Для измерения количества эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов используется метод прямого абсолютного счета, который не требует калибровки. Определение уровня гемоглобина происходит с помощью модифицированного гемоглобинцианидного фотометрического метода, расчет производится по калибровочному графику.
Уровень показателя гематокрита определяется накопительным импульсным методом (по накоплению высоты эритроцитарного столба). Для расчета результатов используется калибровочный график.
В анализатор встроена специальная программа для контроля среднего значения и контроля по Левей-Дженнингсу.
Биохимический анализ крови проводился на автоматическом селективном биохимическом анализаторе Conelab-20. Он рассчитан на выполнение фотометрических, турбидиметрических, потенциометрических тестов. Открытая реагентная система позволяет гибко программировать и хранить в памяти анализатора до 500 различных методик. С помощью Conelab-20 определяют показатели в крови субстратов, ферментов, специальных белков, микроэлементов, электролитов. Для расчета результатов используют калибровочные графики [Камышников, 2001].
2.2.1 Клинический анализ крови
Клинический анализ крови - анализ, позволяющий оценить содержание гемоглобина в системе красной крови, количество эритроцитов, количество лейкоцитов и тромбоцитов. Также в него входят лейкоцитарная формула и скорость оседания эритроцитов (СОЭ). С его помощью можно выявить анемии, воспалительные процессы, состояние сосудистой стенки и многие другие заболевания.
Общий анализ крови помогает определить тяжесть и фазу процесса пневмонии. Выделяют следующие изменения показателей в общем анализе крови при пневмонии:
при легком течении пневмонии в анализе крови умеренный лейкоцитоз и сдвиг лейкоцитарной формулы влево, повышена СОЭ;
при средней тяжести - выраженный лейкоцитоз со сдвигом влево до юных форм, повышена СОЭ;
при тяжелом течении в анализе высокий лейкоцитоз, токсическая зернистость нейтрофилов, резкий сдвиг лейкоцитарной формулы влево вплоть до миелоцитов, снижение числа эозинофилов, лимфоцитов, очень высокая СОЭ. В крови также возможна анемия при длительной интоксикации; увеличение количества эозинофилов более 5 % является ранним и характерным признаком аллергизации и аллергии.
при благоприятном течении пневмонии в анализе крови перед кризом нарастает количество эозинофилов и моноцитов;
отсутствие лейкоцитоза при анализе крови наблюдается у ослабленных и пожилых больных и является прогностически неблагоприятным признаком [ Метельский, Бова, 2005].
Скорость оседания эритроцитов определяют с помощью метода Панченкова. Принцип метода заключается в том, что в пробирке с кровью стабилизированной цитратом натрия, эритроциты оседают с различной скоростью в зависимости от физико-химических свойств крови. Выражается данная величина в мм/ч. В норме СОЭ составляет 0-19мм/ч [Царев, 2005]. (Таблица 1 - Нормы показателей общего анализа крови).
Концентрацию гемоглобина
определяют модифицированным гемоглобинцианидным методом. Принцип метода:
гемоглобин крови при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная
кровяная соль) окисляется в метгемоглобин (гемиглобин), образующий с
ацетонциангидрином гемиглобинцианид (цианметгемоглобин), интенсивность окраски
которого пропорциональна концентрации гемоглобина в крови и измеряется
фотометрически при длине волны 540 (500-560) нм. Норма составляет: 120-174 г/л.
(таблица 1).
Таблица 1 - Нормы показателей общего анализа крови [#"880559.files/image001.gif">) к каждой группе, стандартная ошибка (±m) проводилась программой Microsoft office Excel 2007. Показатель достоверности (Р), достоверность различий по критерию Стьюдента (t) для одноименных показателей подсчитывалась на сайте. В полученных данных различия считались достоверными при р ≤0,05.
3. Метаболические показатели при пневмониях
.1 Изменение показателей белкового обмена при
пневмонии
Клинико-биохимическое исследование было проведено 25 больными пневмонией в возрасте от 26 до 72 лет. Им были проведены общие анализы крови и биохимические анализы крови. Всем больным ставился диагноз: неуточненная пневмония, т. к. анализ мокроты на возбудителя пневмонии не проводился.
Из 25 обследованных больных у семи наблюдался
лейкоцитоз, и только у четырех наблюдалась лейкопения. Лейкопения обычно
считается неблагоприятным признаком и наблюдается у ослабленных и пожилых
больных. При подсчете лейкоцитарной формулы выяснилось, что у большинства
больных наблюдается сдвиг лейкоцитарной формулы влево.
