Ферменты в тканях ободочной кишки у разновозрастных поросят
М.Г. Терентьева, Н.В. Мардарьева, О.П. Нестерова
Чувашская государственная сельскохозяйственная академия
В статье представлены результаты исследований активности аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, а-амилазы, щелочной и кислой фосфатаз в тканях наружной и внутренней ободочных кишок у поросят крупной белой породы, выращенных в условиях свинокомплекса. Установлены характер и интенсивность возрастных изменений у хрячков и хрячков-кастратов в возрасте 1, 7, 14, 21, 28, 60, 90, 120 и 180 суток. В тканях наружной ободочной кишки наиболее интенсивные возрастные изменения активности АлАТ выявляются в молозивно-молочной (уменьшается на 40,4%) и в третьей молочной (увеличивается в 1,6 раза) фазах питания; уровень АсАТ фазы питания как молозивно-молочная (уменьшается на 42,3%) и третья дефинитивная (возрастает в 1,5 раза); активность а-амилазы -- в молочно-молозивной фазе (повышается в 2,5 раза); активности ЩФ -- во второй (увеличивается в 1,9 раза) и в третьей фазах молочного питания (снижается на 50,1%) и в первой фазе дефинитивного питания (возрастает в 1,9 раза). В тканях внутренней ободочной кишки изменения активности ферментов: АлАТ обнаруживаются в первой молочной (падает на 61,9%), в третьей молочной (увеличивается в 1,6 раза) и в первой дефинитивной (повышается в 2,4 раза) фазах питания; АсАТ -- в первой фазе молочного питания (снижается на 68,4%) и в первой фазе дефинитивного питания (увеличивается в 1,6 раза); а-амилазы снижается во второй фазе молочного питания (на 47,1%) и повышается в третьей (в 1,8 раза) и четвертой (в 1,9 раза) фазах дефинитивного питания; ЩФ увеличивается в первой фазе молочного питания (в 1,6 раза) и уменьшается во второй фазе молочного питания (на 52,8%); КФ в первую молочную повышается соответственно в 3,7 и в 2,6 раза и первую дефинитивную падает на 75,4% и на 64,2%.
Ключевые слова: активность ферментов, аланинаминотрансфереза, аспартатаминотрансфераза, а-амилаза, щелочная и кислая фосфатазы, поросята, крупная белая порода свиней, свиноферма, свинокомплекс
Abstract
FERMENTS IN THE COLON TISSUES OF DIFFERENT AGE PIGLETS
M.G. Terentyeva, N.V. Mardareva, O.P. Nesterova
Chuvash state agricultural Academy
The article presents the results of research activity of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, a-amylase, alkaline and acid phosphatases in the tissues of the outer and inner colon intestines of pigs of large white breed, grown in a pig. Installed the nature and intensity of age-related changes in boars and boars-castrated at the age of 1, 7, 14, 21, 28, 60, 90, 120 and 180 days. In the outer tissues of the colon the most intense age-related changes in Alt activity detected in molozivno-milk (reduced 40.4%) and third dairy (increases 1.6 times) of phases of supply; the level of ASAT -- phase power as molozivno-milk (reduced 42.3%) and definitive (increased 1.5 times); the activity of a-amylase in milk- molozivno phase (increased 2.5 times); the activity of alkaline phosphatase in the second (an increase of 1.9 times) and in the third phase of milk feeding (reduced by 50,1%) in the first phase of the definitive power (increasing by 1.9 times). In the inner tissue of the colon changes in the activity of enzymes of Alat is found in the first breast (falls to 61.9 per cent), in the third dairy (increases 1.6 times) and the first definitive (increased 2.4 times) the power phases; ASAT -- in the first phase of milk feeding (reduced 68.4%) and in the first phase of the definitive power (increase in 1.6 times); a-amylase is reduced in the second phase of milk feeding (47.1%) and increased in the third (1.8 times) and fourth (1.9 times) phases definitive power; Alkaline phosphatase is increased in the first phase of milk feeding (1.6-fold) and decreases in the second phase of milk feeding (52.8%); KF first milk increased respectively by 3.7 and 2.6 times and the first definitive falls to 75.4 per cent and 64.2%.
Key words: ferments activity, alaninaminotransferase, aspartataminotransferase, a-amylase, alkaline phosphatase, acid phosphatase, piglets, big white swine breed, pigfarm, swine rearing complex
M.G., Mardareva, N.V., Nesterova, O.P., Efremova, G.M., Kuznetsova, T.V. Activist y-glutamiltransferzy tkaninach m ASV resnova of krauledat. Bulletin of Sumy national agrarian University. 2016. No. 5(29). P. 187--190.
