Материал: Оценка зараженности моллюсков Любенского озера города Гомеля партенидами трематод

Горячее копчение при температуре +70-80°С в течение 2-2.5 часов уничтожает метацеркариев.

При холодном копчении рекомендуется предварительный посол в течение 2 недель (из расчета 2 кг соли на 10 кг рыбы) или замораживание (при температуре -28°С в течение 41 часа, при температуре -35°С в течение 10 часов).

Для предотвращения дальнейшего распространения паразита не следует сбрасывать в водоёмы и на мусорные свалки отходы переработки рыбной продукции, а также скармливать животным без предварительного обеззараживания.

У плотоядных хищников заражение происходит при поедании рыбы, инвазированной метацеркариями. После инкубационного периода, длящегося от 5 до 21 дня, у животных повышается температура, проявляется общая слабость, возникает эозинофилия. При тяжёлом течении болезни у животных могут возникнуть лихорадка,желтуха, гепатоспленомегалия. Печень на ощупь становится бугристой. Также могут возникать рвота, диарея, запоры, выпадение шерсти, асцит.

Спустя некоторое время состояние животного улучшается, болезнь из острой стадии переходит в хроническую и проявляется дискенезией жёлчных путей, хроническим холангиохолециститом, хроническим панкреатитом.

Диагноз ставится на основании обнаружения яиц описторхов в фекалиях. Для лечения используется празиквантел. Гексахлорпараксилол, гексихол и политрем можно отнести к устаревшим препаратам.

Поскольку домашние животные (кошки, собаки) играют важную роль в распространении заболевания, то в целях профилактики в очагах описторхоза необходимо кормить их только тщательно проваренной рыбой.

2. Объект, программа и методика исследований

Сбор исследуемого материала проходил в летний период (август) 2013 и 2014 годов. На биотопе оз. Любенское было выбрано два участка, где активность отдыхающих в летний период была максимальной. Поиск материала проводился на песчаном дне пляжей водоёма. Материалом для исследования являлись легочные моллюски, которые являются промежуточными хозяевами трематод.

С 2013 по 2014 год было исследовано 20 проб бентоса из двух участков озера Любенское микрорайона г.Гомеля. Общая площадь отбора проб моллюсков составила 20 м2. Всего за два года было выловлено и исследовано 90 экземпляров легочных моллюсков трех видов. В озере обнаружено пять видов рыб (красноперка, карась и др.), определен их возрастной состав (одно-, двух-, трех- и четырехлетки).

Исследование рыб проводили по общепринятым методикам с определения ее видовой принадлежности и измерения (Н.А.Мягков, 1994). Определение возраста рыбы проводили по чешуе по Атласу Г.Г. Галкина (1958). На выбранных местах были найдены моллюски, систематическое положение которых представлено ниже:

Царство - Zoa

Подцарство - Metazoa

Надраздел - Eumetazoa

Раздел - Belateria

Тип - Mollusca

Подтип - Pulmonata

Класс - Gastropoda

Надотряд - Caenogastropoda

Отряд - Architaenioglossa

Надсемейство: Rissooidea

Семейство: Bithyniidae

Представители:leachii (Sheppard, 1823)

Отряд - Basommatophora

Надсемейство: Lymnaeoidea

Семейство: Lymnaeidae

Представители:ovata (Draparnaud, 1805)

сем. Planorbidae

род Planorbis

Представители:planorbis (Linnaeus, 1758)

Речная сеть Гомельской области целиком относится к бассейну Черного моря. Ее образуют система Днепра и его крупных притоков: Припяти, Сожа, Березины. Реки Гомельской области в основном относятся к Припятскому гидрологическому району, а северо-восточная часть находится в пределах Центральноберезинского района. Основой питания рек служит часть атмосферных осадков, остающаяся от испарения и транспирации (в теплое время они стекают в реки непосредственно после выпадения, в холодный период накапливаются на поверхности водосборов и стекают после таяния снега). По гидрологическому режиму реки Гомельщины относится к восточно-европейскому типу. Для них свойственно четко выраженное весеннее половодье и сравнительно устойчивые летне-осенняя и зимняя межени, которые иногда нарушаются паводками от дождей летом и во время оттепелей зимой. Среднее превышение половодья над самым низким уровнем на Соже - 4-5 м. В средний по водности год в период весеннего половодья проходит около 55-65 % годового стока, до 20-28 % приходится на летне-осеннюю межень и 13-16 % - на зимний период.

