Учитывая эти свойства липосом, в настоящее время созданы липосомальные формы целого ряда ЛВ: антибиотиков, сульфаниламидов, противораковых препаратов. Например, для гентамицина, пенциллина, канамицина, стрептомицина разработаны липосомальные формы.
Эффективность липосом доказана при лечении паразитарных заболеваний (лейшманиоз) на мышах. Препарат солюсурьмин в липосомах оказался в 200 раз эффективнее обычного. Также и противомалярийные препараты в липосомах оказались более эффективными.
Ампициллин в липосомах оказался в 90 раз эффективнее обычного. Отмечено увеличении активности хлорамфеникола в липосомах. Если обычной препарат клафоран неспособен проникать в лейкоциты человека и в силу этого не эффективен при внутриклеточном инфицировании, то липосомальный пр-т накапливается в лейкоцитах и лимфоузлах и эффективно уничтожает бактерии при минимальных концентрациях - 1-10мкг/мл.
Т.о., использование липосом дает возможность повысить эффективность лечения, т.к. есть возможность уменьшить дозы, уменьшить аллергические и иммунные реакции.
Очень перспективным направлением является использование липосом для трансдермального переноса ЛВ. Многочисленными исследованиями показана способность липосом ускорять проникновение веществ через кожу. Так, при лечении различных аллергических заболеваний кожи рациональным оказалось использованние кортикостероидов, антибиотиков, сульфаниламидов в виде липосом. При нанесении крема или мази с этими липосомами достигалась эффективность лечения, т.к. всасывание липосомальных препаратов через кожу повышалась в 5-10 раз.
Особенно переспективы липосомы при лечении сахарного диабета. Введение инсулина, пока только в виде п/к инъекций, со временем приводит к тяжелым осложнениям. Пероральный прием неприемлем - разрушения в ЖКТ. Поэтому создание пероральной формы инсулина является актуальным.Уже созданы в ряде институтов (Харьков и институт биохимии Руз) липосомальные формы инсулина, которые проходят клинические исследования.
Так, в институте биохимии АНРУз получены липосомы сахароснижающего действия на основе сульфатидов и цереброзидов (компонентов цитоплазматических мембран) и доказана их эффективность при лечении сахарного диабета. Созданы липосомы на основе лецитин-холестерина (7:1) с инсулином. Кроме того, включение инсулина в липосомы дает возможность пролонгировать действие. С каждам годом номенклатура липосомальных препаратов растет.
Фирма "Реем" (ФРГ) стала выпускать липосомальный препарат для борьбы с расширением вен. Итальянская фирма "Фидия" выпустила лекарственный препарат "липосом-форте" для стимуляции гипофиза (вводится в/в). Фирма "Виторган" (ФРГ) выпустила липосомальный гомеопатический препарат найпарадент для лечения пародонтоза, В США одна из фирм уже проводит клинические испытания препарата Амфотерицина В в липосомах для лечения лейшманиоза и грибковых заболеваний, разработаны липосомальные бронхолитические препараты. Также работают над созданием других липосомальных лек. пр-тов. Один из них липотраст, представляющий собой вераграфин, заключённый в липосомы (применяемый в рентгенодиагностике), уже проходит клинические испытания, препарат липин, предназначенный для снижения уровня продуктов окисления в тканях внутренних органов и в крови. В нашей республике в Институте биохимии ведутся разработки по созданию липосомальной формы вакцины гриппа.
Еще одна перспективная область применения липосом - это косметология. Созданы многочисленные косметические средства на основе липосом.
Одной из первых, в 1986 г, выпустила такой препарат французская фирма "Кристиан Диор" под названием "Каптюр". "Каптюр" представляет собой желе (мазь), содержащую множество липосом, в которых находится экстракт тимуса (железы внутренной секреции) и пептиты (коллаген и эластин). Липосомы с активными веществами при нанесении мази на кожу попадают в поры и затем проникают в клетки, точнее сливаются с клеточной оболочкой и добаляют ей активные вещества и одновременно увлажняют саму оболочку, тем самым замедляют старение кожи. Поэтому крем применяется для омоложения кожи лица.
В России получен крем-гель “Геликс”, содержащий липосомы для омоложения кожи лица.