В соответствии с теорией о системогенезе, предложенной П.К. Анохиным [1], и развитием этого учения в отношении сельскохозяйственных животных В.Ф. Лысовым [3], в каждой фазе, этапе, периоде онтогенеза происходит развитие именно тех структурно-фунциональных систем, которые обеспечивают приспособление животного организма к постоянно изменяющимся условиям внутренней и внешней среды.
Объективными индикаторами структурно-химического совершенствования внутренних органов в онтогенезе у животных являются ферменты, которые, включаясь в различные обменные процессы в клетках и тканях органов, отражают становление их структуры и свидетельствуют об уровне активности физиологических процессов в них. К таким ферментам относятся аланинаминотрансфераза (АлАТ), аспартатаминотрансфераза (АсАТ), а-амилаза, щелочная (ЩФ) и кислая (КФ) фосфатазы.
В предыдущих наших работах были изложены результаты исследований названных ферментов в тканях разных органов [5; 7--9] и мышц [10; 11] у поросят крупной белой породы и крольчат разных возрастов, выращенных в условиях учебно-научного центра ФГБОУ ВО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия».
Общеизвестно, что такие внешние факторы, как кормление, содержание и уход, значительно влияют на рост и развитие молодняка сельскохозяйственных животных. В этом направлении опубликованы многочисленные работы, выполненные методами зоотехнических исследований. Вместе с тем очень скудны исследования, вскрывающие влияние внешних условий на интерьерные показатели растущих животных.
В настоящей статье, в продолжении предыдущей работы, в целях установления влияния новых условий выращивания поросят на структурно-химическое совершенствование тканей ободочной кишки с возрастом поросят, исследованы и представлены параметры активности изучаемых ферментов в тканях наружной и внутренней ободочных кишок у поросят крупной белой породы, полученных в условиях свинокомплекса ОАО «Вурнарский мясокомбинат» Вурнарского района Чувашской Республики. В этом хозяйстве, в отличие от условий свинофермы, производственные процессы механизированы и автоматизированы, строго соблюдают все необходимые ветеринарно-санитарные и зоотехнические требования, в кормлении поросят используют престартеры, премикси, биологически активные кормовые добавки промышленного производства, отъем поросят проводят в четырехнедельном возрасте, двухнедельных хрячков кастрируют.
Методика исследований. Для исследований использовали поросят крупной белой породы в возрасте 1, 7, 14, 21, 28, 60, 120 и 180 суток, выращенных условиях свинокомплекса ОАО «Вурнарский мясокомбинат» Вурнарского района Чувашской Республики. Эвтаназию поросят и все манипуляции выполняли в соответствии с «правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» [6]. Патологоанатомическое вскрытие проводили по методу Шора [2]. Ободочную кишку извлекали из брюшной полости, очищали от содержимого, промывали холодным физиологическим раствором, кишку разделяли на наружную и внутреннюю и пробы их тканей замораживали в жидком азоте для дальнейших исследований. Активность ферментов в тканях ободочных кишок определяли по методикам, описанным в справочном пособии, изданном под ред. Б.Д. Каль- ницкого (1997) [4]. Использовали наборы реактивов ООО «Витал Диагностикс» (Санкт-Петербург).
Результаты исследований. У односуточных поросят, находящихся в фазе молозивного питания, в тканях наружной и внутренней ободочных кишок уровень фермента АлАТ относительно высокий и примерно равный (табл. 1).