Средняя многолетняя температура воды за теплый период (май-сентябрь) около 160 С, в июне-августе - 20-210 С, однако в отдельные дни может повышаться до 25-270 С. В связи с мелиорированием речных долин и спрямлением русел рек температура воды в летнее время снижается на 3-40С, а зимой повышается на 1.0-1.50 С. Сож - второй по величине и водности приток Днепра. На территории Беларуси длина 648 км, из них более 300 км по территории Гомельской области. Долина Сожа трапециевидная, шириной 1.5-3 км, в нижнем течении (ниже г. Ветка) до 7 км, при слиянии с долиной Днепра до 20 км. Склоны пологие и умеренно крутые, высотой 15-25 м, изрезаны оврагами, ложбинами, долинами притоков. Почти на всем протяжении выделяются пойма с двумя уровнями (низкий - 1.5-2.5 м над врезом воды и высокий - 3-4 м) и две надпойменные террасы. Ширина поймы вниз по течению возрастает до 5-6 км. Она пересечена ложбинами, старыми руслами, небольшими озерами - старицами. Затапливается на глубину 0.5-2.5 м, в устьевой части до 4-5 м сроком на 5-30 суток. Первая надпойменная терраса развита чаще на левобережье, ее высота от 3-4 до 5-8 м, ширина 4-5 км, преимущественно аккумулятивная; вторая - аккумулятивная, высотой от 12-13 м до 20-22 м, наибольшая ширина (до15-18 км) ниже Гомеля. Здесь она сливается со второй надпойменной террасой Днепра. Русло извилистое, до Гомеля встречаются острова шириной 10-50м и длиной 30-300 м, песчаные, затапливаются, поросли кустарником. Ширина русла 90-125 м (местами до 230 м). Дно песчаное, реже песчано-илистое. Берега преимущественно пологие, на излучинах - обрывистые.

