Материал: protokoly_2020
* Протокол № Серологическая диагностика сыпного тифа
У больного с подозрением на сыпной тиф на 1-й неделе заболевания взяли кровь, получили из нее сыворотку, инактивировали при +560С в течение 30 мин. И развели ее раствором хлорида натрия 1:10.
Для обнаружения антител к возбудителю сыпного тифа поставили реакцию связывания комплемента (РСК) в пробирках. С целью дифференциации эпидемического и эндемического сыпного тифа при постановке РСК использовали антигены Провачека и Музера соответственно.
Схема постановка РСК
|
|
|
|
|
|
Разведения сывороток |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Ингредиенты |
|
1/20 |
|
1/40 |
1/80 |
1/160 |
|
1/320 |
1/640 |
КС |
|
КА |
|
КК |
|
КГС |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1. Раствор натрия |
|
0,25 |
|
0,25 |
0,25 |
0,25 |
|
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
|
|
0,25 |
0,25 |
|
||||
|
хлорида |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
2. Сыворотка |
|
0,25 |
|
0,25 |
0,25 |
0,25 |
|
0,25 |
0,25 |
0,25 |
- |
|
|
- |
- |
|
||||
|
обследованного (1:10) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
3.Стандартизованный |
|
0,25 |
|
0,25 |
0,25 |
0,25 |
|
0,25 |
0,25 |
- |
0,25 |
|
|
- |
- |
|
||||
|
антиген (Провачека) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
(Музера) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
4. Комплемент в |
|
0,25 |
|
0,25 |
0,25 |
0,25 |
|
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
|
|
0,25 |
- |
|
||||
|
рабочей дозе |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Инкубация при 37 °С на час или в холодильник при 4° на 16 - 20 час |
|
|
|
|
||||||||||||||||
|
5. Гемолитическая |
|
0,5 |
|
0,5 |
0,5 |
0,5 |
|
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
|
|
0,5 |
0,5 |
|
||||
|
система (смесь |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
эритроцитов барана |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
(ЭБ) и гемолитической |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
сыворотки, содержащей |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
антитела к ЭБ) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Инкубация при 37 °С в течение 30 мин. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
дез.р-р |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Учет: |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Антиген Провачека |
|
+++ |
|
+++ |
+++ |
|
+++ |
|
- |
- |
- |
|
- |
|
|
- |
|
+++ |
|
|
|
|
|
+ |
|
+ |
+ |
|
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Антиген Музера |
|
+++ |
|
+++ |
- |
|
- |
|
- |
- |
- |
|
- |
|
|
- |
|
+++ |
|
|
|
|
|
+ |
|
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Условные обозначения:
«++++» - жидкость в пробирке бесцветная, эртитроциты оседают на дно в виде пуговки или точки;
(-) – полный лизис эритроцитов (лаковая кровь) – жидкость интенсивно окрашена.
Титр сыворотки с антигеном Провачека составил 1/160, Музера – 1/40. Титр сыворотки больного с антигеном Провачека превышал диагностический титр (1/80).
Заключение
На основании результатов РСК считаем, что обследованному больному можно подтвердить диагноз «эпидемический сыпной тиф», так как у него в крови содержатся антитела к антигену Провачека в титре (1/160), превышающем диагностический.