IL-2 играет важную роль в реализации механизмов адаптивного иммунного ответа и продуцируется Т-хелперами 1-го типа (Th 1). Нами зафиксировано достоверное увеличение его содержания в СЖ и ВГЖ у больных ПОУГ относительно групп контроля и сравнения соответственно. Однако на системном уровне, в СК, этот цитокин не определялся. Необходимо отметить, что IL-2 статистически значимо в более высоких концентрациях и в 2 раза чаще встречался в тест-пробах СЖ пациентов основных групп, чем в контроле; концентрация медиатора в ВГЖ пациентов I группы была достоверно выше таковой во II группе. Подобные результаты были получены I. Chono et al. и Н.М. Агарковым и соавт. [12, 16].
IL-4 интраокулярно секретируется базофилами, а также Т-хелперами 2-го типа (Th 2). Медиатор индуцирует пролиферацию и дифференцировку Т- и В-лимфоцитов, снижает секрецию IL-1Я, TNF-a, IL-6, регулирует цитотоксическую активность и миграцию макрофагов, стимулирует секрецию колониестимулирующих факторов (CSF).
Рядом авторов продемонстрировано участие этого цитокина в процессах фиброзирования, характерных, в том числе, и для ПОУГ [6].
IL-4 выявлен нами только в тест-пробах ВГЖ пациентов с далеко зашедшей стадией ПОУГ, что было сопоставимо с результатами I. Chono et al., показавшими, что уровень содержания IL-4 был значительно выше в ВГЖ у больных с ПОУГ, чем у здоровых лиц [6, 16].
IL-6 в глазу человека секретируется базофилами, макрофагами, эпителием роговицы и конъюнктивы, стромой роговицы, сосудистым эндотелием, ^2-клетками. Цитокин регулирует уровень воспаления, секреторную активность плазматических клеток, ингибирует синтез IL-1 Я и TNF-a.
В литературе имеются доказательства участия IL-6 в патогенезе глаукомы: повышенные уровни его локальной продукции (в СЖ и ВГЖ) зафиксированы на продвинутых стадиях заболевания [17], в ряде исследований показано увеличение содержания цитокина в крови пациентов с начальной ПОУГ [14].
Нами не обнаружен IL-6 в биоматериале здоровых доноров, но определен в 41-46% образцов СЖ и в 25-33% случаев в ВГЖ основных групп, что позволяет думать о наличии локальной воспалительной реакции у пациентов с продвинутыми стадиями ПОУГ.
Также в качестве потенциального участника патогенеза глаукомы обсуждается роль IL- 7 - цитокина, стимулирующего гемопоэз.
IL-7 продуцируется фибробластами и стромальными костномозговыми клетками, обладает лимфангиогенной активностью [18], что представляет большой интерес, учитывая последние сообщения в литературе о наличии в глазу лимфатической системы и ее роли в патогенезе ПОУГ.
В нашем исследовании выявлено достоверное увеличение концентрации IL-7 в ВГЖ больных обеих исследуемых групп относительно группы сравнения, а также установлено значимое повышение концентрации медиатора в СЖ пациентов на далеко зашедшей стадии относительно группы контроля, что согласуется с данными Н.М. Агаркова и соавт., В.В. Черных и соавт. [6, 12].
Данный цитокин был обнаружен нами в 100% проб ВГЖ пациентов в концентрациях, значительно превышающих таковые в СК; это свидетельствует о его интраокулярной продукции и участии в патогенезе ПОУГ.
В большом количестве научных публикаций представлены подтверждения ключевой роли семейства цитокинов IL-17A в воспалительных или аутоиммунных, нейродегенеративных заболеваниях, таких как псориаз, ревматоидный артрит, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, рассеянный склероз, боковой амиотрофический склероз и глаукома. Полагают, что IL-17A инициирует заболевания, активируя глиальные клетки [19].
В нашей работе IL-17A не был выявлен в системном кровотоке ни в норме, ни в патологии; определялся приблизительно в трети проб СЖ больных (где его уровни были существенно выше, чем в контроле) и обнаружен в ВГЖ только у 13% пациентов с далеко зашедшей ПОУГ.
Полученные нами результаты согласовывались с данными Н.М. Агаркова и иных, В.В. Черных и иных, Л.Ю. Барычевой и иных [11, 12, 17].
Синтезируемый преимущественно макрофагами и некоторыми другими клетками организма IL-18 является провоспалительным медиатором, ключевым регулятором врожденного и адаптивного иммунного ответа, принадлежащим к семейству IL-1 цитокина. Экспериментально доказано, что экспрессия IL-18 увеличивается с возрастом в сетчатке и зрительном нерве мышей. Интравитреальная инъекция PEDF у мышей снижает потерю ГКС и слоя нервных волокон, замедляет распад зрительных функций и снижает экспрессию IL-18 в сетчатке и зрительном нерве [20].
По данным Н.М. Агаркова и соавт., концентрация IL-18 в СЖ у пациентов с развитой стадией глаукомы достоверно выше таковой у здоровых лиц [12].
