6
признаки, специфические для первой болезни, нечеткие. В практике такое смешанное течение чаще всего принимают за европейский гнилец, однако после применения сульфаниламидов и антибиотиков, подавляющих возбудителей этих болезней, отмечается интенсивное поражение семей мешотчатым расплодом.
Диагноз ставят на основании лабораторного исследования патологического материала (кусочек сота с 20 или более пораженными предкуколками или такое же количество выделенных предкуколок в 50 %- ном глицерине).
Из методов лабораторной диагностики наиболее специфичной является реакция диффузионной преципитации в агаровом геле суспензии исследуемого материала со специфичной сывороткой. Можно использовать и другие методы серодиагностики: РСК, прямой и непрямой метод люминесцентной микроскопии.
Меры борьбы. Больные семьи сокращают и утепляют, обеспечивают достаточным количеством полноценного белкового и углеводного корма; меняют маток. В качестве лечебного и профилактического средства рекомендована гипериммунная сыворотка, полученная от кроликов и лошадей. 80 мл сыворотки смешивают с сахарным сиропом, который дают весной или летом 3 раза через 5 дней по 150—200 мл на улочку пчел. Профилактическая и лечебная эффективность составляет 70 %.
Ульи, вставные доски, рамки после механической очистки дезинфицируют одним из следующих растворов из расчета 0,5 л на 1 м : 4 %- ной перекисью водорода; 2 %-ной двутретьосновной солью кальция гипохлорида; 5 %-ным нитраном; 1 %-ным формальдегидом при экспозиции 3 ч. Для дезинфекции сотов применяют перекись водорода и формалин в указанных концентрациях и при той же экспозиции. Воск перетапливают в водяной бане при 70 °С в течение 70 мин или автоклавируют (111 °C) при 0,5 атм в течение 30 мин
БАКТЕРИОЗЫ И МИКОЗЫ ПЧЕЛ
АМЕРИКАНСКИЙ ГНИЛЕЦ — Histolysis infectiosa perni-ciosa larvae (син.:
злокачественный гнилец, бранденбургский гнилец) — инфекционная болезнь печатного пчелиного расплода, проявляющаяся летом, реже весной.
Возбудитель — спорообразующая грамположительная палочка бацилла ларве (Вас. larvae).). Установлено, что штаммы бациллы ларве разных стран и континентов обладают одинаковыми антигенными свойствами.
Возбудитель имеет вид палочки (2,5Х0,8 мкм). Клеточная стенка пятислойная, толщиной 170 А. Наружный средний и внутренние
7
осмофильные слои оболочки имеют толщину 20—25 А, два промежуточных осмофильных слоя — по 40— 50 А.
У бациллы ларве цитоплазматическая мембрана (толщина 70 А) располагается за клеточной стенкой и плотно примыкает к протопласту бактерии, она имеет три слоя. Цитоплазма содержит зернистый компонент
— рибосомы — величиной 200 А. Вдоль продольной оси клетки диффузно располагается нуклеоид. Деление бациллы осуществляется с образованием перегородки.
Споры формируются на одном из полюсов клетки, где вначале образуются споровые оболочки, а затем спора. Конец клетки, где залегает спора, несколько утолщается. Свободная спора покрыта широкой осмиофильной оболочкой, к которой плотно прилегает тонкий осмиофильный слой, далее лежит внутренняя оболочка споры — кортекс, за которой следуют стенка, споровая мембрана и цитоплазма.
Споры бациллы ларве устойчивы к физическим и химическим воздействиям, особенно если они заключены в корочковый материал или воск. В высохших корочках они сохраняют вирулентность несколько лет, а в меде — более года. В меде, хранящемся на солнечном свету, они выживают 4—6 нед. Сухие свободные споры солнечный свет убивает за 28—41 ч.
В воде при температуре 90 °С они гибнут через 3 ч, а при 95 °С — через час. При кипячении трупов личинок в воде в течение 1 мин гибнет 80% спор, за 5 мин—99%, а в течение 14 мин — все. В неразведенном кипящем меде споры погибают через 40 мин, а в разведенном равным количеством воды — через 20 мин.
Кипячение воска в открытой посуде вызывало гибель спор лишь на пятый день. При прогревании воска сухим жаром при 140—170 °С споры погибали через 1,5—2 ч, а перегретым водяным паром (127 °С) под давлением 1,5 атм. в автоклаве за 2 ч.
