed forms of spermatozoa. The experimental data obtained may indicate a positive effect of adeprofen on spermatogenesis and the function of the gland epithelium of male rats, which probably can have a positive effect on the fertilizing properties of spermatozoa.

Key words: adeprofen, adenosine derivative, spermatogenesis, spermatogenesis index.

Новое производное аденозина адепрофен (лабораторный шифр ВМА 99-82) с выраженной антидепрессивной и анксиолитической активностями, по степени токсичности относится к классу умереннотоксичных [1, 2, 5] с широким диапазоном терапевтического индекса. В настоящее время данное вещество активно исследуется фармакологами, рассматривается возможность его последующего внедрения в клиническую практику. Известно, что одним из важнейших негативных последствий в действии антидепрессивных лекарственных средств является их угнетающее влияние на мужскую репродуктивную функцию, где наблюдается снижение фертильности, угнетение сперматогенеза, снижение либидо, нарушение эрекции [4, 9, 10]. С учетом этого в настоящем исследовании сочли целесообразным оценить влияние адепрофена, проявляющего высокую антидепрессивную и анксиолитическую активности [6], на функцию семяродного эпителия гонад.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Изучение влияния адепрофена (при 2-месячном введении и 2-месячной отмены введения) на сперматогенез крыс самцов.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты выполнены на 60 половозрелых лабораторных крысах самцах, доставленных из специализированного питомника РАМН (г. Москва) массой 230-250 г, 4-месячного возраста, содержавшихся в стандартных условиях вивария. Исследование проведено в соответствии с рекомендациями «Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств» 2012 г. [3]. Перед началом эксперимента крысы самцы были расформированы на 3 равные группы (по 20 особей): 1-я группа самцов была контрольной, которой внутрижелудочно вводили дистиллированную оду в дозе 20 мл/кг (данный объем использовался для растворения субстанции адепрофена), 2-я и 3-я группы крыс самцов были опытными, которым адепрофен вводили внутрижелудочно в дозах 10 мг/кг (экспериментально доказанная терапевтически эффективная) и 150 мг/кг (превышающая терапевтическую дозу в 15 раз). Длительность курса введения адепрофена самцам составляла 2 месяца, что соответствует одному циклу сперматогенеза [3, 8]. По окончании курса введения субстанции у крыс самцов исследовали спермиограмму и состояние семяродного эпителия, такие же исследования проводили через 2 месяца после отмены введения адепрофена. С этой целью крыс самцов подвергали эвтаназии (методом декапитации) и некропсии [3, 7, 8]. На вскрытии у них выделяли семенники и эпидидимисы. Из эпидидимисов извлекали семенную жидкость (эякулят) [7, 8], а семенники после их гистологической обработки исследовали морфометрически. В семенной жидкости подсчитывали такие показатели спермиограммы, как общее количество сперматозоидов (ОКС) (1*10⁶), содержание в них дегенеративных и неподвижных форм (%), время подвижности (мин). На гистологических препаратах семенников подсчитывали общее количество сперматогоний, число канальцев со слущенным эпителием и 12-й стадией мейоза, рассчитывали индекс сперматогенеза.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы Microsoft Exel, о достоверности судили по t-критерию Стьюдента.

Таблица 1

Влияние адепрофена на функциональное состояние сперматозоидов и морфологические показатели функционального состояния семяродного эпителия крыс (M ± m)

`Результаты статистически достоверны относительно группы контроля при р < 0,05; **р < 0,01 ; ***р < 0,001.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

По результатам исследований, проведенных на части крыс самцов (контрольной и 2 опытных групп) по окончанию 2-месячного курса введения адепрофена выявлено отсутствие повреждающего влияния на показатели сперматогенеза.

Так, из приведенных в табл. 1 данных видно, что у крыс самцов в 1-й опытной группе общее количество сперматозоидов, содержание в них патологических форм и время их подвижности практически не изменялись относительно контрольных величин.

При этом обращает на себя внимание, что относительное количество неподвижных форм сперматозоидов в семенной жидкости у этих самцов снижалось на 26,8 % (р < 0,001). У самцов во 2-й опытной группе прослеживалась слабая тенденция снижения общего количества сперматозоидов на 9,0 % (р > 0,05) и времени их подвижности на 13,1 % (р > 0,05).