В нашем исследовании данный медиатор в СЖ больных основных групп и в контроле не был обнаружен, однако определялся в 13% проб ВГЖ пациентов с далеко зашедшей ПОУГ в концентрации, значительно превышающей таковую в СК, что позволяло сделать заключение о его активной внутриглазной продукции. Уровень системной продукции IL-18 на продвинутых стадиях заболевания был достоверно выше, чем в норме.
Факторы некроза опухолей. Известно, что TNF-a обладает провоспалительной активностью, в глазу человека продуцируется макрофагами, Т- и В-клетками, эндотелием роговицы и конъюнктивы, трабекулярной сетью и базофилами. Получены многочисленные экспериментальные доказательства участия этого цитокина в патогенезе ПОУГ.
TNF-a определялся нами почти в половине исследуемых тест-проб СЖ пациентов обеих групп и только в ВГЖ 13% больных с далеко зашедшей глаукомой, однако в СЖ группы здоровых и ВГЖ группы сравнения данный медиатор обнаружен не был. Похожие результаты были представлены в работе Л.Ю. Барычевой и соавт. [11]. Также S. Balaiya et al. и N. Khalef et al. при исследовании ВГЖ у пациентов с ПОУГ было отмечено значимое повышение уровня TNF-a по сравнению с контролем (пациенты с сенильной катарактой) [21, 22].
В СК TNF-a выявлялся примерно с равной частотой и в сопоставимых концентрациях с таковыми контрольной группы, что согласуется с данными О.С. Слеповой и соавт. [14]. Таким образом, наши результаты свидетельствуют о локальной продукции TNF-a и являются подтверждением участия этого цитокина в патогенезе ПОУГ.
Хемоаттрактантные медиаторы
Роль хемокинов в развитии и прогрессировании глаукомы в настоящее время является предметом активных обсуждений.
IL-8/CXCL8 - провоспалительный хемокин, индуцирует хемотаксис и опосредует инфильтрацию нейтрофилов. Исследования in vitro показывают, что IL-8/CXCL8 негативно воздействует на ГКС посредством усиления экспрессии апоптотических генов [23]. Кроме того, известно, что хемокин вызывает патологическую активацию стенки эндотелия сосудов, способствуя повышению проницаемости гематоофтальмического барьера.
Так, В.В. Черных и соавт. выявлено значимое увеличение содержания IL-8/CXCL8 в СЖ и ВГЖ больных с развитой стадией ПОУГ относительно контроля [17].
В нашей работе в подавляющем числе тест-проб в СЖ содержание этого цитокина было повышено у больных обеих исследуемых групп, однако эти изменения были статистически значимы только во II группе. При исследовании ВГЖ IL-8/CXCL8 обнаружен только в тест-пробах пациентов с глаукомой, при этом данный медиатор выявлялся значительно чаще в группе с далеко зашедшей ПОУГ и в концентрациях, существенно превышающих таковые у больных с развитой стадией заболевания. Полученные нами результаты согласуются с данными Y. Takai et al., N. Khalef et al., T. Kokubun et al. [7, 22, 24], а также Z.S. Ulhaq, определивших значимое увеличение содержания IL-8/CXCL8 в ВГЖ у пациентов с ПОУГ по сравнению с группой контроля [25].
SDF-1a/CXCL12 - фактор, происходящий из стромальных клеток, в норме является гомеостатическим хемоаттрактантом, регламентирующим миграцию и хоминг лимфоцитов и моноцитов/гемопоэтических клеток в организме.
Единственным специфическим рецептором для данного цитокина является CXCR4, широко экспрессируемый в различных органах, в том числе и тканях глаза: их взаимодействие (SDF-1a и CXCR4) играет ключевую роль в процессах репарации при ишемическом поражении миокарда, нервов, печени и почек. Значительное увеличение экспрессии SDF-1a и его рецептора было обнаружено в сетчатке при компрессионном повреждении зрительного нерва в эксперименте на крысах, а также продемонстрированы антиапоптотические эффекты цитокина в отношении клеток сосудистого эндотелия при ишемически-реперфузионной травме [26, 27].
Нами впервые проведено исследование данного медиатора в рамках изучения цитокинового профиля при продвинутых стадиях ПОУГ. SDF-1a/CXCL12 определялся в 92100% проб СК пациентов и здоровых доноров, при этом уровень его системной продукции при ПОУГ был значительно выше, чем в контроле.
SDF-1a достоверно чаще (в 70-73% случаев) и в более высоких концентрациях выявлялся в СЖ пациентов по отношению к группе контроля; также отмечена тенденция к увеличению его содержания в СЖ больных с далеко зашедшей стадией ПОУГ.
Цитокин обнаружен нами во всех пробах ВГЖ пациентов, а его уровень был существенно выше такового группы сравнения.