Сулема в разведении 1:100 убивает споры через 4—5 дней. I %-ный раствор перекиси водорода, подкисленной кислотой, убивает споры в корочковом материале за 3 ч, в 1—2%-ном растворе бета-пропиолактона — за 20—30 мин.
Споры сохраняют жизнеспособность в сухой почве пасек 228 дней, в сырой — до 19 мес, на поверхности почвы в условиях Таджикистана — 70 дней, на глубине до 5 см — до года, на цветках хлопчатника — до 82 дней. ;.- : В. С. Сорокин (1925) сообщил, что в ульях, освободившихся от больных американским гнильцом пчелиных семей и стоявших без употребления 15 лет, снова возникло заболевание американским гнильцом при поселении в них пчел.
Особенно длительно сохраняются споры, содержащиеся в высохших личинках, погибших от американского гнильца. В зараженных сотах споры
8
оставались вирулентными в течение 35 лет, на ульях, вощине — 20 лет, в медогонке — 5 лет, меде и перге — 1 год (срок наблюдения).
Патогенность. Бацилла ларве патогенна только для личинок трутней, маток и взрослых пчел. Трутневые и маточные личинки поражаются очень редко. Все породы пчел одинаково восприимчивы к американскому гнильцу.
В. А. Триленко (1975) удалось вызвать гибель кроликов на 5—7 день после внутривенного введения им 3—6 млн. спор бациллы ларве, у морских свинок после подкожного введения 3 млн. спор смерть наступала на 8—10 сут. При этом из крови больных и внутренних органов павших животных изолирована исходная культура.
Для личинок пчел патогенны только споры этого возбудителя. Для заражения одной личинки необходимо скормить ей не менее 10000 спор в 0,01 мл сиропа. С. Матука (1958) заразил пчелиные семьи вегетативной формой бациллы ларве.
Инфицирование пчелиных личинок происходит до запечатывания ячеек при употреблении контаминированного спорами меда и перги. В течение первых трех дней личинки не заболевают гнильцом, потому что они получают маточное молочко, обладающее бактерицидными свойствами. В последующие дни не запечатанные личинки не заболевают из-за кислой реакции их кишечно-го сока и высокой концентрации в кишечнике сахаров (17 %). После запечатывания сотов личинки пчел не получают корм и живут за счет собственных ресурсов, при этом концентрация инвертированного сахара снижается с 17 до 3—2,5 %. Инкубационный период длится от 2 до 7 дней, поэтому заразившиеся личинки погибают после запечатывания ячеек.
В редких случаях при очень высокой патогенности возбудителя и ослаблении резистентности личинок гибель их может наступить до запечатывания или в стадии куколок в первые 1— 2 дня развития.
Эпизоотологические данные. Источником возбудителя американского гнильца являются трупы личинок. В погибшей личинке содержится такое количество спор (1,5 - 3 млрд.), которое способно заразить 200 личинок.
Фактором распространения спор внутри семьи служат пчелылы, особенно молодые, которые выполняют роль ячеек, приемщиц принесенного нектара и кормилиц личинок. Основным путем распространения болезни на пасеке и за ее пределами служат все объекты, контаминированные рпорами: инфицтрованные ульи, пчеловодный инвентарь, медогонки, соты, вощина, мед, перга, воск, ульевые холстики и наволочки утиплительных подушек и пр.
Фактором распространения возбудителя болезни могут служить мастерские, изготавливающие вощину и воскозаводы, содержащиеся в антисанитарных условиях. Споры американского гнильца могут распространять паразиты и хищники пчел: восковая моль, ветчинный кожеед, уховертки, различные клещи, особенно варроа якобсони, осы, муравьи, муха дрозофила, лжескорпионы и другие паразиты, а также пчелы-
9
воровки. Замечено, что американским гнильцом чаще поражают здоровые, сильные пчелиные семьи, склонные к воровству. Они могут заразиться от больных пчелиных семей не только в пределах своей пасеки, но и от соседних пасек, расположенных на расстоянии лета пчел.
Инфицироваться здоровые пчелы спорами бацилл американского гнильца могут и на цветках, которые посещали пчелы больных семей, а также от объектов внешней среды, контаминированных возбудителем болезни (почва при весенней очистке ульев и пр.).
Распространение американского гнильца возможно и на большие расстояния при пересылке пакетов пчел или целых семей с пасек, неблагополучных по данной болезни. Матки, полученные в пчелиных семьях, больных американским гнильцом, являются спороносителями в течение 28 дней, поэтому пересылка маток тоже может быть причиной распространения возбудителя болезни.