Таблица 1. Возрастные изменения активности ферментов в тканях наружной и внутренней ободочных кишок у поросят
|
Возраст, сут |
1 |
7 |
14 |
21 |
28 |
60 |
120 |
180 |
|
|
АлАТ, мкмоль/г ¦ час |
|||||||||
|
Наружная |
19,8 ± ± 0,94 |
11,8 ± ± 0,79 |
8,5 ± ± 0,48 |
9,4 ± ± 0,43 |
15,6 ± ± 0,82 |
16,8 ± ± 0,64 |
23,5 ± ± 1,27 |
21,6 ± ± 1,19 |
|
|
Внутренняя |
18,1 ± ± 1,07 |
27,3 ± ± 2,11 |
10,4 ± ± 0,61 |
9,9 ± ± 0,57 |
16,0 ± ± 0,79 |
16,5 ± ± 0,85 |
39,3 ± ± 2,88 |
38,1 ± ± 3,06 |
|
|
АсАТ, мкмоль/г ¦ час |
|||||||||
|
Наружная |
18,2 ± ± 1,06 |
10,5 ± ± 0,43 |
9,7 ± ± 0,47 |
10,9 ± ± 0,34 |
14,5 ± ± 0,72 |
18,9 ± ± 0,88 |
24,1 ± ± 7,96 |
36,5 ± ± 2,16 |
|
|
Внутренняя |
20,8 ± ± 2,07 |
31,3 ± ± 2,34 |
9,9 ± ± 0,28 |
10,5 ± ± 0,53 |
18,2 ± ± 0,96 |
29,5 ± ± 1,32 |
38,5 ± ± 2,34 |
49,6 ± ± 3,09 |
|
|
а-амилазы, мг/(с ¦ г) |
|||||||||
|
Наружная |
0,073 ± ± 0,013 |
0,182 ± ± 0,012 |
0,239 ± ± 0,011 |
0,233 ± ± 0,014 |
0,257 ± ± 0,017 |
0,199 ± ± 0,012 |
0,251 ± ± 0,017 |
0,354 ± ± 0,037 |
|
|
Внутренняя |
0,254 ± ± 0,021 |
0,231 ± ± 0,011 |
0,338 ± ± 0,026 |
0,179 ± ± 0,009 |
0,192 ± ± 0,011 |
0,137 ± ± 0,013 |
0,234 ± ± 0,011 |
0,491 ± ± 0,031 |
|
|
ЩФ, мкмоль/г ¦ час |
|||||||||
|
Наружная |
149,0 ± ± 7,9 |
157,9 ± ± 9,4 |
175,4 ± ± 11,2 |
91,1 ± ± 6,8 |
45,5 ± ± 3,8 |
88,3 ± ± 5,6 |
79,8 ± ± 3,8 |
78,0 ± ± 5,3 |
|
|
Внутренняя |
53,4 ± ± 5,3 |
60,3 ± ± 3,3 |
97,7 ± ± 5,1 |
46,2 ± ± 3,1 |
52,1 ± ± 4,3 |
77,6 ± ± 4,9 |
87,5 ± ± 5,8 |
76,4 ± ± 3,9 |
|
|
КФ, мкмоль/г ¦ час |
|||||||||
|
Наружная |
3,2 ± ± 0,11 |
3,6 ± ± 0,19 |
13,3 ± ± 1,06 |
14,9 ± ± 1,13 |
12,6 ± ± 0,97 |
3,1 ± ± 0,14 |
2,8 ± ± 0,17 |
2,8 ± ± 0,11 |
|
|
Внутренняя |
3,9 ± 0,09 |
3,7 ± 0,17 |
9,7 ± 0,72 |
9,0 ± 0,59 |
9,2 ± 0,83 |
3,3 ± 0,17 |
2,9 ± 0,12 |
3,1 ± 0,12 |
Через семь суток, в молозивно-молочной фазе, в тканях наружной ободочной кишки активность фермента падает значительно, на 40,5%, р < 0,001. В тканях внутренней ободочной кишки, наоборот, она существенно возрастает, в 1,5 раза, р < 0,01. В последующие семь суток жизни поросят, в первой молочной фазе, у двухнедельных, в тканях наружной ободочной кишки величина фермента продолжает снижаться достоверно, на 28,0%, р < 0, 01. В этой фазе она значительно уменьшается и в тканях внутренней ободочной кишки, на 61,9%, р < 0,001. Во второй молочной фазе питания, у трехнедельных поросят, активность АлАТ в тканях обеих кишок сохранятся на уровне двухнедельных. В третьей молочной фазе, у четырехнедельных поросят, активность исследуемого фермента существенно увеличивается и в тканях наружной ободочной (в 1,7 раза, р < 0,001) и внутренней ободочной (в 1,6 раза, р < 0,001) кишок. У двухмесячных поросят, в фазе первого дефинитивного питания, активность фермента с их возрастом изменяется не достоверно, колеблется на уровне четырехнедельных в тканях обеих ободочных кишок. В течение последующих двух месяцев жизни поросят, во второй дефинитивной фазе питания, к четырехмесячному возрасту, активность фермента в тканях обеих ободочных кишок повышается: наружной ободочной -- в 1,4 раза, р < 0,01, а в тканях внутренней ободочной -- в 2,4 раза, р < 0,001. С четырехмесячного возраста поросят активность АлАТ в тканях обеих ободочных кишок стабилизируется. Вместе с тем у четырех- и шестимесячных поросят в тканях внутренней ободочной кишки уровень исследуемого фермента выше, чем в тканях наружной ободочной, примерно в 1,7 раза, р < 0,01.