Такое усиление локальной продукции SDF-1a, вероятно, является компенсаторным ответом, направленным на репарацию, при этом, учитывая его мощные хемоаттрактантные свойства, нельзя исключить, что повышение концентраций медиатора может привести к активной миграции и интраокулярному рекрутингу лейкоцитов и, как следствие, к усилению деструктивного процесса на продвинутых стадиях заболевания. Однако данное предположение нуждается в дальнейших целенаправленных исследованиях.
MCP-1/CCL2 участвует в активации и привлечении моноцитарных клеток к месту повреждения. Показано, что MCP-1/CCL2 способен как осуществлять нейропротекцию, так и оказывать нейродеструктивное воздействие на ГКС в эксперименте [28].
В нашем исследовании этот медиатор выявлялся в подавляющем большинстве проб на системном и локальном уровнях пациентов основных групп, контрольной группы и группы сравнения. Уровни системной продукции MCP-1/CCL2 при ПОУГ не отличались от таковых в контроле.
Напротив, в СЖ пациентов I и II групп концентрации MCP-1/CCL2 были повышены, однако при сравнительном анализе не было установлено статистически значимой разницы с контролем. Аналогичные результаты были получены при исследовании содержания этого цитокина в ВГЖ.
MIP-1Я/CCL4 является гомеостатическим хемоаттрактантом, контролирует миграцию преимущественно естественных киллеров и моноцитов. В нашем исследовании уровень MIP- 1Я/CCL4 в СК у больных глаукомой был сопоставим с таковым в группе контроля.
Содержание MIP-1Я/CCL4 в СЖ в обеих исследуемых группах было достоверно увеличено в сравнении с контролем (частота выявляемости превышала 85%). В ВГЖ группы сравнения данный медиатор не обнаруживался, однако был определен нами в трети тест-проб пациентов с ПОУГ на далеко зашедших стадиях, что согласовывалось с данными работы T. Kokubun et al., также наблюдавших увеличение интраокулярной продукции MIP-1Я/CCL4 при ПОУГ по отношению к контрольной группе [7].
Роль RANTES/CCL5, хемокина, играющего активную роль в привлечении преимущественно лимфоцитов в очаг воспаления, так же как SDF-1a, наименее изучена в аспекте патогенеза глаукомы - в литературе найдены единичные публикации, посвященные этой проблеме.
Так, B. Burgos-Blasco et al. не было обнаружено значимых отличий в локальной продукции RANTES/CCL5 (как в СЖ, так и в ВГЖ) при ПОУГ по сравнению с контролем [4], однако нами выявлены достоверные разнонаправленные сдвиги в содержании этого цитокина в СК, СЖ и ВГЖ пациентов.
В нашем исследовании содержание RANTES/CCL5 в СК всех больных было значительно снижено относительно контроля.
Статистически значимо чаще и в более высоких концентрациях RANTES/CCL5 выявлялся в СЖ пациентов по отношению к группе контроля; также отмечен достоверный рост его уровня в СЖ больных с ПОУГ на далеко зашедшей стадии.
Eotaxin/CCL11 относится к CC классу хемокинов, в глазу секретируется тучными клетками. Накоплены данные, свидетельствующие о профибротических эффектах этого медиатора при ряде патологий [29-31], однако в аспекте развития ПОУГ, особенно продвинутых стадий заболевания, Eotaxin остается малоизученным.
Так, B. Burgos-Blasco et al. было установлено, что у больных ПОУГ в СЖ и ВГЖ содержание Eotaxin/CCL11 значимо не отличалось от контроля [4].
Нами Eotaxin/CCL11 выявлен практически в 96-100% проб всех исследуемых биологических жидкостей, его концентрации в СК и СЖ пациентов как основных групп, так и группы контроля были сопоставимы, что частично согласовывалось с данными B. Burgos- Blasco et al. [4], однако его содержание в ВГЖ больных с глаукомой было статистически значимо выше, чем в группе сравнения.
Факторы роста GM-CSF относится к группе гранулоцитарно-макрофагальных колониестимулирующих факторов. Стимулирует рост и развитие гематопоэтических клеток таких линий, как: гранулоциты, макрофаги, эозинофилы, а в комбинации с эритропоэтином участвует в дифференцировке эритроцитов. В ответ на медиаторы воспаления (IL-1, IL-6, TNF-a или LPS) GM-CSF продуцируется множеством различных типов клеток. Экспрессия GM-CSF может быть ингибирована IL-10, IFNy и IL-4.
В.В. Черных и соавт. установили достоверное снижение уровней GM-CSF в ВГЖ у больных с развитой стадией ПОУГ относительно показателей у пациентов с неосложненной катарактой [6]. В нашем исследовании в ВГЖ пациентов с развитой ПОУГ и группы этот цитокин не был обнаружен, однако определялся в 13% проб больных с далеко зашедшей стадией глаукомы. Также нами выявлена тенденция (p=0,06) к увеличению GM-CSF в СЖ пациентов II группы по отношению к контролю. Эти находки позволяют думать об участии GM-CSF в патогенезе ПОУГ и нуждаются в целенаправленных исследованиях на большом количестве клинического материала.