Принцип применения ДНК-вакцин заключается в том, что в организм пациента вводят молекулу ДНК, содержащую гены, кодирующие иммуногенные белки патогенного микроорганизма. ДНК-вакцины называют еще генными, генетическими, полинуклеотидными вакцинами, вакцинами из нуклеиновых кислот. На совещании специалистов по генным вакцинам, проведенном в 1994 г. под эгидой ВОЗ, было решено отдать предпочтение термину «вакцины из нуклеиновых кислот» с их подразделением соответственно на ДНК- и РНК-вакцины. Для получения ДНК-вакцин ген, кодирующий продукцию иммуногенного протеина какого-либо микроорганизма, встраивают в бактериальную плазмиду. Плазмида представляет собой небольшую стабильную молекулу кольцевой двухцепочечной ДНК, которая способна к репликации (воспроизведению) в бактериальной клетке. Кроме гена, кодирующего вакцинирующий протеин, в плазмиду встраивают генетические элементы, которые необходимы для экспрессии («включения») этого гена в клетках эукариотов, в том числе человека, для обеспечения синтеза белка. Такую плазмиду вводят в культуру бактериальных клеток, чтобы получить большое количество копий. Затем плазмидную ДНК выделяют из бактерий, очищают от других молекул ДНК и примесей. Очищенная молекула ДНК и служит вакциной. Введение ДНК-вакцины обеспечивает синтез чужеродных протеинов клетками вакцинируемого организма, что приводит к последующей выработке иммунитета против соответствующего возбудителя. При этом плазмиды, содержащие соответствующий ген, не встраиваются в ДНК хромосом человека.
ДНК-вакцины можно вводить в солевом растворе обычным парентеральным способом (внутримышечно, внутрикожно). При этом бoльшая часть ДНК поступает в межклеточное пространство и только после этого включается в клетки. Применяют и другой метод введения, используя так называемый генный пистолет. Для этого ДНК фиксируют на микроскопических золотых гранулах (около 1-2 мкм), затем с помощью устройства, приводимого в действие сжатым гелием, гранулы «выстреливают» непосредственно внутрь клеток. Следует отметить, что аналогичный принцип введения лекарства с помощью струи сжатого гелия используют и для разработки новых способов доставки лекарственных средств (с этой целью оптимизируют размеры частиц лекарственного вещества и их плотность для достижения необходимой глубины проникновения в соответствующую ткань организма). Этот метод требует очень небольшого количества ДНК для иммунизации. Если при иммунизации классическими субъединичными вакцинами вводят микрограммы протеина, то при использовании ДНК-вакцины - нанограммы и даже меньше. Говоря о минимальном количестве ДНК, достаточном для индукции иммунного ответа, С.А. Джонстон, директор Центра биомедицинских изобретений Техасского университета, отмечает, что с помощью генного пистолета можно однократно ввести мыши «фактически 27 тыс. различных плазмид и получить иммунный ответ на индивидуальную плазмиду».
Ученые из Института биоорганической химии (ИБХ РАН) разработали универсальный способ получения микрокапсул - своего рода миниконтейнеров ради снадобий или вакцин. В многослойную биодеградируемую полимерную оболочку можно внедрять белки, ДНК, иные молекулы. На основе таких микрокапсул разрабатывают вакцины новоиспеченного поколения - ДНК-вакцины.
Похожих микроконтейнеров ради доставки, например, ДНК, придумано не так много. Есть зарубежные аналоги, в которых оболочка капсулы выполнена из полимолочной кислоты. На их основе создают вакцины против гепатита и даже СПИДа.
В пористую микросферу из карбоната кальция (CaCO3) внедряют белок, ДНК, иные вещества, которые нужно доставить в организм. Покрывают ее полупроницаемой оболочкой из немногих слоев естественных полимеров - полисахаридов. Можно покрыть каркас полипептидами или приобрести комбинированную оболочку. Если микросферы в полимерной оболочке поместить в подкисленный раствор, карбонат кальция внутри растворится и уйдет через полимерную мембрану. Внутри останется только белок или ДНК, подлежащие транспортировке. Микрокапсулы с бодрой «начинкой» готовы
Средний диаметр микрокапсул ради доставки ДНК-вакцин - 1-2 микрона (мкм). Его можно уменьшить, если взять карбонатные микросферы меньшего размера. Такие микрокапсулы можно ввести подкожно или даже в кровь. Короткий размер обеспечивает им свободное действие по сосудам: они меньше эритроцитов (диаметр которых 7,2-7,5 мкм), пластичны, меняют форму, протискиваясь через утонченные капилляры. Клетки «заглатывают» капсулы, их оболочка растворяется клеточными ферментами, выпуская бодрую «начинку».
Метод разрешает не просто доставить лекарственные вещества в клетки организма, но продлевать и регулировать время их движения. Если в микрочастицу вместе, например, с ДНК или снадобьем поместить фермент, расщепляющий оболочку капсулы изнутри, высвобождением снадобья можно править: чем меньше фермента, тем медлительнее рушится оболочка.
