По данным таблицы 3 необходимо отметить увеличение уровня общего белка в организме иммунизированных животных на 27,09 г/л на 25 сутки эксперимента, возникшее, вероятно, в результате биосинтеза специфических антител к монокомпонентам вакцины, с последующим снижением данного показателя на 45 сутки до уровня близкого к первоначальному (79,15±2,93 г/л в сравнении с 72,05±1,61 г/л в начале эксперимента), однако выявленные изменения не являются достоверными.
Результаты изучения показателей минерального обмена у коров после введения инактивированной вакцины против колибактериоза и клебсиеллеза телят представлены в таблице 4.
Таблица 4. Результаты изучения показателей минерального обмена у коров после введения инактивированной вакцины против колибактериоза и клебсиеллеза телят
|
Дни взятия крови |
Группа животных |
Са |
Р |
Са/Р |
Магний |
Железо |
|
|
ммоль/л |
ммоль/л |
ед. |
ммоль/л |
мкмоль/л |
|||
|
До вак-цинации |
Опыт |
1,85±0,74 |
2,16±0,14 |
0,86±0,22 |
0,81±0,12 |
31,17±2,55 |
|
|
Контроль |
1,96±0,77 |
1,95±0,21 |
1,01±0,27 |
0,79±0,13 |
26,36±1,35 |
||
|
Через 25 дней |
Опыт |
2,01±0,16 |
1,75±0,15 |
1,15±0,17 |
0,85±0,16 |
29,19±2,66 |
|
|
Контроль |
1,63±0,21 |
1,91±0,16 |
0,85±0,16 |
0,75±0,07 |
34,17±3,47 |
||
|
Через 45 дней |
Опыт |
1,87±0,27 |
1,82±0,11 |
1,03±0,07 |
0,81±0,09 |
32,13±2,94 |
|
|
Контроль |
1,77±0,11 |
1,74±0,15 |
1,02±0,14 |
0,79±0,11 |
31,94±2,16 |
Анализ показателей минерального обмена коров, иммунизированных разработанной вакциной, свидетельствует о том, что разработанная вакцина не нарушает всасывания минеральных веществ (количество магния, железа и фосфора в крови животных опытной и контрольных групп находится практически на одном уровне). Достоверных изменений кальций-фосфорного соотношения у коров опытной и контрольной групп также не выявлено, следовательно, вакцина не нарушает обмен кальция и фосфора в организме животных.
Результаты определения биохимических показателей, отражающих функциональное состояние печени и поджелудочной железы у коров, представлены в таблице 5.
Таблица 5. Результаты определения биохимических показателей, отражающих функциональное состояние печени и поджелудочной железы у коров после введения инактивированной вакцины против колибактериоза и клебсиеллеза телят
|
Дни взятия крови |
Группа животных |
АлАТ |
АсАТ |
Щелочная фосфатаза |
Креатинин |
Мочевина |
Холестерол |
Триглицериды |
Глюкоза |
|
|
ед/л |
ед/л |
ед/л |
Мкмоль /л |
ммоль/л |
ммоль/л |
ммоль/л |
ммоль/л |
|||
|
До вакцинации |
Опыт |
23,86±3,69 |
89,95±1,81 |
43,10± 2,16 |
134,75±16,93 |
3,03 ±0,21 |
3,78 ±0,54 |
0,34 ±0,06 |
2,38 ±0,55 |
|
|
Конт-роль |
26,78±4,18 |
85,69±5,26 |
44,35± 5,26 |
128,36±25,62 |
3,11 ±0,36 |
3,20 ±0,33 |
0,29 ±0,03 |
2,69 ±0,34 |
||
|
Через 21 день |
Опыт |
22,17±2,63 |
75,16±1,84 |
38,60± 3,26 |
146,25±17,27 |
3,36 ±0,25 |
3,74 ±0,18 |
0,31 ±0,02 |
2,75 ±0,67 |
|
|
Конт-роль |
25,34±5,78 |
79,41±5,28 |
39,10± 1,65 |
135,17±11,66 |
3,29 ±0,64 |
3,11 ±0,65 |
0,25 ±0,07 |
2,89 ±0,29 |
||
|
Через 45 дней |
Опыт |
21,86±3,49 |
81,17±4,32 |
40,30± 2,41 |
154,12±14,43 |
3,16 ±0,26 |
3,26 ±0,17 |
0,38 ±0,11 |
3,16 ±0,47 |
|
|
Конт-роль |
24,61±7,38 |
83,33±6,21 |
42,40± 2,18 |
147,34±18,77 |
3,33 ±0,31 |
2,95 ±0,68 |
0,35 ±0,12 |
3,22 ±0,45 |
Изучение активности ферментов печени АлАТ и АсАТ позволяет оценить гепатотоксичность разработанной вакцины.
Отсутствие существенных различий уровня АсАТ в организме животных контрольной и опытной групп свидетельствует о том, что исследуемая вакцина не вызывает цитолиза гепатоцитов печени и холестаза.
Указанная тенденция прослеживается также и в отношении триглицеридов, уровень которых в крови животных опытной и контрольной групп не имеет статистически значимых различий, что свидетельствует об отсутствии негативного влияния разработанной вакцины на жировой обмен.
Характеризуя динамику уровня мочевины в организме животных при испытании инактивированной вакцины необходимо отметить, что ее содержание в крови животных контрольной и опытной групп незначительно повышается на 25-е сутки, что не имеет диагностического значения.
На основании этого можно сделать вывод, что испытуемая вакцина не оказывает токсического действия на почки и не нарушает их выделительной функции.
Имеющиеся колебания уровня глюкозы и триглицеридов у коров опытной и контрольной групп незначительны и недостоверны, что также свидетельствует о ненарушенной функции поджелудочной железы.