Озеро Любенское относится к старичным. Озера-старицы составляют подавляющее большинство озер области. Они приурочены к поймам крупных рек, прежде всего Днепра, Припяти, Сожа, отличаются небольшими размерами и глубинами, вытянутой серповидной формой, широким развитием водной растительности (Старик и др.). Гидрологический и гидрохимический режим озер зависит от особенностей их водного баланса, типа котловины и воздействия хозяйственной деятельности человека. Важную роль в жизни озер играет температурный режим. В летнее время водная масса мелководных озер полностью перемешивается и устанавливается режим гомотермии. В более глубоких озерах устанавливается прямая температурная стратификация, т.е. наблюдается понижение температуры от поверхности ко дну. Осенью и весной в результате вертикального перемешивания в них также устанавливается гомотермия. Зимой озера замерзают, мощность льда в наиболее суровые зимы может достигать 50 см, а ледостав продолжается с конца ноября до конца марта. В это время в них устанавливается обратная температурная стратификация: на поверхности температура воды около 00 С, у дна - возрастает до 40С и более. Уровень воды в озерах в течение года также изменяется. Наибольшим колебаниям подвержен уровень озер - стариц, т.к. он зависит от колебаний уровня воды в реке, в пойме которой расположено озеро. В других озерах колебания уровня значительно меньше, как правило, около 0.5 м. Максимальный уровень отмечается весной, а также во время интенсивного выпадения ливневых осадков. Минимальный уровень (межень) отмечается в январе и продолжается до начала интенсивного таяния снега, а также летом в периоды сухой жаркой погоды. Газовый режим озер зависит от температуры, интенсивности перемешивания и развития жизни в водоемах. На газовый режим влияют глубина озера, условия проточности, характер хозяйственного использования. Учитывая то, что подавляющее большинство озер Гомельской области имеют небольшую глубину, в летнее время в них наблюдается гомооксигения, т.е. содержание кислорода одинаково по всей водной толще, хотя насыщение им редко достигает 100 %, а чаще всего отмечается его небольшой дефицит (до 20-30 %). Как следствие, в воде озер почти постоянно присутствует растворенный углекислый газ. Зимой, подо льдом, водная масса озер обеднена кислородом, в придонном слое он часто полностью отсутствует. Интенсивное развитие процессов гниения отмерших остатков организмов вызывает отмечается повышенное поступление в воду сероводорода. В результате наблюдаются заморы рыбы, носящие иногда катастрофический характер. В водах озер растворены многие минеральные и органические вещества. Наибольшее значение имеют гидрокарбонатный ион (HCO3-), ионы кальция (Ca2+), магния (Mg2+), сульфатный (SO42-), хлора (Cl-), а также биогенные элементы: различные формы азота, фосфора и железа. Общая минерализация воды озер колеблется по сезонам: максимальная отмечается в конце зимы - до 350 мг/л, летом - 100-150 мг/л. Общая минерализация воды озер-стариц тесно связана с содержанием растворенных солей в реках, на поймах которых расположены озера. Для озер Гомельщины характерно высокое содержание растворенных органических веществ, особенно в водоемах, включенных в мелиоративные системы. Цветность воды, как правило, превышает 100 градусов. Основной гидрохимический показатель - активная реакция воды - чаще кислая (pH - 6.5-6.0), изредка близка к нейтральной (pH - 7.0-7.5). Прозрачность воды в озерах области невелика, обычно менее 1 м, при этом она возрастает зимой и резко сокращается (в два и более раза) к концу лета (август), когда наблюдается интенсивное развитие фитопланктона - «цветение воды». Органический мир озер представлен многочисленными видами растений и животных, богатство которых определяется особенностью строения озерных котловин, химическим составом и температурой воды, характером донных отложений. Среди надводных (полупогруженных) макрофитов здесь встречаются тростник, камыш, рогоз узколистный и широколистный, различные виды частухи, стрелолист, ежеголовник, манник и др. Из растений с плавающими листьями произрастают кубышка, кувшинка, рдест плавающий, водокрас, ряска, горец земноводный. Наиболее богато представлены подводные (погруженные) макрофиты: различные виды рдестов, телорез, элодея, уруть, лютик жестколистный, роголистник, водные мхи, и др. В прибрежной части озер, особенно у заболоченных берегов, широко распространены водноболотные растения, такие как аир, сабельник, ситник, ситняг, хвощ, калужница, ирис и др. В озерах Гомельщины распространены также некоторые виды макрофитов, занесенные в «Чырвоную кнiгу Рэспублiкi Беларусь». Это сальвиния плавающая (Salvinia natans), произрастающая в старичных озерах пойм Припяти и низовий ее притоков, Днепра (ниже устья Березины) и Сожа. Наиболее крупные ее заросли (площадью 1-3 га) отмечены в озере Карасино в Припятском национальном парке и озере Заозерье в Наровлянском районе. Кувшинка белая (Nymphaea alba) встречается в старичных озерах поймы Припяти и низовий ее притоков, Сожа и Днепра. Водяной орех плавающий, или чилим (Trapa natans) распространен в старичных озерах пойм Припяти, Днепра, Сожа и их притоков, а также низовий Березины. Каулиния малая (Caulinia minor) произрастает в старичных озерах в Брагинском (пойма Днепра, Лоевском (пойма Сожа) и Петриковском (пойма Припяти) районах. Альдрованда пузырчатая (Aldrovanda vesiculosa) сохранилась к настоящему времени в Гомельской области только в озере Червоном. Раньше она встречалась в Мозырском районе. Очень разнообразен фитопланктон озер Гомельщины. В его составе преобладают сине-зеленые водоросли. Среди животных организмов самую низкую ступень занимают представители зоопланктона: ветвистоусые и веслоногие рачки, коловратки - более 140 видов. Среди жителей дна (бентос) насчитывается около 300 видов: моллюски, олигохеты, хирономиды, ракообразные и др. На поверхности воды и в зарослях макрофитов встречаются водомерки, жуки (плавунцы и водолюбы), водяные ослики, гидры, мшанки и др. Озера населяют многочисленные рыбы: судак, лещ, щука, окунь, линь, налим, язь, карась, плотва, красноперка, ерш и др., являющиеся дополнительными хозяевами для трематод семейства описторхид. Отдельные озера зарыбляются серебряным карасем, карпом, белым амуром, толстолобиком. На озерах гнездятся многочисленные водоплавающие птицы, среди которых имеется целый ряд охраняемых: малая поганка (Житковичский, Жлобинский и Лельчицкийц районы), шилохвость (Ветковский, Житковичскиий и Лельчицкий районы), белоглазая чернеть (Брагинский, Житковичскиий, Мозырский, Светлогорский и Хойникский районы), большой крохаль (Житковичсий и Наровлянский районы), малая чайка и малая крачка (старицы пойм Припяти, Днепра. Березины, Сожа и их притоков), обыкновенный гоголь (Житковичский район), лебедь-шипун (Гомельский район).

