6
Телофаза. Дочерние хромосомы деспирализуются и утрачивают видимую индивидуальность. Образуется оболочка ядра, затем восстанавливается и ядрышко. На этом завершается кариокинез, затем наступает цитокинез (деление цитоплазмы). Цитокинез начинается с того, что в экваториальной части материнской клетки утолщаются нити веретена и между ними образуется клеточная перегородка. В результате митотического деления соматической клетки в меристеме образуются из материнской две дочерние клетки, в которых происходит точное и равное распределение наследственного материала
(рис. 1.1).
Значение митоза: митоз поддерживает вегетативное размножение растений, при этом наследственные признаки передаются полностью от материнского растения его потомству.
Рис. 1.1.Схематическое изображение стадий митоза
Выполнение задания. На световом микроскопе изучить все фазы мито-
7
за. Объекты: митоз в меристеме листьев тополя, корешках сосны и др. Сделать подсчет хромосом на 2-3 метафазных пластинках. Зарисовать все фазы митоза.
Демонстрация слайдов: митоз у диплоидного и миксоплоидного (триплоидного) тополя сереющего. Просмотр микрофотографий: митоз у сосны обыкновенной, дугласии, тополя сереющего.
Митотическая активность
Задание 2. Определить митотическую активность в конусе нарастания корешков проростков семян лиственницы, березы, сосны в зависимости от их длины.
Материал и оборудование
Полупостоянные препараты корешков проростков семян сосны, лиственницы, березы и др. растений во время микроспорогенеза.
Пояснения к заданию. Митотическая активность тканей определяется отношением числа клеток, находящихся в митозе, к общему числу клеток на данном участке ткани, например в зоне деления в конусе нарастания корешка. Это отношение выражают либо в процентах или в виде показателя, который получил название митотического индекса (МI). Митотический индекс чаще всего выражают в промилле (‰), т.е. в числе митозов на 1000 клеток исследуемого участка ткани.
Выполнение задания: Внимательно рассмотреть под микроскопом (объектив 40, окуляр 10) полупостоянные давленные препараты и установить зону деления клеток (меристемы конуса нарастания корня или в листьях). Считают число клеток в различных фазах митоза и общее число клеток в 3-5 полях зрения и заносят в таблицу (табл. 1.1).
Таблица 1.1
Митотический индекс в зоне деления корешков проростков семян березы повислой, имеющих различную длину
Длина |
|
|
Число клеток в зоне деления |
|
Митотиче- |
||||
ко- |
Поле |
|
|
В том числе в митозе |
|
||||
все- |
|
|
ский индекс |
||||||
решка, |
зрения |
|
про- |
мета- |
ана- |
тело- |
|||
го |
всего |
(MI, ‰) |
|||||||
мм |
|
фаза |
фаза |
фаза |
фаза |
||||
|
|
|
|
||||||
5 |
1 |
403 |
230 |
71 |
23 |
51 |
85 |
|
|
8
|
2 |
380 |
201 |
63 |
17 |
39 |
82 |
|
209 |
|
|
3 |
410 |
197 |
68 |
9 |
43 |
77 |
|
|
100052 |
|
|
|
||||||||
|
|
398 |
||||||||
|
Всего |
1193 |
628 |
202 |
49 |
133 |
244 |
|
|
|
|
Среднее |
398 |
209 |
68 |
16 |
44 |
81 |
|
|
|
|
1 |
393 |
124 |
57 |
8 |
198 |
40 |
|
|
|
|
2 |
385 |
135 |
46 |
7 |
21 |
61 |
|
136 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
20 |
3 |
400 |
149 |
62 |
11 |
24 |
52 |
|
|
100034 |
|
||||||||||
|
Всего |
1179 |
408 |
165 |
26 |
64 |
153 |
|
393 |
|
|
|
|
|
|||||||
|
Среднее |
393 |
136 |
55 |
9 |
21 |
51 |
|
|
|
1.Подсчитать число клеток в профазе, метафазе, анафазе и телофазе и записать в соответствующие графы той же таблицы.
2.Аналогичные подсчеты проводят на других срезах этого корешка и других корешков. Для получения достоверных данных подсчеты проводят у 5-10 корешков в каждом варианте в 3-5 полях зрения. Среднее по каждому варианту опыта можно вывести на основании суммирования результатов всех наблюдений.
3.Митотический индекс (МI) определяют отношением среднего числа митозов к среднему числу клеток в зоне деления в промилле по формуле
M
MI N 1000,
где M – число митозов;
N – число клеток в зоне деления.
Выводы: митотическая активность в клетках кончиков корешков длиною 5 мм значительно выше, чем у корешков длиною 20 мм.