Российские ученые успешно применили микрокапсулы ради получения ДНК-вакцин, испытали их на клеточных линиях и лабораторных мышах. Традиционная вакцина содержит белки вирусов или бактерий, ДНК-вакцина - гены таких белков. Белки-антигены традиционной вакцины скоро разрушаются, поскольку чужеродны. То же проистекает с некапсулированной ДНК - ее в организме скоро расщепляют соответствующие ферменты. Микрокапсулированная ДНК, попав в клетки, разрешает организму самому производить достаточное число антигена, формирующего иммунитет. Это проистекает в движение длительного времени: в организме капсулы постепенно, как минимум месяц, растворяются и помогают нужную концентрацию антигена, что важно ради воспитания стабильного иммунитета.
Привлекательность ДНК-вакцин заключается в относительной простоте их создания, дешевизне производства и удобстве хранения, что позволило некоторым авторам заговорить о ДНК-вакцинах, как о вакцинах третьего поколения и о произошедшей революции в вакцинации. Однако, их широкое применение сдерживается некоторыми опасениями, вызванными, в первую очередь, теоретической возможностью внедрения такой чужеродной ДНК в геном вакцинированного организма. Тем не менее, до сих пор не получено сколько-нибудь убедительных доказательств встраивания ДНК таких вакцин в геном млекопитающих, в то время как имеется множество подтверждений о длительном существовании введенных в организм ДНК-вакцин в форме исходной плазмиды. Впрочем, подобные опасения, пожалуй, можно считать излишними, если вспомнить, что при использовании классических вакцин (применяющихся уже две сотни лет) в организм человека тоже попадает, в частности, ДНК патогена, которая теоретически также способна встраиваться в геном. Более того, как считают некоторые исследователи - если бы ДНК-вакцины были разработаны раньше классических, то ситуация могла бы быть в корне обратной, и предложения применять «живые» или «убитые» вакцины, как вакцины нового типа, также вызывали бы аналогичные и наверное справедливые опасения.
К преимуществам ДНК-вакцин, кроме уже упоминавшейся простоты их получения, производства и хранения, можно отнести и то, что при введении в организм они как бы имитируют нахождение в нем настоящего патогена, поскольку образование белковых продуктов, выступающих антигенами, происходит в этом случае непосредственно в клетках человека или животного и, следовательно, все посттрансляционные модификации белков происходят в полном соответствии тому, как это совершается при настоящей инфекции. Видимо, этим можно объяснить и высокий уровень иммунного ответа на ДНК-вакцины, и их специфичность.
1.3 Статистические данные
Корь - острая вирусная инфекция, передающаяся воздушно-капельным путем. Источником заражения является больной человек, который выделяет вирус при чихании, кашле, с капельками слюны.
Специфическая профилактика кори в России, осуществляемая в стране более 30 лет, а также проведение эпидемиологического надзора за инфекцией привели к резкому снижению заболеваемости корью, практически полной ликвидации смертности и летальности.
Благодаря активной вакцинации населения в
2007-2009гг в Тюменской области не зарегистрировано ни одного случая
заболевания корью (рис1).[14]
Рис.1 Динамика воздушно-капельных инфекций, типа
корь в Тюменской области за 1996-2012гг.
1.4 Нормативно-правовая база
Федеральные законы
· Конституция Российской Федерации
· Федеральный закон № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» от 1999г. (приложение 2)
· Федеральный закон № 157-ФЗ «Об иммунопрофилактике инфекционных болезней»
· Федеральный закон № 323 «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации»
· Закон Тюменской области от 10.10.1996 г.
«О вакцинопрофилактике населения Тюменской
области»
.5 Антивакцинаторство
Антивакцинаторство (антипрививочное, противопрививочное движение) - общественное движение, оспаривающее эффективность, безопасность и правомерность вакцинации, в частности - массовой вакцинации.
Движение против вакцинации возникло вскоре после разработки Эдвардом Дженнером первой вакцины против оспы. Основными аргументами противников вакцинации в то время были религиозные. С развитием практики вакцинации росло и движение антивакцинаторов.
Во второй половине 19-го века стали возникать первые антипрививочные организации. В 1866 в Великобритании была основана Национальная Лига Антивакцинации (англ. NationalAnti-VaccinationLeague), а в 1879 году - Американское общество антивакцинации (англ. Anti-VaccinationSocietyofAmerica). В 1870-х - 1880-х годах стало появляться большое количество антипрививочной литературы. Противники вакцинации издавали несколько журналов. Основными аргументами движения в то время были неэффективность и небезопасность вакцинации, ущемление прав человека обязательными прививками. Основу движения составляли сторонники альтернативной медицины - гомеопатии, хиропрактики, лечения травами.
В защиту антивакцинаторства выставляется ряд аргументов, таких как «Теория заговора фармацевтов», «Отрицание действенности вакцинации во многих случаях», «Религиозные мотивы» и многие другие.