Дно озер выстилают отложения различного происхождения: минеральные (пески, супеси, глины), органо-минеральные (илы и сапропели) и органические (торфянистые тонко- и грубодетритовые) сапропели. В их формировании участвуют аллохтонные (принесенные с водосбора) и автохтонные (образующиеся в результате химических и биологических процессов в водной массе) продукты. Вещественный состав, распределение осадков зависит от размеров озера, его водосбора, строения озерной чаши, трофности и других факторов. Терригенные отложения представлены песками. Супесями, глинами, галечным материалом, выстилают прибрежные части котловин и образуются при разрушении берегов. Органо-минеральные и органические осадки занимают основную часть дна (кремнеземистые, тонко- и грубодетритовые, смешанные илы и сапропели) и образовались в итоге накопления отмерших организмов и мелких илистых минеральных частиц. Высокоорганические и озерные отложения являются ценным полезным ископаемым, используются в сельском хозяйстве, промышленности строительных материалов, медицине.

Рисунок 3 - Озеро Любенское

Для сбора моллюсков применяли следующие материалы и оборудование: блокнот, ручка, водный сочок и скребок, стеклянные банки на 3л с речной водой.

Для камеральной обработки использовали микроскоп, стекла для компрессория, препаровальные иглы, пинцеты, скальпели.

На месте пляжа №1 оз.Любенского было собранно по 20 представителей моллюсков видов Bithynia leachi, Planorbis planorbis и 15 представителей моллюсков Lumnaea ovate. Моллюски были собраны водным сочком в прибрежной растительности и помещены в банки с речной водой, для дальнейшей транспортировки и препарирования.

На месте пляжа №2 оз.Любенского было собранно 20 представителей моллюсков видов Bithynia leachi и 15 представителей моллюсков Lumnaea ovate.

Сбор моллюсков производится теми же методами, которые применяют для сбора донной фауны водоемов. При сборах для определения количества моллюсков можно применяли квадратные рамки площадью от 0,1 до 1,0 м2, выбирали внутри них моллюсков скребком или руками. В прибрежье прудов, озер и рек богатые сборы приносит осмотр вынимаемых камней, коряг и выдергиваемых с корнем растений.

При поиске моллюсков осматривали крупные погруженные в воду предметы, с которых аккуратно собирали моллюски. Бентосным сачком (диаметр обода 33 см) с лодки и берега облавливалась площадь 5 м2 на расстоянии 2 м от берега. Для этого сачок несколько раз проводили под углом 45о по водным растениям на глубине 20 - 50 см.

Промывку и выборку моллюсков из грунта производили или методом отмучивания с фильтрацией через металлическое сито, или, в случае однородного мелкого песка, пропусканием всей пробы через металлическое сито. В пробу собранных моллюсков вкладывалась этикетка, где повторяли важнейшие данные журнальной записи. Транспортировка моллюсков в лабораторию проводилась в термосах с предварительно охлажденной водой. В лаборатории доставленные моллюски помещали в аквариумы емкостью 5 л. При этом рацион кормления состоял из сухого корма для рыб.

Паразитологическое исследование проводилось по традиционным методикам стандартным компрессионным методом с последующей микроскопией и фотофиксацией. Препаровальной иглой отделяли 2-3 первых оборота раковины у прудовика и битинии, у катушек выделяются центральные обороты, извлекали пищеварительную железу (гепатопанкреас), и помещали на предметное стекло в каплю воды, накрывая покровным, слегка раздавливая и микроскопировали под световым микроскоп при малом увеличении. При этом в гепатопанкреасе инвазированного моллюска будут отчетливо видны подвижные личинки.

Из бумаги «в клеточку» вырезали шаблон размером немного больше предметного стекла и в нем прорезали квадратное отверстие 0,5 х 0,5 см. Шаблон накладывали под препарат, на столик микроскопа и все вместе просматривали при малом увеличении, подсчитывая число личинок в квадрате шаблона. Передвигая шаблон под препаратом и, смещая отверстие, операцию повторяли несколько раз, подсчитывая число личинок в разных зонах препарата. Из полученных результатов находили среднее число личинок в 0,25 см2, затем этот показатель экстраполируется на всю площадь предметного стекла, получая число личинок в препарате, т.е. в гепатопанкреасе инвазированного моллюска. Интенсивность инвазии моллюска определялась по числу сформированных партенит.

Для последующих морфологических исследований гепатопанкреас моллюска фиксировали в 70 % растворе С2Н5ОН.

В основу математической обработки исследуемого материала положен метод количественного учета зоологических паразитических данных.

Вторая часть работы заключалась в удалении печени моллюсков и дальнейшем её микроскопировании. На рисунке 4 вы можете увидеть схематичное расположение печени у брюхоногих моллюсков.