Результаты изучения иммунного ответа стельных коров в поствакцинальный период при иммунизации их инактивированной вакциной представлены на рисунках 1-2.
а) б)
в) г)
Рис. 1. Титр противоэшерихиозных антител к штаммам: а) E. coli А20; б) E. coli F41; в) E. coli К99; г) E. coli К88
Рис. 2. Титр антибактериальных антител к Kl. pneumoniae
Результаты изучения иммуногенной активности разработанной вакцины показали, что в организме сухостойных коров через 21 сутки после иммунизации наблюдается достоверное (р?0,05) увеличение титров антител против всех антигенов, входящих в состав биопрепарата. Титры антибактериальных антител против E. coli А20 увеличились на 3,5 log2, против E. coli F41 - на 3,9 log2, против E. coli К99 - на 4,1 log2, против E. coli К88 - на 6,4 log2, против Kl. pneumoniae- на 4,2 log2 в сравнении с первоначальным уровнем. В крови животных контрольной группы уровень специфических антител на всем протяжении опыта практически не изменялся.
Заключение
1. Испытуемая вакцина не оказывает негативного влияния на белковый, минеральный, жировой обмен и функциональное состояние внутренних органов стельных сухостойных коров, а также гематологические показатели организма коров в период сухостоя.
2. Иммунизация стельных коров инактивированной вакциной против колибактериоза и клебсиеллеза телят приводит к биосинтезу антител в титрах 7,9-9,3 log2 (р?0,05) ко всем антигенам, входящим в состав сконструированного биопрепарата.
Библиографический список
1. Белова Н.Б. Эффективность ассоциированной вакцины против рота-корона-ВД-БС-вирусов крупного рогатого скота / Н.Б. Белова // Ветеринария. 2005. - № 4. - С. 18-20.
2. Журавлева Е.С. Этиология вирусно-бактериальных энтеритов телят в хозяйствах Минской области / Е.С. Журавлева, М.М. Володкович // Ветеринарная наука - производству: науч. тр. / РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского»; под науч. ред. Н.Н. Андросика. - Минск, 2003. - т. 37. - С. 26-30.
3. Гулюкин М.И. Разработка вакцины против рота-, коронавирусной инфекции и колиэнтеритов телят / М.И. Гулюкин [и др.] // Ветеринария и кормление. - 2014. - № 5. - С. 52-53.
4. Сетдеков Р.А. Испытание иммуногенной активности субъединичной вакцины против колибактериоза телят и поросят в производственных условиях / Р.А. Сетдеков // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана . - 2015. - Т. 221(1). - С. 199-200.
5. Головко А.Н. Конструирование иммунизирующего препарата против рота-, коронавирусных инфекций и колибактериоза телят / А.Н. Головко [и др.] // Ветеринарная медицина 74: міжвідомчій темтичнии науковии збірник. Харків, 1998. - С. 196-201.
6. Амосова Л.Я. Экспериментальные исследования по разработке технологии изготовления и применения вакцины поливалентной с адгезивными антигенами против колибактериоза (эшерихиоза) телят [В условиях Белоруссии] / Л.А. Амосова [и др.] // Эпизоотология, иммунобиология, фармакология и санитария. - 2015. - № 1. - С. 3-7.
7. Терехов В.И. Антигенный состав и патогенные свойства штаммов E.coli, изолированных от телят и поросят в Краснодарском крае / В.И. Терехов [и др.] // Российский ветеринарный журнал. - 2008. - № 4. - С. 6-7.
8. Иванов А.И. Этиологическая структура колибактериоза сельскохозяйственных животных и птиц в республике Башкортостан / А.И. Иванов, Я.Р. Байзигитова // Современные достижения ветеринарной медицины и биологии - в сельскохозяйственное производство. - 2014. - С. 64-65.
9. Яромчик Я.П. Специфическая профилактика ротавирусной инфекции и колибактериоза крупного рогатого скота [текст]: автореф. дис. … канд. вет. наук (06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология) / Я.П. Яромчик; республиканское научно-исследовательское дочернее унитарное предприятие Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского". - Минск, 2010. - 23 с.
10. Blanco М. Serotypes, intimin variants and other virulence factors of eae positive Escherichia coli strains isolated from healthy cattle in Switzerland. Identification of a new intimin variant gene (eae-eta2) / M. Blanco [et al.] // BMC Microbiol. - 2005. - Vol. 5. - P. 23.
11. Corbishley А. Strain-dependent cellular immune responses in cattle following Escherichia coli O157:H7 colonization / A. Corbishley [et al.] // Infect. Immun. - 2014. - Vol. 82 - №12. - P. 5117-31.
12. Борисовец Д.С. Вакцина инактивированная против вирусной диареи, клебсиеллеза, ротавирусной и протейной инфекций телят: автореф. дис. … канд. вет. наук (06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология) / Д.С. Борисовец; республиканское научно-исследовательское дочернее унитарное предприятие "Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского". - Минск, 2010. - 20 с.
13. Ломако Ю.В. Эффективность применения отечественной вакцины (КСКП) для профилактики колибактериоза, сальмонеллеза, клебсиеллеза и протеоза крупного рогатого скота / Ю. В. Ломако [и др.] // Основные направления развития ветеринарной науки. - Минск, 2013. - С.193-198.
14. Эльмурадов Б.А. Смешанные инфекции телят / Б.А. Эльмурадов // Ветеринарная патология. -2003. - № 2. - C. 52-53.
15. Хитрова А.Е. Новые препараты для специфической профилактики смешанных инфекционных болезней телят / А.Е. Хитрова, Г.Л. Соболева, Т.Н. Алипер // Ветеринарная медицина Беларуси. - 2005. - №1. - С. 23-24.