Иммунофлуоресцентный метод- Обнаружение антигенов вируса в мазках-отпечатках из содержимого везикул
Вирусологический - Выделение вируса из биологического материала (содержимого пузырьков, соскобов со слизистых оболочек и кожи, крови, ликвора и др.) на чувствительных (эмбриональных) культурах клеток
Выявление ДНК вируса методом ПЦР в крови, СМЖ
Иммуноцитохимический - обнаружение антигена вируса
Серологический - Нарастание титра специфических антител в 4 и более раз в течение 10-14 дней (метод парных сывороток) в ИФА, РСК и др., а также определение в ИФА специфических антител Ig M, Ig A.
ОАК: лейкопения, лейкоцитоз, относительный лимфоцитоз, моноцитоз, умеренное повышение СОЭ. · ОАМ: протеинурия, цилиндрурия, микрогематурия (при токсическом поражении почек). · ИФА или РПГА – используются парные сыворотки, полученные с интервалом в 10–12 дней (первая на 4–5-й день болезни, вторая – после 14-го дня болезни). Диагностический критерий – нарастание титра антител в 4 раза и более. · ПЦР фекалий (носоглоточной слизи) на Enterovirus: детекция РНК Enterovirus. · исследование СМЖ (при менингите): - цвет – ликвор прозрачный, или слегка опалесцирующий; - давление – жидкость вытекает струей или частыми каплями; - лимфоцитарный плеоцитоз; - повышение белка до 1-4,5 г/л (наиболее высокое - при развитии менингоэнцефалита); - сахар в норме; - снижение хлоридов. Дополнительные: · иммунохроматографический тест фекалий на энтеровирус; · тест Xpert EV на энтеровирус в образцах СМЖ у пациентов с симптомами менингита (на основе ПЦР-анализа).
Отклонения в лабораторных показателях – повышение СОЭ, умеренный лейкоцитоз наблюдаются при тяжелом течении заболевания.
В случае затруднений в диагностике проводят гистологическое исследование биоптата кожи. При гистологическом исследовании наблюдаются отек сосочкового слоя, инфильтрация дермы различной интенсивности. Инфильтрат состоит из лимфоцитов, нейтрофилов и эозинофилов. В базальных клетках эпидермиса наблюдается вакуольная дистрофия. В некоторых участках клетки инфильтрата могут проникать в эпидермис и в результате спонгиоза образовывать внутриэпидермальные пузырьки. Вакуольная дистрофия и выраженный отек сосочкового слоя дермы могут приводить к образованию субэпидермальных пузырей.
В анализе крови в высыпной период выявляется легкая анемия, низкое содержание ретикулоцитов, в ряде случаев - нейтропения, тромбоцитопения, повышенная СОЭ .
Для более точной диагностики возможно использовать ПЦР (сыворотка, ликвор, пунктат костного мозга, биоптат кожи и т. д.) для определения ДНК парвовируса. Также применяется метод ИФА с определением в сыворотке крови уровня специфических антител: IgM в сыворотке крови пациента обнаруживаются одновременно с появлением симптомов заболевания (на 12-14-й день после заражения), их уровень достигает максимума на 30-й день, затем снижается в течение 2-3 месяцев. Через 5-7 дней от момента клинических проявлений парвовирусной инфекции появляются IgG, которые сохраняются в течение нескольких лет
Для подтверждения диагноза можно использовать серологическую диагностику, однако у многих детей с первичной инфекцией не развивается необходимый для определения уровень IgM . Кроме того, у большинства людей старше 2-летнего возраста имеются антитела к вирусу герпеса типа 6 и для верификации необходимы парные сыворотки: выявление четырехкратного нарастания титра IgG к вирусу герпеса типа 6 или переход отрицательного результата в положительный служат подтверждением диагноза. Также возможно применение ПЦР, с помощью которой можно выявить вирус в тканях (в крови, слюне).
ОАК: лейкопения/умеренный лейкоцитоз (12-25х109/л); лимфомоноцитоз до 80-90%; нейтропения; плазматические клетки; увеличение СОЭ до 20-30 мм/ч; атипичные мононуклеары (отсутствие или увеличение от 10 до 50%). · Биохимический анализ крови: умеренная гиперферментемия, гипербилирубинемия. · Серологический анализ крови (ИФА): обнаружение специфических антител ВЭБ специфичности (IgM VCA, IgG EA, IgG VCA, IgG-EBNA) с определением показателя индекса авидности. · Полимеразная цепная реакция (ПЦР): обнаружение в крови ДНК вируса Эпштейна-Барр.