РАБОТА 2 Микроспорогенез и развитие мужского гаметофита
Половое размножение растений возникло на определенном этапе эволюции организмов и является наиболее совершенной формой воспроизведения потомства. По сравнению с вегетативным половое размножение имеет существенные преимущества. Во-первых, оно обеспечивает значительно большую численность потомства и, во-вторых, увеличивает его наследственную изменчивость, что создает благоприятные условия для последующего отбора наиболее приспособленных форм.
9
Половой процесс размножения предусматривает прежде всего образование мужских и женских половых клеток. Эти клетки в отличие от соматических клеток имеют гаплоидный набор хромосом (n). Механизм, обеспечивающий уменьшение числа хромосом вдвое, заключается в особом типе клеточного деления, который называется мейозом.
Задание 1. Рассмотреть клетки, находящиеся в различных фазах мейоза у тополя или других древесных растений, и зарисовать их.
Материал и оборудование
Постоянные и полупостоянные препараты пыльников тополя, ольхи, лиственницы или др. растений во время микроспорогенеза.
Пояснения к заданию. Мейоз – процесс деления клетки, предшествующий образованию половых клеток, при котором происходит уменьшение (редукция) числа хромосом в два раза. Мейоз осуществляется в течение двух клеточных делений (I и II), состоящих из ряда последовательных фаз. Мейоз протекает в материнских клетках микроспор и мегаспор (макроспор). В результате мейоза образуются споры, которые в дальнейшем дают начало мужскому гаметофиту (пыльце) и женскому гаметофиту (зародышевому мешку). Первое деление (мейоз-I) называется редукционным или гетеротипическим, второе деление (мейоз – II) называют эквационным делением или гомотипическим.
Мейоз – II протекает по типу митоза. Фазы, относящиеся к первому делению, обозначают цифрой – I, ко второму – II.
Профаза – 1. Эта фаза состоит из ряда последовательных стадий: лептотены, зиготены, пахитены, диплотены и диакинеза. На стадии лептотены хромосомы имеют вид длинных тонких нитей, собранных в ядре в виде рыхлого клубка. Каждая хромосома состоит из двух хроматид.
На стадии зиготены происходит коньюгация (соединение попарно) гомологичных хромосом. Соединение в пары начинается с концов хромосом и распространяется вдоль.
На стадии пахинемы происходит спирализация (укорачивание и утолщение) пар гомологичных хромосом, которые называют бивалентами. Каждый бивалент состоит из четырех хроматид, которые хорошо различимы и соединены центромерой.
10
На стадии диплотемы хромосомы в бивалентах отходят друг от друга, расхождение их начинается с отталкивания центромерных участков гомологичных хромосом. По фигурам бивалентов распознают, произошел ли кроссинговер (обмен участками между хроматидами гомологичных хромосом, обуславливающий рекомбинацию генов) и был ли он одинарным или двойным. Хромосомы образуют Х-образные фигуры, называемыми хиазмами.
На стадии диакинеза происходит сильное утолщение и укорачивание хромосом. Биваленты в это время располагаются по периферии ядра.
Метафаза – I. Ядерная оболочка исчезает, биваленты располагаются в цитоплазме по экватору клетки. Центромеры хромосом прикрепляются к тянущимся нитям веретена. В отличие от митоза в метафазе I мейоза центромеры не делятся.
Анафаза – I. Гомологичные хромосомы расходятся к противоположным полюсам клетки. Вследствие этого число хромосом в дочерних ядрах уменьшается вдвое. Причем каждая пара бивалентов отходит с равной вероятностью к любому из двух полюсов, независимо от другой пары.
Телофаза – I. Формируется ядерная оболочка, дихроматидные хромосомы концентрируются на полюсах. Образуется диада клеток.
Интеркинез - непродолжительная подготовка к следующему делению. Мейоз – II мало отличается от митоза по своему механизму, но имеет
некоторые особенности.
Профаза II может отсутствовать или быть очень короткой.
Метафаза – II. Хромосомы располагаются по экватору. К центромерам хромосом прикрепляются тянущиеся нити веретена.
Анафаза II. Центромеры делятся, хроматиды расходятся к противоположным полюсам клетки. Хромосомы не идентичны, как в митозе, потому что участвовали в кроссинговере. На каждом полюсе клетки оказывается гаплоидное число хромосом.
Телофаза – II. Хромосомы концентрируются на полюсах клеток и деспирализуются. Формируются ядра, ядрышки, происходит цитокинез. Заканчивается мейоз образованием из каждой материнской клетки четырех макроили микроспор с гаплоидным набором хромосом. Образуется тетрада (рис.
2.1).