Патогенез. Возбудитель американского гнильца, проникнув через стенку среднего отдела кишечника в гемолимфу быстро в ней размножается и распространяется в течение 12 - 24 ч по организму. Этому благоприятствует метаморфоз личинки в куколку, когда ткани отдельных органов личинки, в том числе и кишечника, подвергаются гистолизу. Микроб выделяет продукты жизнедеятельности — токсины, которые вызывают гибель личинки. В организме личинки отмечаются дегенеративные процессы: в цитоплазме клеток — плазморексис, плазмопикноз, вакуолизация, в ядрах — кариорексис, гиперхроматоз. Дегенеративные изменения наблюдаются и в эноцитах, клетках жирового тела, секреторных и гемолимфы.
Организм личинки на внедрение возбудителя отвечает защитной реакцией — фагоцитозом. Фагоциты захватывают и разрушают бацилл ларве, но это не обеспечивает полной защиты организма: размножение бацилл идет быстрее, чем их фагоцитирование. Личинки погибают, а их ткани подвергаются распаду. А. Тошков (1965) установил, что после гибели личинки размножение возбудителя в ней еще продолжается 10—12 ч, затем деление палочек прекращается и начинается процесс спорообразования, который заканчивается в течение 7—10 сут. В это время в трупе личинки образуются антибиотические вещества, препятствующие развитию посторонней микрофлоры.
Признаки болезни. Американский гнилец чаще проявляется во вторую, наиболее жаркую половину лета. Развитию этой болезни способствует перегревание пчелиного гнезда.
В начале заболевания отмечают поражение отдельных личинок. Со временем число заболевших и погибших личинок увеличивается. Обнаружение вновь заболевших смесей происходит, как правило, с опозданием, особенно если пчеловод никогда не видел эту болезнь.
10
Признаки болезни обнаруживают во время осмотра сотов с расплодом. Заболевают обычно взрослые пчелиные личинки, уже запечатанные восковыми крышечками. Погибая и подвергаясь процессу разложения, они оседают ближе ко дну, на нижнюю боковую стенку ячейки, становятся вязкими, тягучими, напоминая полувысохший резиновый клей. Характерна для них в этот период тягучесть и липкость. Цвет пораженных личинок изменяется от серовато-белого до кофейно-молочного и темно-бурого.
Погибшие личинки имеют запах растопленного столярного клея. Восковые крышечки ячеек с погибшими личинками западают, темнеют и продырявливаются. Вдавливание крышечек объясняется прилипанием головки личинок, которые, подсыхая, втягивают крышечки внутрь ячеек. Через 20—30 дней гнилостная касса высыхает в плотную корочку, крепко прилипшую к нижней боковой стенке ячейки. Удалить корочку пинцетом из ячейки, не разрушив ее стенок, не удается. Пчелы не могут очистить ячейки с погибшими личинками и новый расплод выводят рядом с этими ячейками. Поэтому расплод становится «пестрым», т. е. разбросан среди здоровых личинок. Пчелы в больной семье становятся вялыми, с пониженной работоспособностью и преждевременно изнашиваются.
Количество молодых пчел резко сокращается или они полностью исчезают. Без оказания помощи сильно пораженные семьи пчел погибают в середине или конце лета. Часть больных семей погибает зимой или ранней весной вследствие того, что они идут в зимовку с недостаточным количеством пчел. При слабом заражении больные семьи могут перезимовать, но болезнь в них уже начинает проявляться с ранней весны. Эти ослабленные семьи легко подвергаются нападу пчел других семей.
Иммунитет. Взрослые пчелы обладают врожденным иммунитетом против американского гнильца. Существуют отдельные породы пчел, у которых расплод более устойчив к заболеванию американским гнильцом. Механизм высокой устойчивости к гнильцу у этих семей объясняют поразному: прежде всего способностью пчел в ранний период заболевания обнаружить ячейки с только что пораженными личинками (до их загнивания) и быстрой очисткой ячеек от них; способностью иммунных пчел профильтровывать мед от спор бациллы ларве при насасывании в медовый зобик инфицированного меда и при кормлении личинок; повышением у иммунных пчел фагоцитарной активности.
Диагноз предварительный ставят по внешним признакам. При осмотре расплода учитывают его возраст, цвет, консистенцию и запах трупов личинок.
Необходимо исключить европейский гнилец, парагнилец, мешотчатый и порошковидный расплоды и варрооз.