Таблица 4 - Клинические показатели крови у больных пневмонией
|
|
n |
Эритроциты, 10^12/л |
Лейкоциты, 10^9/л |
СОЭ, мм/ч |
Гематокрит, % |
Лейкоцитарная формула, % |
||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
эозинофилы |
палочкоядерные нейтрофилы |
Сегментоядерные нейтрофилы |
Лимфоциты |
моноциты |
25 |
4,39 ±0,49 |
7,72 ±2,73 |
28,08 ±12,0 |
38,4 ±4,74 |
2,32 ±0,97 |
3,84 ±2,15 |
60,24 ±11,18 |
27,36 ±10,03 |
6,36 ±3,26 |
|
Контрольная группа |
10 |
4,65 ±0,32 |
6,0 ±0,62 |
12,0 ±3,6 |
43,47 ±4,21 |
2,9 ±0,9 |
3,4 ±1,08 |
53,5 ±8,2 |
31,2 ±6,4 |
4,7 ±1,7 |
||||||||||
|
Достоверность различий |
|
р ≥0,01 |
р<0,05 |
р <0,05 |
р <0,01 |
р ≥0,01 |
р ≥0,05 |
р <0,05 |
р <0,01 |
р <0,05 |
||||||||||
|
Норма (литературные данные) |
|
4 - 5,5 |
5 - 10 |
0 - 19 |
36 - 52 |
2 - 5 |
2 - 8 |
37 - 75 |
19 - 45 |
2 - 10 |
||||||||||
А также у семи - эозинопения и лимфопения, что может свидетельствовать о тяжелом течении пневмонии.
У большинства обследованных значительно повышена скорость оседания эритроцитов (СОЭ), которая при тяжелом течении болезни может достигать 30 - 48 мм/ч.
Гемоглобин и эритроциты у большинства больных находились в норме, а у шести пациентов наблюдалась анемия, снижение гемоглобина до 83г/л и одновременное уменьшение количества эритроцитов до 2,81 10^12/л. А также у восьми наблюдалось снижение показателя гематокрита.
Всем больным помимо клинического анализа
обязательно проводился биохимический анализ. Из данных таблицы пяти можно
увидеть признаки воспалительного процесса характеризующегося повышением белков
«острой фазы». У всех больных наблюдалось повышение уровня СРБ и уровня
серомукоида.
Таблица 5 - Биохимические показатели крови у больных пневмонией
|
|
n |
СРБ, мг/л |
Ревмотоидный фактор, МЕ/л |
Серомукоид, г/л |
ЛДГ, Ед/л |
Фибриноген, г\л |
|
Больные пневмонией |
25 |
20,02 ±11,85 |
38,20 ±14,68 |
0,35 ±0,14 |
396,28 ±92,51 |
4,98 ±1,25 |
|
Контрольная группа |
10 |
2,57 ±1,40 |
4,10 ±1,78 |
0,26 ±0,03 |
324,80 ±57,44 |
2,89 ±0,49 |
|
Достоверность различий |
|
р<0,05 |
р<0,05 |
р≥0,05 |
р<0,05 |
|
|
Норма (литературные данные) |
|
0 - 5 |
0 - 8 |
0,22 - 0,28 |
200 - 450 |
2 - 4 |
А также у семнадцати больных мы выявили повышение фибриногена. При пневмонии определение фибриногена необходимы повторные динамические исследования, которые лишь при таком подходе и их оценке приобретает диагностическое значение.
У многих повышен показатель ревматоидного фактора, что может свидетельствовать о возрасте больных, т. к. у людей пожилого возраста часто наблюдается повышение ревматоидного фактора.
Отмечена зависимость между выраженностью
воспалительного процесса в легких и гиперферментацией. Наиболее информативный
показатель при пневмонии является ЛДГ. Из результатов исследования у восьми
больных из 25 наблюдалось повышение ЛДГ, что может говорить о затяженности
болезни и выраженности воспалительного процесса.
.2 Определение иммунного статуса
Иммунологическое исследование было проведено 20 больным пневмонией проходящим стационарное лечение. Им был проведен полный анализ иммунного статуса.
Из двадцати больных у восемнадцати наблюдается повышение показателя CD19 (B-лимфоциты), это говорит об активации реакции гуморального иммунитета, в конечном итоге происходящей в сыворотке крови, и обеспечивающейся В-лимфоцитами. Распознав чужеродный агент, они дифференцируются в плазматические клетки, производящие антитела - сывороточные белки (иммуноглобулины). У пяти пациентов мы наблюдали значительное повышение Ig G и Ig M. Эти белки связываются с чужеродным агентом, блокируя его биологическую активность, и удаляют его из организма - это прямое действие иммуноглобулинов.
У семи обследованных больных наблюдается снижение показателя CD8 (Т-киллеры). Эти клетки полностью лизируют чужеродные клетки, покрытые иммуноглобулинами (Ig G).
Также иммуноглобулины, связываясь с антигенами
образуют иммунный комплекс, активирующий систему комплемента - набор из
одиннадцати сывороточных белков.