По теории заговора фармацевтов антивакцинаторы считают, что производство вакцин является чрезвычайно развитым и доходным бизнесом, и на основании этого постулируют утверждение, что производители вакцин, вступая в сговор с работниками медицинских государственных служб, клиник, исследовательских учреждений и так далее, выпускают и навязывают вакцины зачастую вопреки объективной целесообразности, из соображений существенной коммерческой выгоды. Многие выводы об объективной полезности вакцинации объявляются ими либо сфабрикованными на деньги недобросовестных фармацевтов, либо сделанными на основании сфабрикованных исходных данных.
Отрицание действенности вакцинации во многих случаях.
Объявляется, что вакцины вообще не действуют, либо положительный эффект от их использования минимален и заведомо не оправдывает риск нежелательных последствий. Утверждается наличие передергиваний в статистических данных о связи между вакцинацией и заболеваемостью, как и о возникновении эпидемий после массовых отказов от вакцинации; данные объявляются математически ошибочными или подтасованными с целью оправдать необходимость вакцинации.
Отрицание роли вакцинации в снижении уровня заболеваемости. <#"822674.files/image002.jpg">
Рис.2 Соотношение возрастных групп
Отношение опрашиваемых к вакцинопрофилактике в целом. Считают ли это полезным, необходимым или относятся с недоверием. Больше половины опрошенных высказались за положительное отношение в вакцинации (рис 3).
Вакцинация от клещевого энцефалита: прививку
сделали 94% опрошенных, что показывает её востребованность. Прививки от гриппа
делаются большинством работодателей за счет предприятия, но строго по желанию самих
рабочих. 92% опрошенных сделали прививку от гриппа. (рис.4).
Рис.3 Отношение к вакцинопрофилактике
Рис. 4 Вакцинация от клещевого энцефалита и
гриппа
При вакцинации детей в младенческом возрасте
возникает проблема, связанная с недоверием родителей к вакцинам. При опросе
многие родители жаловались на то, что их недостаточно информировали о том,
какие прививки ставят их детям и возможных последствиях. Часто были вынуждены
ставить прививку по причине, что без вакцинации их ребенок не будет принят в
детский садик. Законом Российской Федерации № 157 «Об иммунопрофилактике
инфекционных болезней»: граждане имеют право на отказ от прививок (статья 5), а
прививки несовершеннолетним проводятся только с согласия родителей. Результаты
ответа на вопрос «Делали ли Вы прививки своим детям?» (рис.5).
Рис. 5 Делали ли Вы прививку своим детям
В настоящее время существует общественное противопрививочное движение антивакцинаторство, которое оспаривает эффективность, безопасность и правомерность вакцинации Движение антивакцинаторство пока не имеет большой в известности у опрашиваемых. Подавляющее большинство не знает о нем, и только 32% смогли ответить, что «Да, я знаю, про общественное противопрививочное движение антивакцинаторство, которое оспаривает эффективность, безопасность и правомерность вакцинации». Результат ответа на вопрос «Знаете ли Вы о движении «Антивакцинаторство?» (рис.6).
Результаты опроса «считаете ли Вы прививки
эффективными?», можно считать очень оптимистичными чем в целом по стране.
Выходит, что три из четырех считают, что прививки эффективны и их надо делать.
Если взять за основу проведение опроса Исследовательского центра портала Superjob.ru
в 2008г [15], результаты которого говорят том, что 57% респондентов высказались
против прививок. (Рис.7)
Рис.6 Знаете ли Вы о движении
"Антивакцинаторства"
Рис.7 Считаете ли вы прививки эффективными
Исходя из результатов опроса можно утверждать,
что даже те кто считает вакцинопрофилактику не эффективной, всё равно
пользуется ей и скорее всего будет ставить прививку своим детям, т.к. считают
что вакцинация не обходима для здоровья себя и своих детей.
Глава III.
Причины отказа от вакцинопрофилактики
Причины, по которым люди отказывались от вакцинопрофилактики всегда разные. По религиозным причинам, вопросам безопасности, недоверие к производителю вакцины или сотруднику медицинской службы.
На вопрос «По каким причинам вы отказываетесь от
прививок?» 70 % опрошенных отказывается от вакцинации по религиозным причинам,
20 из них считает, что прививки это грех, 30 % считает, что они опасны для
здоровья. (рис.8).
Рис. 8 Причины отказа от вакцинопрофилактики
Исходя из результатов опроса мы пришли к выводу,
что большинство людей отказывается по религиозным причинам, поэтому нужно вести
разъяснительную работу с населением. Я считаю, что нужно проводить санпросвет
работу и беседу с родителями об возможных последствиях при отсутствии
вакцинации.
Заключение
Системные проблемы вакцинопрофилактики:
· Отсутствие понятной населению государственной политики.
· Недооценка опасности, связанной со снижением уровня охвата вакцинацией.
· Отсутствие информационного обеспечения вакцинопрофилактики.
· Отсутствие достоверной статистики об инфекционной заболеваемости и о поствакцинальных осложнениях.
Изучив литературу и проведя исследования по данной теме, пришли к выводу, что население недостаточно информировано о возможных последствиях.
Население понимает что вакцинация одно из самых лучших средств, чтобы защитить себя и своих детей от инфекционных болезней.