Данные эффекты были статистически незначимы и не выходили за рамки физиологической нормы. Также у этих самцов было обнаружено незначительное снижение относительного количества патологических форм сперматозоидов на 8,7 % (р > 0,05), и отчетливое сокращение количества неподвижных форм сперматозоидов на 24,6 % (р < 0,01).

По результатам морфометрических исследований не отмечено изменений коэффициентов масс гонад у опытных и контрольных животных. При оценке состояния семяродного эпителия на препаратах гонад у крыс самцов, получавших адепрофен, не зафиксировано существенных изменений в индексе сперматогенеза. Вместе с тем, у самцов в 1-й и 2-й опытных группах было отмечено (табл. 1) повышение общего количества сперматогоний на 11,2 (р < 0,05) и 7,3 % (р > 0,05), соответственно группам, тогда как число канальцев со слущенным эпителием незначительно, но отчетливо снижалось на 12,3 % (р > 0,05) у самцов в 1-й опытной группе и не изменялось относительно контроля во 2-й опытной группе, а мейотическая активность в канальцах у самцов 1-й и 2-й опытных групп недостоверно, но отчетливо возрастала на 17,4 % (р > 0,05). Из полученных данных можно предположить наличие мягкого активирующего влияния адепрофена на функцию семяродного эпителия крыс самцов.

В исследованиях, проведенных после 2-месячной отмены (табл. 2), были отмечены отдаленные эффекты воздействия адепрофена на функции семяродного эпителия в гонадах. Наряду с этим выявлялось, что у самцов в 1-й опытной группе общее количество сперматозоидов не различалось с контролем, а время подвижности сперматозоидов несколько повышалось (на 7,8 %, p > 0,05). Также у этих самцов наблюдалось снижение относительного количества патологических и неподвижных форм сперматозоидов на 13,0 % (p < 0,05) и 10,1 % (p < 0,05) соответственно. При исследовании спермиограммы у самцов во 2-й опытной группе зафиксировано статистически незначимое понижение общего количества сперматозоидов (на 7,8 %, p > 0,05) и времени их подвижности (на 13,7 %, p > 0,05). Однако данные эффекты не выходили за рамки референтных значений. Также у этих самцов было отмечено, что содержание патологических форм сперматозоидов не различались с контролем, тогда как количество неподвижных их форм достоверно снижалось на 9,7 % (p < 0,05).

В морфометрических исследованиях, проведенных через 2 месяца после отмены введения адепрофена, также не было обнаружено изменений в состоянии семяродного эпителия гонад. Так, в 1-й опытной группе у самцов прослеживалось статистически незначимое повышение индекса сперматогенеза (3,0 %), с одновременным повышением количества канальцев с 12-й стадией мейоза (8,7 %) и снижением числа канальцев со слущенным эпителием (14,0 %). При этом у самцов во 2-й опытной группе индекс сперматогенеза, количество сперматогоний, число канальцев с 12-й стадией мейоза и количество канальцев со слущенным эпителием не различались с контролем.

Таблица 2

Влияние адепрофена на функциональное состояние сперматозоидов и морфологические показатели функционального состояния семяродного эпителия крыс после отмены (M ± m)

*Данные статистически достоверны относительно группы контроля при p < 0,05.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, на основании проведенных исследований можно сделать заключение, что новое производное аденозина (адепрофен) с антидепрессивной и анксиолитической активностями при 2-месячном введении крысам самцам в дозах 10 и 150 мг/кг, не оказывает негативного влияния на процессы сперматогенеза. Отмечено, что под действием не изменяется индекс сперматогенеза, но при этом улучшается функциональное состояние сперматозоидов (снижается содержание патологических и неподвижных форм сперматозоидов) и функция семяродного эпителия гонад (повышается количество сперматогонийи мейотическая активность в канальцах семенников, снижается количество канальцев со слущенным эпителием). С учетом представленных сведений можно также предположить положительное влияние адепрофена на фертилизирующие свойства сперматозоидов.