Рисунок 4 - Пищеварительная система моллюсков класса Gastropoda

Печень просматривали на наличие паразитов. Так как после инвазии моллюска яйцами дальнейшее развития описторхида происходит в печени моллюска. Развитие в печени идёт в три этапа:

Спороциста

Редия

Церкария

В процессе изучения печени моллюсков, отобранных на участке пляжа № 1, удалось выявить 13 зараженных особей Bithynia leachi из 20 пойманных экземпляров, 8 зараженных особей Planorbis planorbis из 20 отловленных экземпляров и 7 зараженных особей Lumnaea ovate из 15 особей. Достаточно большое количество зараженных видов может свидетельствовать о том, что паразиты имеют шанс заражения окончательного хозяина для завершения цикла развития. Большое количество отдыхающих и водоплавающих птиц в летний период даёт благоприятную почву для развития паразитов. В тоже время, как отмечалось ранее, заражение популяции паразитами может повлиять на всю популяцию в целом, вплоть до снижения численности. Однако из-за огромной кормовой базы моллюски, птицы, и скорей всего различные млекопитающие не чувствуют угнетения со стороны паразитов.

На втором исследуемом участке пляжа № 2, из 20 отобранных особей моллюсков вида Bithynia leachi было отмечено 9 зараженных моллюсков, а моллюсков вида Lumnaea ovate из 15 заражено было только 4. Это намного меньше чем на первом участке, однако, так же происходит тесный контакт паразитов с его основными хозяевами. Статистическая обработка материала проводилась по следующим формулам:

) Экстенсивность инвазии показывает относительное количество особей вида-хозяина, зараженных гельминтами по отношению ко всему числу исследованных особей

ЭИ (Е) = n / N х 100 %, (1)

где n - число зараженных особей хозяев;- число исследованных особей хозяев.

) Индекс обилия - среднее число особей данного вида, приходящееся на единицу учета. При учете гельминтов первой естественной единицей учета служит особь хозяина, и в этом случае индекс обилия выражает среднее число особей гельминтов на одну особь хозяина.

М = m / N, (2)

где m - число обнаруженных гельминтов в исследованной выборке хозяев;- число исследованных особей хозяев.

) Интенсивность инвазии - среднее число гельминтов, рассчитанное на одну особь зараженного хозяина.

ИИ (I) = m / n, (3)

где m - число обнаруженных гельминтов в исследованной выборке хозяев;- число зараженных особей хозяев.

3. Результаты исследований и их обсуждение

.1 Паразитологический анализ исследуемых групп брюхоногих моллюсков

Исследования проводились на вышеуказанном биотопе в летний период 2013 и 2014 годов. За весь период исследований было обработано два участка в пределах исследуемого биотопа. Участки были выбраны с учётом большого числа отдыхающих в летний период. Всего за период исследований было отловлено 90 представителей класса Gastropoda. Для достижения поставленной цели исследований были решены следующие задачи:

определить видовую принадлежность первого промежуточного хозяина трематод, численности и плотности моллюска и определение экстенсивности (ЭИ, %) и интенсивности (ИИ, %) инвазии трематод в популяциях моллюсков;

установить видовой диапазон вторых промежуточных хозяев (рыбы) описторхиса, определить ЭИ и ИИ метацеркария описторхиса в популяциях хозяев - промысловых рыб.

Отловленные моллюски по систематическому положению относятся к видам: Bithynia leachi, Planorbis planorbis и Lumnaea ovate. Это широко распространенные и многочисленные виды моллюсков в Беларуси, которые легко осваивает территории, несущие антропогенную нагрузку, и вероятнее всего загрязненные воды, как следствие человеческой деятельности.

Обследование печени моллюсков дало общее представление о зараженности моллюсков паразитом Opisthorchis felineus и Paramphistomum cervi.

Сбор моллюсков проводили по стандартной малакологической методике, с помощью гидробиологических орудий лова; вручную собирали моллюсков, находящихся на веточках водных растений или на поверхности кусков древесины по берегам водоема. Пробы бентоса и фито-, зоопланктонов отбирали дночерпателеми, бентосными сачками, а также усовершенствованными скребками. Исследовали пробы на наличие моллюсков методом промывания.

Материалы фиксировали 70 %-м этанолом; видовую идентификацию моллюсков осуществляли с применением конхологических и анатомических методов. Видовую принадлежность моллюсков определяли по Я.И. Старобогатову, С.А. Беэру, Ю.В. Беляковой, Е.Г. Сидорову (1970; 1977; 1986; 1987). Работа на двух участках одного биотопа, позволила нам выявить определённое различие в зараженности моллюсков между двумя участками. Сами участки находятся относительно далеко друг от друга, и имеют некоторые отличия по составу грунта, глубине, наличию растительности, размерных характеристик, степени воздействия со стороны отдыхающих.