Активность АсАТ у односуточных поросят, в фазе молозивного питания, в тканях обеих ободочных кишок определяется на одинаковом уровне. Через семь суток жизни поросят в тканях наружной ободочной кишки активность этого фермента снижается, на 42,3%, р < 0,001, а в тканях внутренней ободочной кишки, наоборот, увеличивается в 1,5 раза, р < 01. В первой и во второй молочных фазах питания поросят в тканях наружной ободочной кишки уровень АсАТ существенно не изменяется и колеблется на уровне семисуточных. В тканях внутренней ободочной кишки к двухнедельному возрасту поросят активность АсАТ снижается на 68,4%, р < 0,001. В первой и во второй молочных фазах питания она сохраняется стабильно на относительно низком уровне. В третьей молочной фазе, у четырехнедельных, активность АсАТ достоверно повышается и в тканях наружной ободочной (1,3 раза, р < 0,01) и в тканях внутренней (в 1,7 раза, р < 0,001). К двухмесячному возрасту, в первой дефинитивной фазе питания, активность фермента в тканях обеих ободочной кишок также возрастает: в наружной ободочной -- в 1,3 раза, р < 0,01 и во внутренней ободочной -- в 1,6 раза, р < 0,001. В последующем она достоверно увеличивается: у четырехмесячных соответственно в 1,3 раза, р < 0,05 и в 1,5 раза, р < 0,01 и у шестимесячных -- соответственно в 1,5 раза, р < 0,01 и 1,3 раза, р < 0,05. Вместе с тем уровень фермента в тканях внутренней ободочной кишки достоверно выше, чем в тканях наружной ободочной: в возрасте 7 суток, в 2,9 раза, р < 0,001; 28 суток -- в 1,3 раза, р < 0,05; 2 месяца -- в 1,6 раза, р < 0,001; 4 месяца -- в 1,6 раза, р < 0,01 и 6 месяцев -- в 1,4 раза, р > 0,01.
Поросята рождаются с разной активностью а-амилазы в тканях наружной и внутренней ободочных кишок. У односуточных поросят активность фермента в тканях наружной ободочной кишки относительно низкая, а в тканях внутренней ободочной кишки у поросят этого возраста она превышает таковой в тканях наружной в 3,5 раза, р < 0,001. К недельному возрасту активность а-амилазы в тканях наружной ободочной кишки возрастает в 2,5 раза, р < 0,001, а в тканях внутренней ободочной кишки величина фермента не изменяется, сохраняется на уровне односуточных. В первой фазе молочного питания поросят, у двухнедельных, активность а-амилазы увеличивается в тканях обеих ободочных кишок: наружной ободочной -- в 1,3 раза, р < 0,05 и внутренней ободочной -- в 1,5 раза, р < 0,01. В последующем, во второй и третьей фазах молочного питания, у трех- и четырехнедельных поросят, активность фермента в тканях наружной ободочной кишки не изменяется, сохраняется на уровне двухнедельных.
В тканях внутренней ободочной кишки у трехнедельных поросят активность фермента падает существенно, на 47,1%, р < 0,001. Такой же уровень фермента в тканях внутренней ободочной кишки, как у поросят предыдущего возраста, сохраняется и у четырехнедельных.
Активность исследуемого фермента в фазе первого дефинитивного питания поросят, у двухмесячных, в тканях обеих ободочных кишок достоверно падает: наружной ободочной -- на 22,6%, р < 0,05, и внутренней ободочной -- на 28,7%, р < 0,05.
В последующие возрастные сроки поросят, у четырех- и шестимесячных, активность а-амилазы в тканях обеих ободочных кишок повышается: у четырехмесячных соответственно в 1,3 раза, р < 0,05, и 1,4 раза, р < 0,05, и у шестимесячных соответственно -- в 1,8 раза, р < 0,001, и 2,9 раза, р < 0,001.
Расчеты показывают, что активность а-амилазы в тканях внутренней ободочной кишки поросят достоверно выше, чем в тканях наружной ободочной в возрастах: 1 сутки -- в 3,5 раза, р < 0,001; 7 суток -- в 1,3 раза, р < 0,05; 14 суток -- в 1,4 раза, р < 0,01 и 180 суток -- в 1,4 раза, р < 0,05 и достоверно ниже в возрасте 21 сутки на 23,2%, р < 0,05; 28 суток -- на 23,3%, р < 0,05 и 60 суток -- на 31,2%, р < 0,01.
По активности ЩФ ткани наружной и внутренней ободочных кишок у односуточных поросят значительно отличаются -- в тканях наружной ободочной кишки уровень фермента в молозивной фазе выше, чем в тканях внутренней ободочной кишки, в 2,6 раза, р < 0,001. У недельных и двухнедельных поросят уровень фермента в тканях наружной ободочной кишки примерно одинаковый с таковым у односуточных. В тканях внутренней ободочной кишки активность ЩФ достоверно возрастает в первой фазе молочного питания поросят, к двухнедельному возрасту, в 1,6 раза, р < 0,001. В последующую неделю жизни поросят, к трехнедельному возрасту, активность ЩФ в тканях наружной ободочной кишки существенно снижается -- на 50,1%, р < 0,001 и в тканях внутренней ободочной кишки она значительно уменьшается -- на 51,0%, р < 0,001. У четырехнедельных поросят активность фермента в тканях наружной ободочной кишки продолжает снижаться, на 50,1%, р < 0,001 и достигает самой минимальной величины в изучаемый период их жизни. В тканях внутренней ободочной кишки в третьей молочной фазе она сохраняется на уровне трехнедельных.