- определение антител IgM и IgG к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов (ВПГ-1, ВПГ-2) в сыворотке крови методом ИФА;
- определение индекса авидности методом ИФА.
- определение ДНК ВПГ методом ПЦР (кровь, мазки со слизистых оболочек, содержимое герпетических пузырьков, СМЖ (в зависимости от локализации герпетических поражений)); - УЗИ плода (у беременных); - определение антител к ВИЧ методом ИФА;
· ОАК – лейкоцитоз, нейтрофилез с палочкоядерным сдвигом, появление незрелых форм клеток крови (юных, миелоцитов, промиелоцитов) ускорение СОЭ, возможны анемия, тромбоцитопения;
· ОАМ – альбуминурия, цилиндрурия, микрогематурия (при тяжелом течении генерализованных форм в результате токсического поражения почек).
· цереброспинальная жидкость: цвет - в первый день болезни ликвор может быть еще прозрачным или слегка опалесцирующим, но к концу суток становится мутным, молочно-белого цвета (норма - прозрачный); давление – вытекает струей или частыми каплями, давление достигает 300-500 мм. вод. ст. (норма – 100-150 мм. вод. ст.); нейтрофильный плеоцитоз до нескольких тысяч в 1 мкл и более; повышение белка до 1-4,5 г/л; снижение сахара; снижение хлоридов; при развитии менингоэнцефалита и отеке мозга – высокое содержание белка.
· бактериоскопическое исследование крови и ликвора - окраска ликвора и крови (методом «толстой капли») по Грамму: обнаружение грамотрицательных диплококков;
· латекс агглютинирующий тест: наличие агглютинации при исследовании цереброспинальной жидкости;
· бактериологическое исследование мазка из носоглотки: культура Neisseria meningitidisи определение чувствительности к антибиотикам;
· бактериологическое исследование крови: гемокультура Neisseria meningitidis и определение чувствительности к антибиотикам;
· бактериологическое исследование ликвора: культура Neisseria meningitidis и определение чувствительности к антибиотикам;
· ПЦР крови, ликвора: детекция ДНК Neisseria meningitidis;
Экспресс диагностика ликвора с определением сероштамма А, С, Y, W – лакмусовая* после регистрации в РК (результат через 10 мин.).
· По показаниям биохимический анализ крови:
- Определение общего белка в сыворотке крови;
- Определение креатинина, мочевины в сыворотке крови;
- Определение прокальцитонина в сыворотке крови;
- Определение СРБ в сыворотке крови
- Определение АЛаТ в сыворотке крови;
- Определение общего билирубина в сыворотке крови;
- Определение АСаТ в сыворотке крови;
- Определение общего билирубина в сыворотке крови;
- Определение газов крови (pCO2, pO2, CO2);
- Определение калия (K) в сыворотке крови;
- Определение кальция (Ca) в сыворотке крови;
- Определение натрия (Na) в сыворотке крови;
- Определение времени свертывания крови;
- Подсчет тромбоцитов в крови;
- Определение лактата (молочной кислоты) в сыворотке крови
- Определение протромбинового времени (ПВ) с последующим расчетом протромбинового индекса (ПТИ) и международного нормализованного отношения (МНО) в плазме крови (ПВ-ПТИ-МНО);
· общий анализ крови (ОАК): умеренный лейкоцитоз с нейтрофильным сдвигом формулы влево, умеренное повышение скорости оседания эритроцитов (СОЭ); · общий анализ мочи (ОАМ): в тяжелых случаях – олигурия и протеинурия, в осадке мочи – эритроциты, лейкоциты, гиалиновые и зернистые цилиндры.
· С-реактивный белок: повышение содержания. · биохимический анализ крови (по показаниям): определение содержания общего белка, альбумина, электролитов (калий, натрий), глюкозы, креатинина, мочевины, остаточного азота). · коагулограмма: при нарушениях в сосудисто-тромбоцитарном, прокоагулянтном, фибринолитическом звеньях у больных с тяжелыми геморрагическими формами рожи – определение времени свертывания крови, активированного частичного тромбопластинового времени, протромбинового индекса или отношения, фибриногена, тромбинового времени.
- Бак.посев крови.
Для этиологической диагностики ЛБ рекомендовано использовать определение уровней IgM и IgG к B.burgdorferi s.l (s.s), методами ИФА или РНИФ.
Девочка 3 года, ходит в детский сад. Мама обнаружила температуру 39°С, озноб, усталость, заболела остро. На следующее утро по всему телу появилась сыпь состоящая из папул и везикул. В следующие двое суток стали появляться новые элементы сыпи на теле.
Поставьте диагноз.
Проведите дифференциальный диагноз.
Тактика врача при выявлении данной болезни?