Изучение некоторых биологических свойств культуры вида Bacillus licheniformis
Морозова А.К., Сверкалова Д.Г.
Bacillus licheniformis - грамположительные, мезофильные бактерии, подвижные, факультативная анаэробной (в отличие от других микобактерий, которые обычно аэробные) и тесно связаны с Bacillus subtilis [1]. Оптимального роста температуры составляет около 50 ° C, хотя они способны выжить при гораздо более высоких температурах. Оптимальная температура для ферментативной секреции составляет 37 °С. Могут существовать в форме спор, чтобы противостоять суровых условиям, или в вегетативном состоянии, когда условия являются благоприятными.
B. licheniformis является частью группы subtilis вместе с Bacillus subtilis и Bacillus pumilus. Общеизвестно, что эти бактерии вызывают пищевые отравления и порчи продуктов. B. licheniformis также известен как агент, загрязняющий молочные продукты. Вспышки отравлений пищевого происхождения обычно включают случаи употребления в пищу вареного мяса и овощей, сырого молока и детского питания промышленного производства, загрязненных B. licheniformis [2].
Bacillus licheniformis - одна из самых важных бактерий в производстве промышленных ферментов, обладает большими объемами секреции щелочной сериновой протеазы, альфа амилазы[3].
Бактерия, обычно встречаются в почве в споровой форме. Ее находят на перья птиц в местах обитания птиц как воздушных, сухопутный, так и водных видов. bacillus licheniformis фермент штамм
Были изучены морфологические, тинкториальные, культуральные и некоторые биохимические свойства штамма B. licheniformis полученного из музея кафедры Микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарносанитарной экспертизы УГСХА им. П.А. Столыпина.
Материалы и методы. Набор для окраски по Граму, среды Гисса, 0,7% мясопептонный агар, 1,2 % мясопептонный агар (ГРМ), мясопептонный бульон (ГРМ), 3% раствор перекиси водорода, 1 % раствор тетраметилпарафенилендиамина дигидрохлорида. световой микроскоп МБИ3, бактериологическая петля, цифровая камера-окуляр для микроскопа модель DCM 130, термостат ТС 1/80 СПУ, штативы, пробирки, пробки, предметные стекла, вода дистиллированная, автоклав ВК-75, штамм B. licheniformis ( музея кафедры «Микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы» УГСХА им. П.А. Столыпина). Исследование проводили стандартными бактериологическими методами, многократно апробированном сотрудниками кафедры МВЭиВСЭ ФГБОУ ВО Ульяновской ГСХА [4-9].
Суточную бульонную культуру B. licheniformis высеяли на мясопептонный агар (ГРМ), в пробирки со средами Гисса, полужидкий агар. Посевы культивировали при 30 єС сутки, затем учитывали некоторые результаты: реакция сред Гисса, подвижность (рост в полужидком агаре), характер роста на мясопептонном агаре. Затем были поставлены по стандартным методикам тесты на определение способности продуцировать ферменты каталазу и оксидазу, приготовлен мазок и окрашен по Граму.
В результате проведенных исследований, установлено, что исследуемая культура B. licheniformis каталазоотрицательная, оксидазоотрицательная (рисунок 1). Глюкозо-, лактозо-, мальтозо-, маннит-, инулин-положительная, сорбит-, дульцит-отрицательная (рисунок 2). Штамм B. licheniformis неподвижен, рост в полужидком ангаре по уколу равномерно по всей высоте столбика, что говорит о том, что данной культура является факультативном анаэробом (рисунок 3).
В мазке, окрашенном по Граму культура представлена грамотрицательными палочками расположенные одиночно, попарно или цепочкой, эндоспоры овальные, расположены центрально.
На мясопептонном агаре через сутки культивирования образует серовато-белые морщинистую форму колоний с волнистыми краями, слегка врастающими в агар, вязкой консистенции (рисунок 4).
Рисунок 1 - Отрицательный результат
Рисунок 2 - Результат определения простановки теста на наличие ферментов ферментативных свойств B. каталазы и оксидазы у культуры B. licheniformis на ряду Гисса licheniformis
Рисунок 3 - Результат подвижности B. Licheniformis определения
Рисунок 4 - Колонии B. Licheniformis на мясопептонном бульоне
На мясопептонном бульоне рост сопровождается обильным равномерном помутнением среды, образованием белого мелкозернистого осадка, при встряхивании поднимающегося косой.
Выводы
В результате проведенной работы, установлено, что штамм B. licheniformis по исследуемым культуральным, морфологическим, тинкториальным и биохимическим свойствам в целом, является типичным представителем вида B. licheniformis.
Список используемых источники
1 Missouri University of Science and Technology [Электронный ресурс] -
Режим доступа: http://web.mst.edu/~microbio/BIO221_2005/B_lichenformis.htm
2. Salkinoja-Salonen S., Vuorio R., Andersson M.A., Kдmpfer P., Andersson M.C., Honkanen-Buzalski T., and Scoging A.C. Toxigenic Strains of Bacillus licheniformis Related to Food Poisoning.Appl Environ Microbiol. 1999 October; 65(10): 4637-4645.
3. The Universal Protein Resource [Электронный ресурс] - Режим доступа: http://www.uniprot.org/uniprot/P00780
4. Садртдинова Г.Р. Сравнительная эффективность методов выделения бактериофагов Klebsiellaoxytoca/ Г.Р. Садртдинова, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин/ Вестник Ульяновской сельскохозяйственной академии.-№4 (32).- С.68-72.
5. Садртдинова Г.Р. Выделение бактериофага бактерий
Klebsiellaoxytoca под действием рентгеновского облучения/ Г.Р.Садртдинова, Д.А.Васильев, С.Н.Золотухин // Вестник Ульяновской сельскохозяйственной академии.-№1 (33).- С.76-81.
6. Ефрейторова Е.О., Пульчеровская Л.П., Васильев Д.А. Изучение биологических свойств бактерий serratia marcescen выделенных из пищевых продуктов и объектов окружающей среды / Научный вестник Выпуск №13.г. Дмитровград. Технологический институт филиал ФГБОУ ВПО «Ульяновская