Таблица 6 - Показатели иммунного статуса у больных пневмонией
|
|
n |
Ig A, мг/дл |
С4 компл., мг/дл |
СD3, % |
СD4, % |
СD8, % |
СD16, % |
СD19, % |
|
Больные пневмонией |
20 |
203,2 ±86,34 |
57,63 ±4,56 |
74,68 ±4,51 |
39,37 ±6,05 |
15,38 ±7,68 |
10,56 ±3,34 |
29,25 ±7,82 |
|
Контрольная группа |
10 |
181,3 ±58,36 |
26,6 ±5,32 |
74,27 ±4,97 |
38,56 ±7,24 |
17,49 ±4,11 |
12,01 ±3,03 |
12,56 ±2,56 |
|
Достоверность различий |
|
р< 0,05 |
р< 0,05 |
р ≥ 0,05 |
р ≥ 0,05 |
р < 0,01 |
р < 0,01 |
р < 0,05 |
|
Норма (литературные данные) |
|
70 - 400 |
10 - 40 |
48 - 80 |
33 -58 |
11 - 36 |
8 - 19 |
5 - 10 |
У половины больных мы выявили снижение показателя С3 комплемента. При тяжелых осложненных формах пневмоний С3 длительно остается на низком уровне, можно предположить, что у некоторых больных отсутствие нарастания С3 обусловлено недостаточной его продукцией в течение инфекционно-воспалительного процесса, что и является одной из причин, определяющих тяжесть пневмонии и развитие осложнений.
пневмония липидный обмен иммунный
Заключение
Данная исследовательская работа была проведена на базе ЛИС (лабораторно-информационная система) с 2011 по 2012 г. в клинико-диагностической лаборатории Государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Специализированной клинической инфекционной больницы» (ГБУЗ «СКИБ». Материалом исследования являлись сыворотка крови людей больных пневмонией. Клинико-биохимические исследования были проведены 25 больным возраста от 26 до 72 лет. В иммунологическом исследовании участвовали 20 больных находящихся на стационарном лечении.
Согласно данным клинического анализа можно отметить изменения показателей крови относительно нормы: повышение уровня СОЭ в три раза, повышение количества лейкоцитов в два раза, сдвиг лейкоцитарной формулы влево. У семи больных наблюдалось снижение количества лейкоцитов, эозинопения, лимфопения, что говорит о тяжелом течении пневмонии. У шести была отмечена анемия, одновременное снижение гемоглобина и эритроцитов.
Из биохимических показателей можно отметить увеличение показателя СРБ до 40,3 мг/л, увеличение фибриногена до 7,7 г/л, повышение уровня в два раза ЛДГ.
Иммунологическое исследование свидетельствует о тяжелом течении пневмонии и нарушении иммунного ответа. Иммунный ответ протекает в виде каскадной реакции. Сначала в клетках печени и косном мозге образуется В-лимфоциты не дифференцированные клетки. Почти у всех больных мы отметили их увеличение в три раза. Далее они производят иммуноглобулины, у некоторых уже на данном этапе происходят нарушения, только у пяти больных было отмечено повышение Ig G, IgM. Затем иммуноглобулины связываются с системой комплемента. В нашем исследовании у большинства именно на этом этапе происходит сбой, у десяти больных мы отметили снижение С3 комплемента, он синтезируется в недостаточном количестве, что является одной из причин определяющих тяжесть пневмоний.
В результате работы были сделаны следующие выводы:
. Среди показателей клинического анализа можно отметить: повышение СОЭ в три раза, повышение уровня лейкоцитов в два раза, сдвиг лейкоцитарной формулы влево. У семи больных с тяжелым течением пневмонии наблюдалось снижение уровня лейкоцитов, а так же эозинопения, лимфопения. У шести больных была отмечена анемия, при одновременном снижение уровня гемоглобина и уровня эритроцитов.
. Из биохимических показателей можно отметить увеличение уровня СРБ до 40,3 мг/л, увеличение уровня фибриногена до 7,7 г/л, повышение в два раза активности ЛДГ.
. Среди иммунологических показателей
отмечено увеличение количества В-лимфоцитов в три раза. У пяти больных было
отмечено повышение уровня Ig
G, IgM.
У десяти больных отмечено снижение уровня С3 комплемента, что может
быть одной из причин определяющих тяжесть пневмоний.
Библиографический список
. Григорьев А. В., Гуркин Ю. А., Добрянков И. В. Справочник болезней. М., 2002. 576 с.
. Заболеваемость населения России в 2010 году: Статистические материалы. Часть III. М., 2011. С. 94 - 98. [Электронный ресурс]. - URL:http//www. mednet.ru
. Замотаев И. П. Острые пневмонии: болезни органов дыхания / Под. ред. Н.Г. Палеева. М., Медицина. 1989. Т.2. С. 17 -102.
5. Зубков М. Н., Зубков М. М. Госпитальные пневмонии: этиология, патогенез, диагностика, профилактика и лечение // Consilium Medicum, М., 2000. Том 2, №1. С. 17-22.
6. Камышников В. С. Техника лабораторных работ. Минск, Белорусская наука. 2001. 286с.
. Камышников В. С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. М., медпресс-информ. 2009. 896с.