Пути получения липосом
Вспомогательные вещества
Для формирования липосом используют различные фосфолипиды, полученные из растительных или животных клеток. Например яичный или соевый лецитин, холестерин, другие специфические фосфолипиды: кардиолипин, сульфатиды и т.д. Кроме того, применяются синтетические вещества N-пальмитилсерин, N-пальмитинглицин, фосфатидилхолин. Например, для получения липосом адриамицина была использована смесь фосфатидилхолина, холестерина и сульфатида в соотношении 5:4:1
Технология
До недавнего времени существовало около 20 способов приготовления липосом. Выбор метода зависит от цели, которая при этом преследуется. Наиболее современным и оптимальным является метод, предложенный в 80-х годах в США - метод, в основе которого лежит замораживание липосом с включенными в них ЛВ (иногда многократное с последующим оттаиванием) и последующей сушкой в присутствии различных криопротекторов (веществ, предохраняющих липосомы от разрушения при замораживании, размораживании и сушке). Для этого обычно используют различные сахара (трехалоза, маннит, сахароза, глюкоза). Этот метод - метод Бангема. Преимущество этого метода в том, что он позволяет готовить липосомы без органических растворителей и без использования ультразвука (что неблагоприятно отражается на их качестве). Так были получены липосомы с инсулином-J-125. Для этого использовали яичный лецитин и холестерин (7:1). Получали липосомы методом Бангема. Для этого сначала готовили стандартный раствор фосфолипидов (лецитин+холестерин) в четырехлористом углероде и с помощью роторного выпарителя освобождались от растворителя. К хорошо высушенной смеси добавляли буферный раствор ЛВ, перемешивали (мешалкой) в течение 10минут. После этого систему замораживали в жидком азоте (-193 С). Замороженный раствор помещали в камеру сублимационной сушилки и при вакууме (криопротектор 1% сахароза, 1% крахмал) высушивали. После чего очищали липосомы от невключенного в них инсулина путем центрифугирования при 10 тыс.об/мин.
Получение липосом со строфантидином ацетатом. В качестве липидной оболочки были использованы лецитин и кардиолипин специфический липид сердечной мышцы для обеспечения направленного транспорта препарата в область сердечной мышцы. Липосомы получали методом Бангема. Для этого сначала готовили растворы липидов (лецитин+кардиолипин). При этом сначала получали 10% раствор лецитина и 0,5% раствор кардиолипина в спирте. Затем сгушали эти растворы с помошью роторного выпарителя и добавляли раствор строфантидина ацетата. Перемешивали с помощью магнитной мешалки и подвергали воздействию ультразвука в течение 10 мин.
Применение и проблемы создания липосомальных препаратов
Липосомы можно вводить перорально, трансдермально и парентерально, при этом в большинстве случаев отмечено повышение терапевтического эффекта лекарственных веществ и пролонгированное действие, что частично обусловлено задержкой лекарственных веществ в системе циркуляции и замедленным разрушением ферментами плазмы.
Одной из важных проблем в создании устойчивых липосомальных лекарственых форм является стерилизация полученных препаратов. Наиболее перспективным путём стерилизации является криорадиационная стерилизация с программируемым замораживанием. Метод заключается в замораживании липосомальной дисперсии, по специальной программе, радиационное облучение замороженной системы стерилизирующей дозой и размораживанием. Это позволяет обеспечить надежную стерилизацию и стабильность физико-химических и биологических свойств как самих липосом, так и лекарственных вешеств.
Широкое использование липосомальных препаратов сопряжено с решением целого ряда проблем, среди которых основными являются:
- выбор рационального способа введения;
- выбор оптимальных условий стерилизации;
- разработка методов промышленного получения фосфолипидов;
- внедрение простых и экономичных методов получения липосом;
- обеспечение стабильности липосом при их хранении.
ЛИТЕРАТУРА
1. Иванова А.А. Технология лекарственных форм, М.-1991.т.2,с.12-14.
2. Кобринский Г.Д. Липосомы-транспортеры лекарств. М: Знание 1989, вып. 2, серия "Медицина"
3. Антонов В.Ф. Липосомы. Применение в биологии и медицине. М.-1985.
4. Эргашева М.Ж., Темиров Б.С., Аминов С.Н. Изучение трансдермального переноса в составе липосом\\ Киме ва фармация.- 1993.-N6.- с.22-25
6. Акрамова Г.С. и др. Вопросы стабилизации липосомальных препаратов с антидиабетическим действием // Кимё ва фармация.-1993.-N6.-с. 45-47
7. Кивман Г.Я., Гуляев А.Е. " Преимущество липосомальных форм химиотерапевтических препаратов, перед обычными в действий на бактерии локализованные внутриклеточно // Хим. Фарм. журн.- 1992.- N6.- с.4-8.
8. Чуешов В.И., Чернов М.Ю. и др. Получение липосом с различным лекарственными веществами и изучение их стабильности //Фармацевтический журн.- 1991.- N3.- с.68-71.